一、冷冻保存胎肝细胞移植治疗急性辐射损伤（论文文献综述）
王永娟[1]（2021）在《LR12在TAA诱导的急性肝衰竭中的治疗作用及机制研究》文中研究表明急性肝衰竭（ALF）是一种罕见而严重的疾病,威胁着人类的健康。肝移植是治疗ALF最有效的方法。然而,由于供体器官缺乏、价格高昂等因素导致肝移植应用受限。因此,寻找治疗ALF的新方法迫在眉睫。肝细胞坏死导致肝脏募集大量的炎症细胞,进而引发全身炎症反应综合征（SIRS）为ALF的病理机制之一。因此,抑制炎症反应是治疗ALF的关键。小分子多肽LR12能够抑制髓样细胞表达触发受体1（TREM-1）的激活,对多种炎症疾病具有治疗作用。然而,LR12在ALF中的作用尚不清楚。肝再生不足以代偿肝细胞坏死,导致肝功能缺失,进而引发多器官功能衰竭是ALF的病理机制之一。肝脏是一个具有强大再生能力和显着调节最终质量能力的器官。以往的研究表明,肝再生是ALF存活的关键因素。然而,LR12是否能够促进肝再生尚不清楚。本研究建立了TAA诱导的ALF小鼠模型,观察LR12对ALF小鼠肝脏损伤的作用及肝再生的作用;通过体外建立TAA诱导的肝细胞损伤模型,探讨LR12促进肝细胞再生的机制;本研究通过细胞因子芯片技术筛选出LR12作用于巨噬细胞促进肝再生的关键因子,并通过体外和体内实验进一步验证。本课题主要包括以下四部分:第一部分LR12减轻TAA诱导的ALF小鼠肝脏损伤,促进肝细胞再生目的:本研究旨在建立硫代乙酰胺（TAA）诱导的ALF小鼠模型,观察LR12对ALF的治疗作用。方法:1.腹腔注射TAA建立ALF小鼠模型。实验分组:对照组、TAA组、LR12组及TAA+LR12组。2.苏木素-伊红（H&E）染色检测肝脏病理变化。赖氏法检测血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）的含量。3.观察TAA组和TAA+LR12组小鼠的存活率。4.Western blot方法检测小鼠肝脏中PCNA的表达。5.激光共聚焦（CLSM）方法检测小鼠肝脏中肝细胞标志角蛋白18（CK18）与增殖指标增殖细胞核抗原（PCNA）的共定位及表达情况。结果:1.造模后,TAA组小鼠肝脏可见肝细胞出血性坏死,而TAA+LR12组肝细胞出血性坏死面积减少（P<0.001）。2.TAA组ALT、AST水平较对照组显着升高,而TAA+LR12组ALT、AST水平较TAA组显着降低（P<0.01）。3.TAA+LR12组小鼠存活率显着高于TAA组（P<0.05）。4.TAA+LR12组小鼠肝脏中PCNA蛋白表达量较TAA组上调（P<0.01）。5.与TAA组相比,TAA+LR12组小鼠肝脏中CK18与PCNA共定位的细胞数显着增多（P<0.001）。结论:LR12能够减轻TAA诱导的ALF小鼠肝脏损伤,促进肝细胞再生。第二部分:LR12通过作用于巨噬细胞促进TAA诱导的肝细胞损伤模型中肝细胞增殖目的:本研究旨在建立TAA诱导的肝细胞损伤模型,研究LR12促进肝细胞再生的机制。方法:1.建立不同浓度TAA诱导的LO2细胞损伤模型,Western blot方法检测PCNA的表达。2.应用TAA或联合LR12刺激LO2细胞,CLSM和Western blot方法检测PCNA的表达。3.应用TAA或联合LR12刺激巨噬细胞后的上清液刺激LO2细胞或原代肝细胞,CLSM和Western blot方法检测PCNA的表达。4.流式细胞术（FCM）检测LO2细胞的细胞周期。结果:1.1 mM TAA组、2 mM TAA组LO2细胞中PCNA蛋白表达量较对照组显着降低（P<0.05）。2.TAA组LO2细胞中PCNA蛋白表达量较对照组显着降低,而TAA+LR12组PCNA蛋白表达量较TAA组无显着变化（P>0.05）。3.Supernatant-TAA组LO2细胞中PCNA蛋白表达量较对照组显着降低,而Supernatant-TAA+LR12组PCNA蛋白表达量较Supernatant-TAA组显着升高（P<0.01）。原代肝细胞的结果与LO2细胞的结果一致。4.Supernatant-TAA组LO2细胞S期细胞比例较对照组显着降低,而Supernatant-TAA+LR12组S期细胞比例较Supernatant-TAA组显着增多（P<0.01）。结论:LR12通过作用于巨噬细胞促进TAA诱导的肝细胞损伤模型中肝细胞增殖。第三部分:LR12通过促进巨噬细胞分泌CCL20促进TAA诱导的ALF小鼠肝细胞再生目的:本研究旨在探讨LR12作用于巨噬细胞促进肝细胞再生的机制。方法:1.应用细胞因子芯片技术筛选TAA或联合LR12刺激巨噬细胞上清液中与增殖相关的细胞因子。2.酶联免疫吸附实验（ELISA）方法及实时荧光定量聚合酶链反应（q-RT-PCR）方法检测C-C趋化因子配体20（CCL20）的表达。3.建立TAA诱导的ALF小鼠模型,CLSM方法检测巨噬细胞标志F4/80与CCL20的共定位及表达情况。4.将LO2细胞分为对照组,TAA组,CCL20组及TAA+CCL20组,Western blot方法检测PCNA的表达。5.将LO2细胞分为Supernatant-TAA+LR12组和Supernatant-TAA+LR12+anti-CCL20组,Western blot方法检测PCNA的表达。6.将小鼠分为TAA+LR12+Ig G组和TAA+LR12+anti-CCL20组,H&E染色检测肝脏病理变化。7.赖氏法检测血清ALT、AST的含量。8.CLSM方法检测小鼠肝脏中肝细胞标志CK18与PCNA的共定位及表达情况。结果:1.Supernatant-TAA组巨噬细胞上清液中CCL20蛋白表达量较对照组显着降低,而Supernatant-TAA+LR12组CCL20蛋白表达量较Supernatant-TAA组显着升高（P<0.05）。2.ELSA及PCR结果与芯片结果一致。3.与TAA组相比,TAA+LR12组小鼠肝脏中F4/80与CCL20共定位细胞数显着升高（P<0.001）。4.TAA组LO2细胞中PCNA蛋白表达量较对照组显着降低,而TAA+CCL20组PCNA蛋白表达量较TAA组显着升高（P<0.01）。5.与Supernatant-TAA+LR12组相比,Supernatant-TAA+LR12+anti-CCL20组LO2细胞中PCNA蛋白表达量显着降低（P<0.01）。6.与TAA+LR12+Ig G组相比,TAA+LR12+anti-CCL20组小鼠肝细胞出血性坏死面积显着增加（P<0.001）。7.与TAA+LR12+Ig G组相比,TAA+LR12+anti-CCL20组小鼠ALT、AST水平显着升高（P<0.05）。8.与TAA+LR12+Ig G组相比,TAA+LR12+anti-CCL20组小鼠肝脏中CK18与PCNA共定位的细胞数显着减少（P<0.001）。结论:LR12通过促进巨噬细胞分泌CCL20促进TAA诱导的ALF小鼠肝细胞再生。