一、锰染毒大鼠的脑组织神经生化分析（论文文献综述）
温平镜[1]（2019）在《PAS-Na对ERS-Txnip/Nlrp3炎症通路介导锰神经毒性的干预研究》文中研究表明目的锰（Mn）是人体必需微量元素,参与身体各种重要的生理过程。但长期过量锰暴露会引起锰中毒,损害椎体外系和学习记忆力。海马是主导学习记忆的主要脑区,也是锰中毒累及的主要脑区之一。据研究,锰暴露激活小鼠海马小胶质细胞,NOD样受体蛋白3（Nlrp3）炎性体表达增高,炎症反应增强。细胞内质网应激（ERS）可促进细胞氧化应激,进而诱导硫氧还蛋白互作蛋白（Txnip）高表达,并激活Nlrp3炎症小体。对氨基水杨酸钠（PAS-Na）属于非甾体抗炎药,具有抗炎、抗氧化作用,可抑制小胶质细胞的活化和炎症反应,且本团队此前研究发现PAS-Na治疗对锰中毒患者疗效较好。因此,本研究拟通过体内外实验探讨PAS-Na对ERS-Txnip/Nlrp3炎症小体信号通路介导锰神经毒性的干预作用机制。方法1体外研究:体外试验选大鼠小胶质细胞系-HAPI细胞为研究对象。（1）首先用噻唑蓝（MTT）法检测不同浓度锰、PAS-Na暴露24h后的HAPI细胞存活率;（2）药物试验分组及处理如下:①锰损伤模型:分为对照、低、中、高锰组,分别给予0、50、100、200 μmol/L（μM）Mn暴露;②PAS-Na干预组:分为对照组、染锰组、低、中、高PAS-Na组（L-、M-、H-PAS-Na组）及PAS-Na组,分别给予完全培养基、Mn 200 μM、Mn 200 μM+PAS-Na 100、Mn 200μM+PAS-Na 200、Mn 200 μM+PAS-Na 400 μM及PAS-Na 400 μM;③牛磺熊脱氧胆酸（TUDCA）抑制组:对照组、染锰组、二甲基亚砜组（DMSO组）、TUDCA组、TUDCA抑制组,分别给予完全培养基、Mn 200μM、DMSO、TUDCA 100 μM、TUDCA 100+Mn 200μM暴露;④白藜芦醇（Resveratrol）抑制组:对照组、染锰组、DMSO组、Resveratrol组、Resveratrol抑制组分别给予完全培养基、Mn 200μM、DMSO、Resveratrol 20 μM、Resveratrol 20+Mn 200 μM 暴露;（3）用活性氧族（ROS）试剂盒检测锰损伤模型组、PAS-Na干预组及TUDCA抑制组的ROS生成水平;（4）蛋白免疫印迹法（WB）检测淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2x蛋白（Bax）、Nlrp3、Caspase-1、Txnip、（肌醇酶-1）IRE1蛋白表达;（5）酶联免疫吸附试验（Elisa）检测丙二醛（MDA）、蛋白质羰基（PCO）、白细胞介素（IL）-18、IL-1β、Txnip;（6）实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测:Bcl-2、Bax、Nlrp3、Caspase-1、Txnip、IRE1、IL-18、IL-1β信使核糖核酸（mRNA）表达。2体内试验:（1）动物分组:①锰中毒模型:48只SD大鼠按体重随机分为对照组、低、中、高锰组,每组12只,锰（MnC12.4H20）剂量分别为5、10、20mg/kg,对照组腹腔注射等量生理盐水,1次/天×5天/周×8周;②PAS-Na治疗模型:72只SD大鼠按体重随机分为6组,每组12只,分别为对照组、染锰组、L-、M-、H-PAS-Na组及PAS-Na组。