第四部分:LR12通过促进巨噬细胞分泌CCL20激活肝细胞内p38 MAPK途径促进TAA诱导的ALF小鼠肝细胞再生目的:本研究旨在阐明LR12通过促进巨噬细胞分泌CCL20调控肝细胞再生的机制。方法:1.应用TAA或联合LR12刺激巨噬细胞后的上清液刺激LO2细胞,Western blot方法检测LO2细胞中p-p38的表达。2.建立TAA诱导的ALF小鼠模型,提取原代肝细胞,Western blot方法检测原代肝细胞中p-p38的表达。3.将LO2细胞分为Supernatant-TAA+LR12组和Supernatant-TAA+LR12+anti-CCL20组,Western blot方法检测LO2细胞中p-p38的表达。4.将小鼠分为TAA+LR12+Ig G组和TAA+LR12+anti-CCL20组,CLSM方法检测肝细胞中p38的核转位情况。结果:1.Supernatant-TAA组LO2细胞中p-p38蛋白表达量较对照组显着降低,而Supernatant-TAA+LR12组p-p38蛋白表达量较Supernatant-TAA组显着升高（P<0.01）。2.TAA+LR12组小鼠原代肝细胞中的p-p38蛋白表达量较TAA组显着上调（P<0.05）。3.与Supernatant-TAA+LR12组相比,Supernatant-TAA+LR12+anti-CCL20组LO2细胞中p-p38蛋白表达量显着下调（P<0.001）。4.与TAA+LR12+anti-CCL20组相比,TAA+LR12+Ig G组小鼠可见肝细胞中p38核转位。结论:LR12通过促进巨噬细胞分泌CCL20激活肝细胞内p38 MAPK途径促进TAA诱导的ALF小鼠肝细胞再生。
邵帅,王开秀,丁涛,姜经航,王婷婷,刘波,江梅[2]（2020）在《男性肿瘤患者生育力保存的研究进展》文中进行了进一步梳理近年来,随着医疗技术的进步,肿瘤患者尤其是年轻肿瘤患者治疗后生存率极大地提高,5年生存率接近80%。目前患者最主要的担忧是肿瘤治疗方式,如手术、化疗、放疗以及肿瘤本身引起的睾丸生精功能和精液质量下降,会导致生育力不可逆的损伤,甚至不育。因此,对于有生育需求的男性肿瘤患者,生育力保存显得极其重要。在肿瘤开始化疗或放疗之前进行自体精液冻存是最常用、最成熟的技术,睾丸组织冷冻保存也逐渐运用于临床,而干细胞技术也为无精子症患者提供新的选择。本文就肿瘤对男性生育力的影响以及男性肿瘤患者生育力保存方法进行综述,以提供理论依据。
束明慧[3]（2020）在《丹参酮ⅡA联合脐带间充质干细胞治疗大鼠放射性肺损伤的实验研究》文中提出目的:筛选合适放射剂量建立放射性肺损伤（RILI）模型,通过观察丹参酮ⅡA联合脐带间充质干细胞对RILI大鼠体重、外观、Smad3、P-Smads3、Smad7及TGF-β1蛋白表达水平、血清细胞因子以及肺组织病理的影响,初步探讨丹参酮ⅡA联合脐带间充质干细胞对大鼠RILI的疗效。方法:（1）实验第一部分:分别使用15、18、20Gy不同剂量的60 Coγ射线照射同组别大鼠双侧胸部,筛选合适放射剂量建立大鼠RILI模型。（2）实验第二部分:将SPF级成年雌性SD大鼠60只,除12只假手术组外,其它4组均予全胸部18Gy一次性照射建模;造模后予假手术组（A组12只,腹腔和尾静脉注射生理盐水）、模型对照组（B组12只,腹腔和尾静脉注射生理盐水）、丹参酮IIA组（C组12只,腹腔注射丹参酮IIA注射液,尾静脉注射生理盐水）、HUMSCs组（D组12只,腹腔注射生理盐水,尾静脉注射HUMSCs）、丹参酮IIA+HUMSCs组（E组12只,腹腔注射丹参酮IIA注射液且尾静脉注射HUMSCs）,且各组腹腔注射均为造模后连续30天注射15ml/kg/d,尾静脉注射为造模后单次注射1ml。分别于第30天及60天两个时间点随机抽取各组6只大鼠处死,检测大鼠体重、外观评分;使用酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清中转化生长因子β1（TGF-β1）、促炎症细胞因子白介素6（IL-6）的表达;对肺组织进行HE及Masson染色;蛋白印迹法（Western Blot,WB）检测大鼠肺组织Smad3、P-Smads3、Smad7及TGF-β1蛋白表达水平。对相关实验指标进行统计分析,初步探讨丹参酮ⅡA联合脐带间充质干细胞对大鼠RILI的疗效。结果:（1）筛选并确定18Gy为合适放射剂量,建立大鼠放射性肺损伤模型。（2）各组大鼠体重评价的比较:实验前各组大鼠体重无统计学差异（P>0.05）。与假手术组比较,第30天、第60天,模型组、丹参酮IIA组、HUMSCs组、丹参酮IIA联合HUMSCs组体重均显着低于假手术组组（P<0.05）。与模型组比较,第30天、第60天,假手术组、丹参酮IIA组、HUMSCs组、丹参酮IIA联合HUMSCs组体重显着高于模型组（P<0.05）。丹参酮IIA组、HUMSCs组、丹参酮IIA联合HUMSCs组间体重在第30天差异无统计学意义（P>0.05）。在第60天,丹参酮IIA联合HUMSCs组体重显着高于丹参酮IIA组和HUMSCs组（P<0.05）,丹参酮IIA组和HUMSCs组两组体重在第60天差异无统计学意义（P>0.05）。（3）各组大鼠外观评分的比较:第30天时假手术组大鼠评分显着高于模型组、丹参酮IIA组、HUMSCs组和丹参酮IIA联合HUMSCs组,差异具有统计学意义（P<0.05）。而模型组评分显着低于假手术组、丹参酮IIA组、HUMSCs组和丹参酮IIA联合HUMSCs组,差异具有统计学意义（P<0.05）。丹参酮IIA组、HUMSCs组和丹参酮IIA联合HUMSCs组三组间评分未见统计学差异（P>0.05）。第60天时各组评分差异显着,评分由高到低分别为假手术组、丹参酮IIA联合HUMSCs组、丹参酮IIA组、HUMSCs组、模型组,差异均具有统计学意义（P<0.05）。（4）各组大鼠肺组织病理评价的比较:第30天时,各组肺组织炎症评分由高到低分别为模型组、丹参酮IIA组、HUMSCs组、丹参酮IIA联合HUMSCs组,其中丹参酮IIA组、HUMSCs组两组间无统计学差异（P>0.05）,其余各组之间的差异均具有统计学意义（P<0.05）。第60天时,模型组、丹参酮IIA组、HUMSCs组三组的炎症评分显着高于丹参酮IIA联合HUMSCs组,差异具有统计学意义（P<0.05）,模型组、丹参酮IIA组、HUMSCs组三组间无显着统计学差异（P>0.05）。肺组织纤维化方面,第30天和第60天时,纤维化评分由高到低均为模型组、丹参酮IIA组、HUMSCs组、丹参酮IIA联合HUMSCs组,差异均具有统计学意义（P<0.05）。（5）各组大鼠血清TGF-β1和IL-6水平的比较:本实验第30天,各组大鼠TGF-β1和IL-6水平由高到低分别为模型组、丹参酮IIA组、HUMSCs组、丹参酮IIA联合HUMSCs组、假手术组,实验第60天,各组大鼠TGF-β1水平由高到低分别为模型组、丹参酮IIA组、HUMSCs组、丹参酮IIA联合HUMSCs组、假手术组,但各组IL-6水平差异无统计学意义。