首先对照组和PAS-Na组均腹腔注射灭菌生理盐水,染锰组、L-、M-、H-PAS-Na组均腹腔注射Mn C12·4H20,剂量为20 mg/kg,1次/天×5天/周×8周。接着对照组和染锰组腹腔注射生理盐水,L-、M-、H-PAS-Na组及PAS-Na组分别背部皮下注射 PAS-Na 100、200、300、300 mg/kg,1 次/天 × 5 天/周 × 6 周。（2）观察指标:①每天观察动物症状、记录并称重;②学习记忆能力检测:每组选9只大鼠进行Morris水迷宫实验;③实验结束,收集血样,分离脑组织及其他脏器并称重计算脏器系数;④用石墨炉原子吸收光谱法和电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分别检测血锰和海马锰浓度。⑤透射电镜观察海马神经元超微结构改变;⑥免疫组化法检测Bax、Bcl-2阳性细胞表达。WB、PCR、Elisa检测指标与体外试验一致。结果1体外研究:（1）PAS-Na及锰对HAPI细胞存活率的影响:染锰200、300、400 μM使HAPI细胞存活率分别下降至86.6%、73.6%、57.4%（P<0.01或0.05）。100、200、300、400、600μM PAS-Na 暴露 24h 对 HAPI 细胞存活率无影响（P>0.05）。（2）PAS-Na对染锰HAPI细胞凋亡相关基因表达的影响:与对照组比较,高锰组Bax mRNA和蛋白表达升高（P<0.01）,中、高锰组Bcl-2 mRNA亦升高（P<0.05）。在PAS-Na干预试验中,染锰组Bax mRNA及蛋白表达均升高,Bcl-2 mRNA及蛋白表达均降低（P<0.01或0.05）;与染锰组比较,各浓度PAS-Na干预组Bax表达降低,Bcl-2表达升高,提示PAS-Na对Bax和Bcl-2基因的异常表达有拮抗作用（P<0.01或0.05）。（3）PAS-Na对染锰HAPI细胞炎症反应的影响:与对照组比较,染锰使Nlrp3 mRNA和蛋白、Caspase-1蛋白表达升高（P<0.01）。IL-18含量、IL-1β mRNA及含量亦升高（P<0.01 或0.05）。经PAS-Na干预后,Nlrp3 mRNA和蛋白、Caspase-1蛋白、IL-1β mRNA低于染锰组（P<0.01或0.05）。（4）PAS-Na对染锰HAPI细胞氧化应激的影响:HAPI细胞ROS水平随着染锰剂量增加而升高。高锰组MDA含量亦高于对照组（P<0.05）。染锰组ROS阳性细胞明显增多,L-、M-、H-PAS-Na干预均可拮抗这种效应。（5）PAS-Na对染锰HAPI细胞Txnip表达的影响:高锰组Txnip蛋白相对表达量和蛋白浓度升高（P<0.01或0.05）。L-、M-、H-PAS-Na组Txnip蛋白相对表量低于染锰组（P<0.01或0.05）。（6）PAS-Na对染锰HAPI细胞IRE1表达的干预作用:高锰组IRE1 mRNA和蛋白表达高于对照组（P<0.01）。H-PAS-Na治疗组IRE1 mRNA和蛋白表达低于染锰组（P<0.01）。（7）TUDCA对Txnip/Nlrp3信号通路的抑制作用:与染锰组比较,TUDCA抑制组ROS生成水平下降,IRE1 mRNA及蛋白、Txnip蛋白相对表达量和蛋白浓度、Caspase-1 mRNA、IL-1β mRNA及含量均有不同程度降低（P<0.01 或 0.05）。（8）Resveratrol对Txnip/Nlrp3信号通路的抑制作用:与染锰组比较,Resveratrol 抑制组 Txnip mRNA 及蛋白、Nlrp3 mRNA 及蛋白、Caspase-1 和IL-1β mRNA均有不同程度降低CP<0.01或0.05)。2.体内研究:（1）PAS-Na对染锰大鼠生长发育的影响:8周染锰大鼠出现腹泻、食欲不振、易激惹现象,大鼠体重随染锰剂量增加而减轻（P<0.05或0.01）,高锰组肝、肾系数明显高于对照组。经6周PAS-Na治疗后,大鼠中毒症状消失,各组大鼠体重及肝、肾系数亦未见明显差异。（2）PAS-Na对染锰大鼠血、海马锰含量的影响:8周染锰大鼠血锰浓度随染锰剂量增加而升高（P<0.01）。低、中、高染锰组海马锰浓度都高于对照组（P<0.01）。而L-、M-、H-PAS-Na组血、脑锰随PAS-Na治疗剂量增加而降低（P<0.01或0.05）。（3）PAS-Na对染锰大鼠学习记忆的影响:Morris水迷宫试验第三至第五天高锰组大鼠游泳路程和逃避潜伏期均大于对照组（P<0.01或0.05）。高锰组大鼠平台穿越次数显着下降（P<0.05）。经6周PAS-Na治疗后,各组动物游泳路程、逃避潜伏期均有所恢复,并接近至对照组水平,其平台穿越次数亦无差异。（4）PAS-Na对染锰大鼠海马损伤的干预作用:锰暴露使海马Bax阳性细胞增多,且BaxmRNA和蛋白表达亦升高（P<0.01或0.05）,高锰组Bcl-2 mRNA和蛋白表达低于对照组（P<0.01）,中、高锰组海马神经元均出现不同程度变性。经6周PAS-Na治疗后,染锰组仍见较多Bax阳性细胞,各PAS-Na治疗组只见少量Bax阳性细胞。染锰组Bax mRNA及蛋白表达均升高,Bcl-2蛋白表达降低（P<0.01或0.05）,PAS-Na治疗对染锰组Bax和Bcl-2异常表达有拮抗作用。染锰组神经元仍有轻微变性,PAS-Na治疗组海马神经元均恢复正常。（5）PAS-Na对染锰大鼠海马炎症反应的影响:高锰组Nlrp3 mRNA及蛋白表达高于对照组和低、中锰组（P<0.01）,中、高锰组Caspase-1 mRNA及蛋白表达升高（P<0.01或0.05）。中锰组IL-18 mRNA及含量和中、高锰组 IL-1β mRNA 高于对照组（P<0.01 或 0.05）。H-PAS-Na 组 Nlrp3 mRNA和Caspase-1蛋白表达低于染锰组,M-、H-PAS-Na组IL-18 mRNA及含量、IL-1β mRNA及含量亦下降（P<0.01）。（6）PAS-Na对染锰大鼠海马氧化应激的影响:与对照组比较,高锰组 MDA、PCO 均升高（P<0.01或 0.05）。H-PAS-Na 组 MDA 和 PCO 含量均低于染锰组（均P<0.05）。（7）PAS-Na对染锰大鼠海马Txnip表达的影响:高锰组Txnip蛋白相对表达量和蛋白含量高于对照组（P<0.01或0.05）。H-PAS-Na组Txnip mRNA和蛋白表达低于染锰组（均P<0.01）。（8）PAS-Na对染锰大鼠海马IRE1表达的影响:中、高锰组IRE1 mRNA和蛋白表达高于对照组（P<0.01或0.05）。H-PAS-Na组IRE1mRNA和蛋白表达低于染锰组（均P<0.01）。结论（1）染锰可影响大鼠生长发育,导致其体重减轻,肝、肾系数增高,PAS-Na对锰中毒大鼠生长发育有一定干预作用。（2）染锰使大鼠血、海马锰浓度升高,损害海马进而影响学习记忆能力。PAS-Na具有促排锰作用,可缓解海马损伤。（3）染锰可能诱导了 HAPI细胞和海马小胶质细胞ERS,引起细胞氧化损伤,激活Txnip/Nlrp3信号通路介导炎症反应,使神经细胞损伤。PAS-Na治疗可抑制ERS-Txnip/N1rp3炎症小体信号通路激活,使锰中毒炎症反应减轻。