（6）各组大鼠肺组织中Smad3、P-Smad3、Smad7、TGF-β1蛋白表达水平的比较:实验第30天和第60天,各组大鼠TGF-β1、Smad3、P-Smad3蛋白表达水平由高到低分别为模型组、丹参酮IIA组、HUMSCs组、丹参酮IIA联合HUMSCs组、假手术组。而Smad7表达水平由高到低分别为假手术组、丹参酮IIA联合HUMSCs组、HUMSCs组、丹参酮IIA组、模型组。结论:（1）在一定条件下对大鼠进行18Gy的照射剂量放疗可建立大鼠放射性肺损伤模型。（2）丹参酮IIA、HUMSCs及两者联合使用均可减轻肺泡炎症反应,延缓肺纤维化进程,对肺组织起到保护作用。（3）丹参酮和HUMSCs其对放射暴露后肺组织的保护机制可能是通过多个途径实现:（1）下调TGF-β1蛋白表达,下调Smad3及p-Smad3蛋白表达,上调Smad7蛋白表达。（2）抑制血清中促炎性因子IL-6和促纤维化因子TGF-β1的释放。（4）两者联合使用可进一步下调TGF-β1、Smad3、p-Smad3蛋白表达,上调Smad7蛋白表达。
刘芳[4]（2019）在《miPS对小鼠辐射损伤的修复及作用机制研究》文中研究说明目的:本课题通过系统掌握小鼠多能干细胞（miPS）的培养流程,初步研究miPS在小鼠辐射造成的血液系统,免疫系统损伤方面有修复作用,通过指标检测明确了miPS在氧化应激,凋亡,炎症方面对辐射损伤起修复作用。为辐射损伤的治疗提供理论可行性。方法:这个实验一共有两部分,其中一部分进行miPS的培养。首先将ICR雄性小鼠原代胚胎成纤维细胞（MEF）分离出来,传代进行培养,检测确定其未被支原体污染可作为miPS的滋养层。然后将miPS接种在丝裂霉素C（MMC）处理过的MEF上进行传代培养,通过生物学特性以及未分化等特性,确立建立稳定miPS培养体系。第二部分100只ICR小鼠,随机分成4个组,分别为Control组,NaCl组,NaCl+iPS组,iPS+iPS组。Control组:不辐射,只注射生理盐水。后3组用6MeV电子辐射线源全身性照射,总辐射量为8Gy,每分钟照射1.0 Gy。NaCl组:辐射后12h和24h,尾静脉注射生理盐水;NaCl+iPS组:辐射后12h和24h,分别尾静脉注射含2×106个miPS细胞的200ul生理盐水和等体积的生理盐水;iPS+iPS组:辐射后12h和24h,均在小鼠的尾静脉注射等体积的miPS细胞液。注射miPS细胞后的第1天,第3天,第7天,第14天分别观察小鼠的生活状态,记录小鼠的成活率以及检测血象指标;观察肠病理形态学变化以及TUNEL染色中细胞凋亡情况;脾脏病理形态学变化及脾指数,脾结节分析,测定凋亡基因及炎症基因的表达情况;观察肝脏病理形态学变化,测定脂质过氧化物即肝脏中丙二醛（MDA）水平的高低;抗氧化物即超氧化物歧化酶活性（SOD）及纤维化基因的表达情况。结果:培养出了高质量的miPS细胞,为接下来的实验奠定了可靠基础;从实验小鼠生活状态和血象方面,NaCl组与Control组相比小鼠的死亡率显着性升高,白细胞（WBC）,红细胞（RBC）,血小板（PLT）,血红蛋白（HGB）,淋巴细胞比率（LYMP%）均处于下降状态,中性粒细胞（Gran%）呈现升高水平。iPS处理组比NaCl组以上指标均有所改善;从组织形态学方面,NaCl组与Control组相比,小鼠的脾脏,肝脏,肠道均出现形态学上的病理性改变,NaCl+iPS组和NaCl组比较,稍有所好转,而iPS+iPS组则随着时间增长发生明显改善。从氧化、凋亡、炎症方面,NaCl组与Control组相比均受到严重性的损伤,iPS处理组比NaCl组在这些方面均有再生修复作用。结论:本实验表明miPS对血液系统和免疫系统的辐射修复作用归因于其具有再生治疗的能力。在电离辐射所引起的氧化应激,细胞凋亡,炎症及炎症引发的纤维化方面的损伤均有所改善。
李金亮[5]（2019）在《炎症激活骨髓间充质干细胞条件培养基对体外辐射损伤小肠上皮细胞的修复作用和机制研究》文中进行了进一步梳理背景辐射性小肠损伤多发生于腹腔、盆腔恶性肿瘤放射治疗后,临床表现为腹痛、腹泻、血便、营养不良,严重可出现脓毒血症、感染性休克等危及生命的并发症,严重影响肿瘤患者的生存质量。然而,对于辐射性小肠损伤,目前仍无理想的治疗方法。间充质干细胞具有强大的自身分化及旁分泌能力,广泛用于组织损伤修复。间充质干细胞培养基（conditioned medium from mesenchymal stem cells,MSC-CM）富含间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）旁分泌的生物活性因子,且无干细胞移植的风险,是干细胞移植的理想替代方案。课题组前期研究表明炎症预激活的间充质干细胞条件培养基能促进辐射损伤小肠组织学结构和功能的修复,改善急性辐射损伤大鼠生存状态,但其潜在的细胞机制未进一步探讨。目的明确不同状态MSC-CM对小肠上皮细胞（IEC-6）增殖、凋亡的影响及探讨相关旁分泌机制,为优化MSC-CM的临床应用提供理论基础和实验室依据。方法1.小肠隐窝IEC-6细胞分为对照组、辐射损伤组、辐射损伤+MSC-CMIEC-6（NOR）组和辐射损伤+MSC-CMIEC-6（IR）组,后3组以10 Gy X射线一次性照射IEC-6细胞建立体外急性小肠辐射损伤模型,对照组及辐射损伤组加入DMEM-F12培养基,辐射损伤+MSC-CMIEC-6（NOR）组加入正常状态间充质干细胞条件培养基,辐射损伤+MSC-CMIEC-6（IR）组加入炎症激活状态间充质干细胞条件培养基。辐射损伤后第1,3,5,7天行各组IEC-6细胞存活数的检测,第3d收集细胞行免疫荧光PCNA染色观察增殖改变,行TUNEL凋亡染色及Western blot蛋白免疫印迹法观察凋亡改变。2.ELISA检测试剂盒检测炎症预激活MSC-CM上清液旁分泌因子的含量。结果与结论1.与辐射损伤组相比,辐射损伤+MSC-CMIEC-6（IR）组IEC-6细胞PCNA阳性细胞数明显增加（P<0.05）,TUNEL 阳性细胞数下降（P<0.05）,凋亡相关因子Caspases-3蛋白表达明显下降（P<0.05）,而辐射损伤+MSC-CMIEC-6（NOR）组的各项指标变化无统计学意义（P>0.05）,结果表明辐射炎症环境下激活的MSCs条件培养基（MSC-CMIEC-IEC-6（IR））能促进损伤小肠细胞的修复,而正常培养环境的MSCs条件培养基(MSC-CMIEC-6（NOR）未见明显的修复作用,其修复机制包括促进小肠上皮细胞增殖,抑制细胞凋亡。2.与MSC-CMIEC-6（NOR）相比,MSC-CMIEC-6（IR）中多种重要的旁分泌因子（VEGF、bFGF、IGF-1、IL-10）显着升高,差异有统计学意义（P<0.05）,这些因子具有增强细胞再生,抑制凋亡、促进血管生成等一系列与小肠修复相关的生物学特性,表明上述因子水平的上升可能与促进放射性小肠损伤修复有关。
郑跃[6]（2019）在《炎症预激活骨髓间充质干细胞旁分泌对急性辐射小肠损伤炎症反应的作用与机制研究》文中指出急性辐射小肠损伤（radiation-induced intestinal injury,RⅢ）常见于腹腔、盆腔恶性肿瘤放射治疗患者,高达90%-95%的患者可发生不同程度的急性辐射小肠损伤,临床上可出现频繁呕吐、腹泻及便血等症状,重症患者可出现脓毒血症、贫血、消瘦等表现,严重影响患者生存质量及放射治疗的进一步应用。目前急性辐射小肠损伤的发病机制未完全明确,临床上尚缺乏有效的治疗手段。因此,需深入探讨急性辐射小肠损伤的发病机制以寻找更有效的治疗方法。目前研究认为急性辐射小肠损伤的病理生理机制是肠道炎症级联反应的激活。近年研究显示骨髓间充质干细胞具有强大的免疫调节和抗炎能力,而前期实验发现,炎症预激活骨髓间充质干细胞条件培养基可促进急性辐射小肠损伤结构和功能的修复,但其对急性辐射小肠损伤炎症反应的作用与机制目前尚未明确。本实验将观察炎症预激活骨髓间充质干细胞条件培养基对急性辐射小肠损伤炎症反应的影响,并初步探讨其作用机制。方法第一章炎症预激活骨髓间充质干细胞旁分泌对急性辐射小肠损伤炎症反应的作用研究1.骨髓间充质干细胞的分离、培养和鉴定。2.间充质干细胞条件培养基的制备:分别制备辐射炎症预激活骨髓间充质干细胞条件培养基(MSC-CMIEC-6（IR）及正常状态间充质干细胞条件培养基（MSC-CMIEC-6（NOR））。3.随机将SD大鼠分为正常对照组（n=10）、单纯辐射损伤组（IR+DMEM-F12组）（n=20）、辐射损伤+正常状态间充质干细胞条件培养基治疗组(IR+MSC-CMIEC-6（NOR）组（n=20）、辐射损伤+辐射炎症预激活骨髓间充质干细胞条件培养基治疗组(IR+MSC-CMIEC-6（IR）组（n=20）,使用尾静脉联合腹腔给药。于辐射后第3天取材评价各组小肠组织病理学变化;同时分别取小肠组织及血清检测各炎症因子水平（n=10/group）。Kaplan-Meier方法对辐射后各组大鼠进行生存分析（n=10/group）。第二章炎症预激活骨髓间充质干细胞条件培养基调节急性辐射小肠损伤炎症反应的作用机制研究1.检测MSC-CMIEC-6（IR）和MSC-CMIEC-6（NOR）上清液中肿瘤坏死因子激活基因6蛋白、白细胞介素10、转化生长因子β1和吲噪胺2,3-双加氧酶的水平。2.辐射后第3天取各组小肠肠系膜淋巴结组织用流式细胞仪检测CD4+Foxp3+Treg细胞数量百分比（n=10/group）。结果1.辐射炎症预激活骨髓间充质干细胞条件培养基可显着改善大鼠急性辐射小肠损伤后小肠上皮绒毛及隐窝结构,大鼠的生存时间显着延长（P<0.05）。2.辐射炎症预激活骨髓间充质干细胞条件培养基能显着降低大鼠急’性辐射小肠损伤后小肠组织中前炎症因子白细胞介素1β、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平,同时显着升高抗炎因子白细胞介素10 水平（P<0.05）;同样,可显着降低急性辐射小肠大鼠损伤血清中前炎因子Activin A、白细胞介素1β、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平,同时显着升高抗炎因子白细胞介素10 水平（P<0.05）。3.与正常状态骨髓间充质干细胞条件培养基相比,辐射炎症预激活骨髓间充质干细胞条件培养基中的肿瘤坏死因子激活基因6蛋白、白细胞介素10、转化生长因子β1和吲哚胺2,3-双加氧酶的水平明显升高（P<0.05）。4.辐射炎症预激活骨髓间充质干细胞条件培养基能显着增加辐射后第3天大鼠小肠肠系膜淋巴结中CD4+Foxp3+Treg细胞数量百分比（P<0.05）。结论1.辐射炎症预激活骨髓间充质干细胞条件培养基能显着抑制大鼠急性辐射小肠损伤后在全身水平及小肠黏膜的炎症反应,参与炎症反应的免疫调节,促进小肠黏膜损伤的修复,延长大鼠的生存时间。2.辐射炎症预激活骨髓间充质干细胞条件培养基调节大鼠急性辐射小肠损伤炎症反应的作用机制可能包括:（1）辐射炎症预激活骨髓间充质干细胞通过分泌抗炎因子直接参与炎症反应过程,调节前炎因子/抗炎因子的平衡;（2）辐射炎症预激活骨髓间充质干细胞可分泌免疫调节因子促进小肠肠系膜淋巴结中T淋巴细胞向CD4+Foxp3+Treg细胞的转化,上调CD4+Foxp3+Treg细胞的比例,抑制急性辐射小肠损伤的炎症反应。
胡万盛[7]（2019）在《三维培养高传代脂肪干细胞与内皮集落形成细胞治疗慢性放射性溃疡的实验研究》文中研究说明背景和目的:干细胞是体内一种可以自我增殖、多向分化以及具有强大的旁分泌功能的细胞。而脂肪干细胞因其大量体内脂肪组织来源,其强大的自我增殖及旁分泌能力可应用于临床,治疗多种疾病,例如糖尿病足的难愈性创面[1]。但干细胞经过体外的培养扩增过程中,细胞会出现衰老,形态会发生改变,其增殖分化潜能会明显的降低,并且细胞更容受到外界的环境影响而死亡[2]。这无疑大大影响了细胞的治疗效果。对于提升干细胞治疗潜能的方法有很多,例如人工支架材料[3]、异种生物材料[4]等。这些方法都不可避免的引入了外来材料,或者加入可能对机体有害的化学试剂[5]。本身存在相对更高的治疗成本,更是引入了相对潜在的危险因素,可能对机体造成损害。根据研究团队成员之前的实验发现可以知道,本身存在于细胞外基质中的成分透明质酸可以用于三维的细胞培养[6]。其具有非常安全的生物性能。通过三维培养微球的方式可以增加干细胞的干细胞潜能,细胞的干细胞标志物明显发生上调,细胞存活率大大增加[7],其增殖分化旁分泌功能得到明显提升。同时来自于外周血中的内皮细胞集落形成细胞,其具有非常强的自我增殖潜能。其中高增值潜能的内皮细胞集落形成细胞单个细胞具有集落形成能力。其与脂肪干细胞存在相互作用。一方面可以增加其干细胞潜能。另一方面可以增加脂肪干细胞的存活[8]。本实验的目的在于通过利用透明质酸三维培养经过反复传代后的衰老脂肪干细胞和内皮细胞集落形成细胞构建三维空间结构,从而增加脂肪干细胞的干细胞潜能,减少其在体内过快死亡,增加对疾病的治疗效果。实验方法:1、获取经过反复传代的衰老脂肪干细胞常规用直径3.5mm多侧孔吸脂针对健康女性病人腹部脂肪进行抽脂。将获取的脂肪注入血袋中,在冰水混合物中静置直至血水与上层脂肪明显分层。放出下层血水,留置上层脂肪分装于50ml离心管至一半。加入25ml磷酸缓冲盐溶液到离心管中,充分摇匀后离心机1200g离心3分钟。弃去下层液体,保留中层的脂肪,倒除上层过多的油滴。配置0.075%胶原酶I溶液消化脂肪组织,放置在37度水浴摇床30分钟。用全培中和胶原酶I,离心后去上层油滴和未消化完的脂肪组织,取下层细胞团接种于培养皿上。反复培养至第八代（即为是衰老脂肪干细胞）。