吴松林,秦绚,郭松超[2]（2017）在《牛磺酸对锰染毒大鼠纹状体神经组织细胞钙平衡调节的影响》文中提出目的观察锰和活性钙调素含量及Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活力变化,探讨牛磺酸对锰染毒大鼠神经毒性的影响。方法取SPF级SD健康雄性大鼠156只,随机分为对照组,10、15、20mg/kg3个剂量的染锰组和9个牛磺酸干预组,牛横酸干预剂量分别为100、150、200mg/kg,每组12只大鼠。干预12周后,分离出大鼠纹状体,分别进行锰和活性钙调素含量及Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活力的测定。结果各染锰组和牛磺酸干预组纹状体锰含量均高于对照组,差异均有统计学意义（均P<0.05）;10 mg/kg染锰组活性钙调素含量高于对照组（P<0.05）,150、200 mg/kg的牛磺酸干预明显降低10 mg/kg锰染毒大鼠纹状体活性钙调素含量,差异均有统计学意义（均P<0.05）;染锰组大鼠纹状体Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活力水平均低于对照组（均P<0.05）,150 mg/kg牛磺酸干预明显增加10 mg/kg锰染毒大鼠纹状体Na+K+-ATPase活力水平（P<0.05）,150 mg/kg牛磺酸干预明显增加15 mg/kg锰染毒大鼠纹状体Ca2+-Mg2+-ATPase活力水平（P<0.05）,200 mg/kg牛磺酸干预明显增加10 mg/kg锰染毒大鼠纹状体Ca2+-Mg2+-ATPase活力水平（P<0.05）。结论锰可降低大鼠纹状体中Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活力,低剂量锰可致活性钙调素含量升高;牛磺酸在一定程度上可对抗锰所致的Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活力降低作用,对锰所致的活性钙调素异常变化发挥调节作用。
孙伟[3]（2014）在《职业性接触锰作业工人健康危害及相关影响因素分析》文中研究指明目的：通过对电解锰生产企业基本情况、工作场所、卫生防护措施等方面的调查和综合分析，对生产过程中产生的锰及其化合物进行现场检测，分析其危害程度及对劳动者健康的影响，评价职业病危害防护措施及其效果，并对作业工人进行防护知识调查和职业健康体检，分析防护知识和体检指标的影响因素，探讨工作场所空气中锰浓度和职业体检结果之间的关系，为职业接触锰作业工人早期预防提供依据和建议，从而控制或降低职业性锰危害，防治锰中毒，保护劳动者健康，促进国民经济又好又快发展。方法：选定宁夏某电解锰生产企业作为项目实施单位；采用典型抽样法，确定有代表性的工作场所进行锰浓度检测，采用整群抽样法，将进行锰浓度检测的工作场所的全部工人作为调查对象，进行职业病防护知识知晓率调查和职业健康体检。结果：（1）2011-2013年工作场所空气中锰及其化合物的平均浓度和最高浓度明显呈逐年下降趋势，差异有统计学意义（P<0.05）。（2）2013年企业工作场所空气中锰及其化合物时间加权平均浓度在12个监测点中有3个点超标，超标率为25%；企业根据各车间产生的职业有害因素的种类设置相应的工程防护设施，但部分车间的抽风设备没有正常运行。