2、获取内皮细胞集落形成细胞抽取健康女性外周血20毫升,1:1混合磷酸盐溶液后加入淋巴细胞分离液。低速离心30分钟。取中间白色云雾状细胞层,即血液中的单个核细胞。接种于胶原I铺板的培养皿中直至细胞集落出现。细胞个数约为2000个时传代。3、本课题实验选取的实验动物为裸鼠,自制小型圆柱形铅柱,中间留一缝隙揪出裸鼠皮肤,透明胶带固定。麻醉裸鼠后固定在放射源下,辐照15格雷。静待一个月使裸鼠皮肤发生慢性纤维化,此时用剪出剪出一个7mm的全层皮肤创面。用三维培养后的细胞与对照组治疗创面。对照组划分为:第八代脂肪干细胞、三维培养第八代脂肪干细胞和内皮细胞集落形成细胞、内皮细胞集落形成细胞。4、实验结果三维培养内皮细胞集落形成细胞和脂肪干细胞的组出现类似于血管结构的空间结构,尝试单纯用第八代的脂肪干细胞三维培养存在大量无法形成空间结构的单个细胞,其漂浮于透明质酸中发生死亡。随着创面治疗时间的推移,所有的实验组和对照组创面都趋于愈合。然而,三维培养内皮细胞集落形成细胞和脂肪干细胞的组治疗效果最佳,其余三组之间无明显差异。三维培养组能更好的组织中存活下来,并且参与组成血管结构,而单纯脂肪干细胞组在宿主体内大量被代谢掉仅少量残存在间质中,也未能参与机体组织结构组成。组织的再生情况也明显不如三维培养组。
冯剑[8]（2018）在《急性胃肠道辐射损伤的中医学分析与预防实验研究》文中研究表明目的:1.探索建立急性胃肠道辐射损伤模型的适宜方法,评价其模型特点和适用性,为研究突发核暴露人员急性胃肠道辐射损伤的中医学理论和防治方法奠定基础。2.为探索急性胃肠道辐射损伤的中医药防治方法,运用中医望诊理论,通过系统观察实验动物活体、器官和组织的动态变化,分析急性胃肠道辐射损伤模型的中医证候学特点及其演变规律。3.观察和评价早期应用清热解毒凉血法预防急性胃肠道辐射损伤的效果及其对证候演变的影响。4.初步探索研究早期应用清热解毒凉血法预防急性胃肠道辐射损伤的疗效机制。方法:1.建模方法探索:采用60o-γ射线全身照射,根据受照射大鼠死亡率、进食、排便及解剖和组织学变化进行评价,经两步法确定最佳剂量。首选通过文献调研确定高中低剂量范围,初次照射后优选剂量范围后再细分高中低再次进行剂量细筛。初次高中低剂量组每组20只大鼠,照射剂量分别为16Gy、12Gy、8Gy,剂量率均为剂量率90.65cGy·min-1,照射各组及空白组随机抽取10只大鼠,用于观察辐射后大鼠生存情况,包括每日体重、进食、排便、精神状态、活动量、毛发及肛周脱毛、肛门出血、死亡等情况;各组其余10只于第5d,麻醉后腹主动脉取血处死大鼠,对肺、肝、脾、肾及胃肠道进行肉眼观察,并在光镜下观察食管、胃、小肠、结肠、直肠组织病理学改变,于第14d将空白组及各组另10只中尚存活大鼠统一处死进行解剖观察。根据初筛结果再次设高中低剂量三组及对照组,再次造模观察,方法步骤相同,根据结果确定最终适宜照射剂量。2.病因病机与证候学分析:取雄性SD大鼠90只,将动物随机分为:空白组、照射组,其中空白组10只,照射组80只,采用60Co-γ射线各对照射组大鼠进行单次全身照射,剂量采用造模细筛确定的最佳剂量11Gy,观察各组大鼠的体重、进食、排便、活动量、毛发及有无肛周脱毛、肛门出血、死亡等情况,并分别于照射后第1d、4d、7d、10 d、14d,各照射组随机抽取存活大鼠10只,麻醉后腹主动脉取血处死,对脏器进行肉眼观察,并在光镜下观察食管、胃、空肠、结肠、直肠组织病理学改变,并运用中医望诊理论和方法进行证候特点分析。3.预防效果评价:雄性SD大鼠170只,随机分为空白对照组10只,单纯照射组及中药预防组各80只,除空白对照组外,各组用60Co-γ射线单次全身照射制作急性胃肠道辐射损伤模型。造模前,中药预防组给予中药汤剂灌胃2ml,每日1次,连续7天,浓度为1.42g/ml;空白对照组和单纯照射组给予等体积生理盐水10 ml/kg灌胃,连续7天;分别于照射后第1d、4d、7d、10d、14d,各随机抽取单纯照射组及中药预防组存活大鼠10只,麻醉后腹主动脉取血处死。通过观察各组进食及饮水量、活动量、毛发、球结膜、大便、体质量等生存情况和死亡情况,比较各组胃肠道管壁、管腔、黏膜及切面特征的变化,以及显微镜下胃肠道切片HE染色光镜下特征的变化,评价预防效果。4.作用机制研究:雄性SD大鼠170只,随机分为空白对照组10只,单纯照射组及中药预防组各80只,除空白对照组外,各组用60Co-γ射线单次全身照射制作大鼠急性胃肠道辐射损伤模型。造模前,中药预防组给予中药汤剂灌胃2ml,每日1次,连续7天,浓度为1.42g/ml;空白对照组和单纯照射组给予等体积生理盐水10ml/kg灌胃,连续7天;分别于照射后第1d、4d、7d、10d、14d,各随机抽取单纯照射组及中药预防组的存活大鼠10只,麻醉后腹主动脉取血处死大鼠,检测血栓弹力图,采用ELISA法测定血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素-6、白细胞介素-1β、血栓素B2、6-酮-前列腺素的浓度,并计算TXB2/6-Keto-PGFα数值,RT-PCR法检测空肠组织中NF-κBmRNA表达的含量。结果:1.造模效果比较:初次剂量筛选:8Gy组出现短期大便不成形,未见水样便及血便,体质量及进食量下降不明显,未出现死亡,镜下肠黏膜未见糜烂坏死、剥脱及出血等;12Gy组出现水样便,部分血水便,拒食,体质量下降明显,镜下肠黏膜糜烂、坏死、部分剥脱,多发出血灶,观察至两周存活率20%;16Gy组出现血水样便,拒食水,体质量下降明显,镜下肠黏膜广泛坏死、剥脱,绒毛萎缩、短秃及多发出血灶,9日内全部死亡。剂量细化筛选:选择11Gy、12Gy、13Gy三个剂量组及空白组各20只大鼠,方法同初筛,结果发现13Gy组大鼠症状体征重,死亡率过高,而11Gy组症状体征、胃肠道病理、存活率较12Gy组无明显差异,但照射后大鼠死亡分布时间上有延后趋势,更有利于进行中医学的观察和实验研究,最终确定照射剂量为11Gy。2.证候特点与演变规律:照射后初期（约0～2d）,照射组出现躁动、多饮、目赤等现象;小肠黏膜轻度充血水肿。早期（约2～7d）,体质量下降,水样便,部分血便;小肠黏膜上皮多发出血灶及糜烂坏死。中期（约7～13d）,经过短暂恢复后体质量继续下降,拒食,大量死亡;胃肠腔内淤积紫黑色粘液;黏膜下层微血管闭塞。后期或恢复初期（约13d～）,蜷缩少动、毛发干枯、爪甲苍白;固有层间质纤维增加。对照组活体、胃肠黏膜组织观察均无异常。3.预防效果评价:单纯照射组各阶段大鼠精神状态、活动情况、体质量、大便及进食饮水等均出现热邪致病的特征性变化,两周内自然死亡数量为34只;中药预防组也出现了相似特征性变化,但症状较轻,自然死亡数量为28只。两组动物均呈现两个集中死亡时段,即4～6d和9～14d;从生存情况看,动物在照射后前11d中药预防组存活率高于单纯照射组,然后两组有接近趋势。4.