（3）接触锰作业工人的职业病防护知识总体知晓率为75.0%，其中对作业时使用个人防护用品重要性的知晓率最高为98.3%，对长时间接触锰身体最可能出现的症状的知晓率最低为24.5%；对于职业卫生相关态度调查的结果显示，接触锰作业工人的职业卫生态度比较积极，其中97.2%的工人同意职业卫生培训是非常必要的,92.6%的工人同意正确使用个人防护用品是非常必要的；接触锰作业工人中50%左右的人能养成良好的职业卫生行为，其中一直能够正确执行操作规程的占61.3%，在操作时一直佩戴防尘口罩等个人防护用品的占47.4%；在进行职业卫生知识知晓情况和相关行为形成情况的影响因素分析中，有统计学意义的因素均为工龄和文化程度；工人获取职业卫生相关知识的主要途径是培训（99.6%）和公告宣传栏（84.2%）。（4）接触锰作业工人职业健康体检结果显示：30.7%的工人检查结果存在异常，其中血谷丙转氨酶高于正常者的占10.0%，血压高于正常范围者的占20.5%，尿常规异常者占5.0%，心电图异常者占4.8%，血常规异常者占1.1%；神经系统临床体征检查异常者0人，自觉症状异常包括乏力、精神紧张和情绪低落、记忆力减退、头痛、头晕、失眠、多梦、肢体麻木等共有176名，占32.7%。（5）12个工作场所空气中锰及其化合物浓度与健康体检各项指标异常率之间的没有相关关系，将工作场所空气中锰及其化合物检查结果分为合格组和超标组，两组工人防尘口罩佩戴情况进行比较差异有统计学意义（2=9.360，P<0.05）；对两组工人自述神经系统症状发生率进行比较差异有统计学意义（2=8.164，P<0.05），并且超标组工人的神经症状发生率高于合格组工人，佩戴防尘口罩的四种不同行为（一直、经常、偶尔、从不）的工人发生神经系统症状的概率差异有统计学意义（2=179.727，P<0.05），一直佩戴防尘口罩的工人神经系统症状的发生率最低为11.4%。结论：（1）调查企业职业卫生工作情况较好，布局合理，工作场所空气中锰及其化合物浓度基本符合国家职业卫生标准，职业卫生防护部分措施不到位，个别通风设施未正常运行。（2）接触锰作业工人职业卫生知识知晓率普遍较高，但存在知识不够全面的问题还需今后的培训中有待进一步加强；工人的职业卫生态度比较积极，职业卫生相关行为形成率较低，工龄和文化程度是职业卫生知识知晓率和行为形成率的主要影响因素，培训和公告宣传栏是工人获取职业病防护知识的主要途径。（3）接触锰作业工人职业健康体检结果显示各项指标异常情况无明显增高，但神经系统症状发生率达32.7%，表明仍存在职业损伤隐患。（4）接触锰作业工人自我防护行为较差，不按要求佩戴防尘用品的现象较为普遍，佩戴防尘用品的正确与否严重影响工人的健康，职业卫生管理部门应加大投入和加强监督，企业要配备完善的防护设施及个人防护用品，加强工人岗前、岗中培训及健康教育，提高工人的自我防护意识，指导工人养成健康的职业习惯。
张鹏,敬海明,刘建中,刘君丽,董一文,赵超英,蔡丽,郑珊,杜宏举,聂燕敏,李红,张思玉,陈春霞,马玲,李国君[4]（2013）在《锰毒性不同病程动物模型的建立与评价》文中研究表明目的采用氯化锰染毒建立锰毒性不同病程的动物模型并对其进行评价。方法 120只雄性SD大鼠按体重随机分为染锰30 d组、染锰90 d组与染锰90 d后再恢复30 d组及其相应的对照组,染锰组按6 mg（Mn）/kg·BW每日腹腔注射氯化锰溶液,对照组给予生理盐水。各组试验结束后进行体重、脏体比、食物利用率、血液学指标、血清生化指标、血清Mn、Fe、Mg等离子、黑质多巴胺能神经元活性的测定与分析以及肝脏、肾脏与睾丸等的病理组织学观察与分析。