作用机制初探:（1）抗炎作用,单纯照射组与空白对照组相比,NF-kBmRNA值呈升高、下降、再升高、下降的双峰式改变,TNF-α值呈逐渐下降性改变;IL-6值呈先下降、后回升式改变,LI-1β值呈升高、下降、再升高、下降的双峰式改变。中药预防组与单纯照射组相比趋势较一致,但在多数时间点中药预防组NF-KBmRNA值较单纯照射组值低,且在7d最低（P<0.01）,TNF-α值下降趋势较为平缓,且在1d降低,在4d升高,（P<0.01）;IL-6值各时间点较单纯照射组低,且在14d最低（P<0.01）,另外在1d较单纯照射组值升高,（P<0.05）;IL-1β值在1d、4d、14d较单纯照射组值升高,在4d、7d较单纯照射组降低,在14d较单纯照射组值升高（P<0.05）。（2）微循环机制,单纯照射组与空白对照组相比,TXB2和6-Keto-PGF1α的检测显示,单纯照射组TXB2值呈增加、减少,再略增加波浪式改变,6-Keto-PGF1α值呈下降,短暂回升后又下降改变,TXB2/6-Keto-PGF1α值呈略下降,其后逐渐增加;中药预防组TXB2、6-Keto-PGF1α与单纯照射组相比趋势一致,但中药预防组初期（照射后0～4d）可以提高TXB2、后期（10～14d）可以降低TXB2,降低 6-Keto-PGF1αα,照射后,提高 6-Keto-PGF1α,并降低 TXB2 与6-Keto-PGF1αα的比值（P<0.05）。（3）抗凝机制,血栓弹力图检测显示,单纯照射组R值逐渐延长,K值呈缩短、延长、再略缩短波浪式改变,MA值则呈先升高、下降然后略有提高相反波浪式改变;中药预防组与单纯照射组相比,照射后血栓弹力图趋势一致,但R值在各时间点缩短,在4d、14d缩短（P<0.05）,在1d较空白对照组缩短（P<0.05）,MA值在7d、10d、14d增加（P<0.05）,在4d较空白对照组增加（P<0.05）。结论:1.模型适用性评价:以60Co-γ作为放射源,单次全身照射大鼠,源皮距3m,剂量率90.65cGy·min-1,剂量为11Gy时,成功制备急性胃肠辐射损伤模型,且表现出中医望诊特征性变化,适用于急性胃肠辐射损伤中医病因病机、证候规律和防治方法的研究。2。病机与证候演变:急性胃肠道辐射损伤,其病因为热毒致病,证候初期属热毒内盛、气血两燔证,早期为热灼血肉、元气耗伤、脾阳不振证,中期为元气虚损、真阴耗伤、疗毒互结证,后期即恢复初期为肝肾亏耗、气血两虚、血络疗阻证。3.预防效果评价:预先应用清热解毒凉血中药可以有效减轻急性胃肠道辐射损伤程度,促进病变恢复,改善生存状态,提高短期存活率,但预防性用药不足于控制病变发展。4.预防作用机制:清热解毒凉血方可有效改善急性辐射损伤所导致的凝血功能,抑制微血管血栓、改善微循环;清热解毒凉血法在照射初期可减少急性胃肠道辐射损伤大鼠NF-kB及TNF-α等炎症因子的表达,减轻胃肠道炎症反应。
马发鑫,沙卫红,王启仪,李金亮,卢铨,骆昱均[9]（2019）在《炎症诱导骨髓间充质干细胞条件培养基修复急性辐射引起的小肠上皮干细胞损伤》文中研究说明背景:课题组前期发现,炎症预激活的骨髓间充质干细胞条件培养基可促进大鼠小肠急性辐射损伤后的结构和功能修复,该修复作用是否通过调控小肠干细胞得以实现,目前相关研究尚未明确。目的:探究炎症预激活的骨髓间充质干细胞条件培养基对辐射损伤大鼠小肠上皮干细胞的影响,以进一步明确其修复辐射损伤小肠黏膜的机制。方法:（1）分离、培养、鉴定SD幼鼠（中山大学北校区实验中心提供）骨髓间充质干细胞,分别与正常对照和辐射损伤的小肠隐窝细胞株IEC-6在Transwell培养板中共培养24h,预刺激的骨髓间充质干细胞继续单独培养48 h,收集到的上清液分别为正常状态间充质干细胞条件培养基(MSC-CMNOR)和辐射炎症预激活间充质干细胞条件培养基(MSC-CMIR);（2）将成年SD大鼠（中山大学北校区实验中心提供）随机分为4组:对照组,单纯辐射损伤组,辐射损伤+MSC-CMNOR组,辐射损伤+MSC-CMIR组,每组20只。后3组以14 Gy剂量一次性腹部局部照射制备急性小肠辐射损伤大鼠模型,造模成功后4 h内,单纯辐射损伤组尾静脉注射DMEM-F12培养基,200μL/d,连续注射3 d;辐射损伤+MSC-CMNOR组、辐射损伤+MSC-CMIR组采用胶囊渗透压泵腹腔植入的方式注射MSC-CMNOR和MSC-CMIR,胶囊内含2 mL浓缩条件培养基,植入腹腔后以10μL/h的速率匀速释放。于辐射后第1,3,5,7天取小肠组织行免疫组织化学染色、Western blot及qRT-PCR检测。结果与结论:（1）辐射后第3天,位于隐窝基底增殖活跃的Lgr5+小肠上皮干细胞与对照组相比显着减少,几乎难以观察到阳性细胞;而在输注MSC-CMIR后,Lgr5+小肠上皮干细胞与单纯辐射损伤组相比明显增多,MSC-CMNOR组Lgr5+小肠上皮干细胞未见明显增多;（2）辐射损伤后第3天,位于小肠隐窝+4位置相对静止的Bmi1+小肠上皮干细胞几乎无法观察到;而输注MSC-CMIR后,Bmi1+小肠上皮干细胞与单纯辐射损伤组相比明显增多,不仅分布在+4细胞位置,还分布在Lgr5+细胞常见的位置,表明Bmi1+细胞在辐射损伤后有可能通过分化为Lgr5+细胞发挥修复效应;（3）Western blot和q RT-PCR进一步验证,MSC-CMIR组的Lgr5表达在同一时间点均明显高于单纯辐射损伤组和MSC-CMNOR组,持续高水平表达后于第7天恢复至正常水平。MSC-CMNOR修复作用较弱,仅在第7天时与单纯辐射损伤组相比差异有显着性意义;（4）结果表明,炎症预激活状态的骨髓间充质干细胞条件培养基具有保护小肠上皮干细胞的作用。
侯雨含,刘玉龙[10]（2018）在《干细胞技术在皮肤放射损伤中的应用》文中研究说明电离辐射可致皮肤非典型角化引起的干燥脱皮、表皮脱落和血管生成抑制逐渐导致皮肤溃烂,诱导基底膜的急性退行性改变,增加血管的通透性,减少新生血管形成。最后,严重辐射灼伤的主要特征是发生不可预测的慢性炎症,导致皮肤的表面坏死并向深度延伸。传统的治疗方法主要是手术和常规完善治疗,它结合了大的放射性损伤组织切除术与经典的整形外科技术,经典的治疗方法源于热或电烧伤的管理。手术是导致非常高的发病率和残疾率
二、冷冻保存胎肝细胞移植治疗急性辐射损伤（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、冷冻保存胎肝细胞移植治疗急性辐射损伤（论文提纲范文）
（1）LR12在TAA诱导的急性肝衰竭中的治疗作用及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 第一部分 LR12 减轻TAA诱导的ALF小鼠肝脏损伤,促进肝细胞再生 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 LR12 通过作用于巨噬细胞促进TAA诱导的肝细胞损伤模型中肝细胞增殖 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 LR12 通过促进巨噬细胞分泌CCL20 促进TAA诱导的ALF小鼠肝细胞再生 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第四部分 LR12 通过促进巨噬细胞分泌CCL20 激活肝细胞内p38 MAPK途径促进TAA诱导的ALF小鼠肝细胞再生 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 急性肝衰竭的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（2）男性肿瘤患者生育力保存的研究进展（论文提纲范文）
| 一、肿瘤及治疗对男性生育力的影响 |
| 1.肿瘤对男性生育力的影响: |
| 2.肿瘤治疗对男性生育力的影响: |
| 二、男性肿瘤患者生育力保存方法 |
| 1.自体精液冷冻保存: |
| 2.睾丸组织冷冻保存: |
| 3.干细胞在男性生育力保存中的应用: |
| 总结 |
（3）丹参酮ⅡA联合脐带间充质干细胞治疗大鼠放射性肺损伤的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 放射剂量的筛选 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 主要药品及试剂 |
| 1.2 主要仪器 |
| 2 实验方案 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 造模操作:麻醉、固定及放射 |
| 3 取材及处理 |
| 4 观察指标 |
| 4.1 一般情况 |
| 4.2 大鼠外观评价及体重 |
| 4.3 大鼠血清TGF-β1水平 |
| 4.4 肺组织形态及肺组织病理 |
| 5 统计方法 |
| 6 实验结果 |
| 6.1 一般情况 |
| 6.2 外观评价 |
| 6.3 肺组织形态及大鼠体重 |
| 6.4 血清TGF-β1水平 |
| 6.5 肺组织炎症及纤维化程度 |
| 7 讨论 |
| 7.1 RILI模型的病理变化过程 |
| 7.2 RILI模型动物的选择 |
| 7.3 照射剂量的选择 |
| 7.4 RILI模型的评价 |
| 8 小结 |
| 第二部分 初步探讨丹参酮ⅡA联合HUMSCs对 RILI的影响 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 主要药品及试剂 |
| 1.2 主要仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 放射性肺损伤大鼠模型建立 |
| 2.3 各组干预方式 |
| 3 取材及处理 |
| 3.1 大鼠外观评分与称重 |
| 3.2 血清TGF-β1与IL-6 的测定 |
| 3.3 评价肺组织炎症与纤维化 |
| 3.4 Western Blot技术检测肺组织蛋白表达 |
| 4 统计学方法 |
| 5 实验结果 |
| 5.1 实验前后大鼠一般情况及体重 |
| 5.2 不同时间点各组大鼠的外观评分 |
| 5.3 血清TGF-β1和IL-6 表达情况 |
| 5.4 肺组织病理结果 |
| 5.5 肺组织炎症与纤维化量化评分 |
| 5.6 Western Blot（WB）检测大鼠肺组织中 Smad3、P-Smad3、Smad7、TGF-β1 的蛋白表达水平 |
| 第三部分 讨论 |
| 1 本研究治疗药物的选择及依据 |
| 1.1 选择丹参酮的依据 |
| 1.2 选择HUMSCs的依据 |
| 2 实验指标的选取 |
| 3 研究结果分析 |
| 3.1 对大鼠体重的影响 |
| 3.2 对大鼠外观评分的影响 |
| 3.3 对大鼠血清TGF-β1和IL-6 的影响 |
| 3.4 对大鼠肺组织病理的影响 |
| 3.5 对大鼠肺组织中Smad3、P-Smad3、Smad7、TGF-β1 的蛋白表达影响 |
| 4 不足与展望 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 放射性肺损伤的发病机制及防治研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士期间发表论文以及参与科研情况 |
（4）miPS对小鼠辐射损伤的修复及作用机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 常用缩写词中英文对照表 |
| 前言 |
| 第一部分 miPS的培养与鉴定及小鼠的辐射损伤 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 MEF的分离及支原体检测 |
| 2.2 miPS的培养及鉴定 |
| 2.3 示踪与状态变化 |
| 2.4 血液学指标 |
| 3 讨论 |
| 3.1 miPS细胞培养体系的建立 |
| 3.2 小鼠辐射损伤后的体征表象 |
| 3.3 小鼠辐射损伤后的血象变化 |
| 4 结论 |
| 第二部分 miPS对电离辐射小鼠的组织修复 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 脾脏病理组织学观察及指标检测 |
| 2.2 肠道病理组织学观察及凋亡检测 |
| 2.3 肝脏病理组织学观察及氧化应激、纤维化指标检测 |
| 3 讨论 |
| 3.1 miPS对辐射小鼠的免疫系统的影响 |
| 3.2 miPS对辐射小鼠肝脏抗氧化的影响 |
| 3.3 miPS对辐射小鼠的抗凋亡及抗炎症的影响 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（5）炎症激活骨髓间充质干细胞条件培养基对体外辐射损伤小肠上皮细胞的修复作用和机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一章 不同状态MSC-CM对急性辐射损伤小肠的治疗作用比较和修复机制研究 |
| 引言 |
| 1.实验方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验细胞 |
| 1.3 主要仪器、试剂 |
| 1.4 实验步骤 |
| 1.5 统计学分析 |
| 2.实验结果 |
| 2.1 细胞计数情况 |
| 2.2 免疫荧光观察PCNA检测细胞增殖 |
| 2.3 原位末端标记法(Tunel)及Western Blot法检测细胞凋亡 |
| 3.讨论 |
| 3.1 MSC-CM的优势及构建辐射损伤小肠上皮细胞IEC-6模型 |
| 3.2 炎症激活的MSC-CM促进辐射损伤小肠上皮细胞增殖、抑制凋亡 |