结果各染毒组大鼠的体重以及食物利用率与其相应对照组比较,差异均无统计学意义（P>0.05）;各染毒组血清中Mn含量及Mn/Fe比值与相应对照组比较均升高,差异有统计学意义（P<0.05）;以HE染色进行病理形态学观察,发现各染毒组与其相应对照组比较均出现不同程度的肝细胞核变性坏死以及睾丸曲细精管部分管腔内精子数减少,初级精母细胞空胞样变性等,且随染锰时间延长有加重的趋势,但脱离锰暴露后（90 d染毒+30 d恢复）病变有恢复迹象;酪氨酸羟化酶免疫组织化学染色观察发现各时间点染毒组与其相应对照组比较,脑组织中TH-阳性的多巴胺能神经元数量均减少,并且随着染锰时间的延长减少程度加重,脱离锰暴露后（90 d染毒+30 d恢复）损伤不可恢复。结论根据以上各指标综合判断,本次研究所建立的锰毒性不同病程的动物模型是成功的,为今后锰毒性机制的进一步研究提供了可靠的动物模型基础。
刘重斌,陆建峰,郭贺杰,陈露,王瑞[5]（2013）在《番茄红素对慢性锰染毒大鼠学习记忆的改善作用》文中进行了进一步梳理目的探讨番茄红素对慢性锰染毒大鼠学习记忆改善作用的机制。方法雄性SD大鼠ip MnCl2·4H2O 15 mg·kg-1,同时ig给予番茄红素5,10和15 mg·kg-1,每天1次,连续3个月。分别于第1,2和3个月末进行水迷路实验测定大鼠逃避潜伏期和目标象限游泳时间。实验结束后,取血、肝和海马组织,原子吸收光谱法测定血、肝和海马组织中锰含量。化学比色法检测肝和海马组织中丙二醛（MDA）含量及总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和过氧化氢酶（CAT）酶活性。结果与正常对照和番茄红素组相比,慢性锰染毒组大鼠平均逃避潜伏期和目标象限游泳时间显着增加（P<0.05）;血、肝和海马组织中锰含量显着升高（P<0.05）;肝和海马组织中MDA含量显着增加（P<0.05）,SOD,GSH-Px和CAT酶活性显着下降（P<0.05）。给予番茄红素15 mg·kg-1干预后,大鼠平均逃避潜伏期在第1,2和3个月末分别由慢性锰染毒组的50.7±10.8,46.1±9.2和（51.4±13.6）s显着降至42.1±4.0,27.5±4.6和（26.0±4.7）s（P<0.05）;目标象限游泳时间在第2和3个月末分别由慢性锰染毒组的38.7±9.2和（45.2±14.2）s显着降至26.2±4.8和（27.3±8.3）s（P<0.01）;血、肝和海马组织中锰含量显着下降（P<0.05）;肝和海马组织中MDA含量显着降低,SOD,GSH-Px和CAT酶活性显着升高（P<0.05）。结论番茄红素能有效改善因慢性锰染毒导致的氧化应激损伤及学习记忆能力的减退。
刘静[6]（2013）在《职业锰暴露对工人认知功能及血浆多巴胺水平的影响》文中指出目的：组建广西职业锰暴露工人健康队列（Manganese Exposure Worker Health Cohort, MEWHC）,通过完成队列基线调查和职业健康体检,阐明长时间职业锰暴露对工人健康多系统的损伤状况；继而探讨职业锰暴露对工人认知功能早期损伤及血浆多巴胺水平影响的剂量-效应关系,以发掘职业锰暴露致早期健康损害的效应指标。方法：1.以广西某大型锰系铁合金生产企业为研究现场,组建职业锰暴露工人的健康研究队列：以冶炼生产一线的冶炼工为暴露组,以远离冶炼生产一线的辅助工为对照组（内对照）；运用职业流行病学调查问卷对工人的人口学信息、吸烟饮酒等生活习惯、既往疾病史、服药情况、职业史等进行基线调查,同时对不同工种岗位的空气锰浓度进行定点监测,结合企业的职业健康体检,评价工人健康受锰暴露危害的程度。2.