| 第二章 不同状态MSC-CM对急性辐射损伤小肠治疗作用的旁分泌机制研究 |
| 引言 |
| 1.实验方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验细胞 |
| 1.3 主要仪器、试剂 |
| 1.4 实验步骤 |
| 1.5 统计学分析 |
| 2.实验结果 |
| 3.讨论 |
| 3.1 炎症激活前后MSC-CM对小肠上皮增殖凋亡影响差异的原因 |
| 3.2 不同状态MSC-CM旁分泌因子的变化 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间成果 |
| 致谢 |
（6）炎症预激活骨髓间充质干细胞旁分泌对急性辐射小肠损伤炎症反应的作用与机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一章 炎症预激活骨髓间充质干细胞旁分泌对急性辐射小肠损伤炎症反应的作用 |
| 1 方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第二章 炎症预激活骨髓间充质干细胞条件培养基调节急性辐射小肠损伤炎症反应的作用机制研究 |
| 1 方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 缩略词 |
| 攻读硕士学位期间的成果 |
| 致谢 |
（7）三维培养高传代脂肪干细胞与内皮集落形成细胞治疗慢性放射性溃疡的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一章 脂肪干细胞与内皮细胞集落形成细胞的提取 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 材料与方法 |
| 1.3 实验结果 |
| 1.4 讨论 |
| 第二章 体外三维培养脂肪干细胞和内皮细胞集落形成细胞 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 第三章 各实验组与空白对照组治疗慢性辐照溃疡的裸鼠模型 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间成果 |
| 致谢 |
（8）急性胃肠道辐射损伤的中医学分析与预防实验研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 急性胃肠道辐射伤模型的建立方法与中医学研究适用性评价 |
| 一、目的 |
| 二、材料 |
| 三、方法 |
| 四、结果 |
| 五、讨论 |
| 六、结论 |
| 第二部分 基于延伸望诊急性胃肠道辐射伤模型中医证候学特点及演变规律的研究 |
| 一、目的 |
| 二、材料 |
| 三、方法 |
| 四、结果 |
| 五、讨论 |
| 六、结论 |
| 第三部分 基于延伸望诊评价清热解毒凉血法干预急性胃肠道辐射损伤证候特点及演变规律的研究 |
| 一、目的 |
| 二、材料 |
| 三、方法 |
| 四、结果 |
| 五、讨论 |
| 六、结论 |
| 第四部分 清热解毒凉血法预防急性胃肠道辐射伤的作用机制研究 |
| 一、目的 |
| 二、材料 |
| 三、方法 |
| 四、结果 |
| 五、讨论 |
| 六、结论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 辐射损伤的中医理论与实验研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 致谢 |
（9）炎症诱导骨髓间充质干细胞条件培养基修复急性辐射引起的小肠上皮干细胞损伤（论文提纲范文）
| 文章快速阅读: |
| 文题释义: |
| 0引言Introduction |
| 1 材料和方法Materials and methods |
| 1.1 设计 |
| 1.2 时间及地点 |
| 1.3 材料 |
| 1.3.1 实验动物 |
| 1.3.2 细胞株 |
| 1.3.3 实验试剂与材料 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.4.1 骨髓间充质干细胞的分离、培养和鉴定 |
| 1.4.2 MSC-CM的制备 |
| 1.4.3 辐射损伤模型建立及分组 |
| 1.4.4 给药方式 |
| 1.4.5 标本留取 |
| 1.4.6 免疫组织化学染色观察干细胞标记物的表达 |
| 1.4.7 Western blot检测Lgr5的蛋白表达 |
| 1.4.8 qRT-PCR检测Lgr5的mRNA表达 |
| 1.5 主要观察指标 |
| 1.6 统计学分析 |
| 2 结果Results |
| 2.1 间充质干细胞条件培养基对Lgr5+小肠干细胞的影响 |
| 2.2 间充质干细胞条件培养基对Bmi1+小肠干细胞的影响 |
| 3 讨论Discussion |
（10）干细胞技术在皮肤放射损伤中的应用（论文提纲范文）
| 1 干细胞 |
| 1.1 间充质干细胞 (MSC) |
| 1.2 脂肪来源基质细胞 |
| 1.3 多能干细胞 |
| 1.4 组织工程 |
| 2 7例采用手术联合自体MSC治疗成功患者 |
| 3 结论和观点 |
四、冷冻保存胎肝细胞移植治疗急性辐射损伤（论文参考文献）
- [1]LR12在TAA诱导的急性肝衰竭中的治疗作用及机制研究[D]. 王永娟. 河北医科大学, 2021
- [2]男性肿瘤患者生育力保存的研究进展[J]. 邵帅,王开秀,丁涛,姜经航,王婷婷,刘波,江梅. 生殖医学杂志, 2020(11)
- [3]丹参酮ⅡA联合脐带间充质干细胞治疗大鼠放射性肺损伤的实验研究[D]. 束明慧. 湖南中医药大学, 2020(03)
- [4]miPS对小鼠辐射损伤的修复及作用机制研究[D]. 刘芳. 山西医科大学, 2019(09)
- [5]炎症激活骨髓间充质干细胞条件培养基对体外辐射损伤小肠上皮细胞的修复作用和机制研究[D]. 李金亮. 南方医科大学, 2019(09)
- [6]炎症预激活骨髓间充质干细胞旁分泌对急性辐射小肠损伤炎症反应的作用与机制研究[D]. 郑跃. 南方医科大学, 2019(11)
- [7]三维培养高传代脂肪干细胞与内皮集落形成细胞治疗慢性放射性溃疡的实验研究[D]. 胡万盛. 南方医科大学, 2019(09)
- [8]急性胃肠道辐射损伤的中医学分析与预防实验研究[D]. 冯剑. 中国人民解放军医学院, 2018(09)
- [9]炎症诱导骨髓间充质干细胞条件培养基修复急性辐射引起的小肠上皮干细胞损伤[J]. 马发鑫,沙卫红,王启仪,李金亮,卢铨,骆昱均. 中国组织工程研究, 2019(09)
- [10]干细胞技术在皮肤放射损伤中的应用[J]. 侯雨含,刘玉龙. 辐射防护通讯, 2018(03)