在职业锰暴露工人健康队列的基础上招募锰暴露工人作为暴露组,同一地区某糖厂的炼糖工人为对照组,采用蒙特利尔认知评估量表（Montreal Cognitive Assessment，MoCA）对两组工人进行认知功能测试；并采集其外周静脉血,采用ELISA技术测定血浆多巴胺含量；结合历年的环境监测资料及不同岗位的工作时间,计算工人锰的累积暴露指数（Cumulative Exposure Index, CEI）;通过对CEI与认知功能测试结果和血浆多巴胺水平进行的关联分析,评价职业锰暴露对工人认知功能损伤及血浆多巴胺水平的剂量-效应关系。结果：1.本研究职业锰暴露工人健康队列共招募符合纳入标准的锰暴露工人1039人,男性709人,女性330人；年龄为19～60岁（38.67±7.62岁）；工龄为0.1～37.0年（12.41±8.97年）；涉及的工种有冶炼工、检修工及精整工等辅助工。2.共采集260个空气样品,合格率为77%。暴露组（冶炼工）岗位合格率均<0%,对照组（检修工及精整工等辅助工）岗位的合格率均>85%；8h时间加权平均浓度（Time-Weighted Average, TWA）范围为0.010～1.061mg/m3,暴露组的TWA几何均数均超出国家规定的时间加权平均容许浓度（Permissible Concentration-Time Weighted Average, PC-TWA）,对照组的TWA均在PC-TWA范围内。3.职业健康体检结果显示：工人自觉症状中类神经衰弱症状（头痛、头晕、失眠、多梦、记忆力减退、疲乏无力等）异常率均>10%,其中多梦异常率最高,为14.82%。体征、实验室及其他检查,异常率最高的为尿常规,高达39.36%,肝功能、心电图的异常率分别为15.69%、19.83%。共检测了836份尿液标本的锰含量,范围为0.02～123.86μg/L,尿锰超标60人,超标率为7.18%；暴露组尿锰异常率高于对照组（P<0.05）；不同工龄组间尿锰异常率无明显差别（P>0.05）；分层分析显示,暴露组工人尿锰异常率随年龄及工龄增加呈上升趋势（P<0.05）；偏相关分析结果显示尿锰水平与工龄呈负相关（r=0.098,P=0.004）。4.共招募了职业锰暴露工人健康队列的819名工人（暴露组）和293名糖厂工人（对照组）进行认知功能测试研究,暴露组认知功能测试总分为14～30（23.62±4.61）,对照组为22～30（27.16±2.51）。暴露组按工种分组与对照组比较,对照组认知功能测试结果均高于各工种组,具有显着性差异（P=0.000）；分层分析显示,冶炼组工人认知功能测试的各项分数随工龄增加而减少（P<0.05）；暴露组按CEI分成低、中、高3个暴露组与对照组比较,对照组认知功能测试结果均显着高于各暴露组（P<0.05）；多重线性回归分析结果显示,锰暴露工人认知功能的影响因素有：性别、年龄、文化水平、CEI、吸烟、饮酒（P<0.05）；偏相关分析结果显示,CEI与认知功能呈负相关（r=-0.210,P=0.000）。5.共采集316名工人的血样进行血浆多巴胺含量测定,按CEI分成低暴露组156人,中暴露组117人,高暴露组28人,对照组15人。低暴露组多巴胺水平为36.47～387.41pg/ml,中暴露组为22.90～384.51pg/ml,高暴露组为46.55.90～315.37pg/ml,对照组为5.65～64.16pg/ml;对照组的多巴胺水平显着低于各暴露组（P<0.05）；对暴露组CEI与多巴胺水平画散点图发现,血浆多巴胺水平随CEI增加呈下降趋势,但各暴露组之间无统计学差异（P>0.05）。结论：1.本课题组已经建立了高质量的职业锰暴露工人健康队列,可以开展前瞻性随访调查,探讨持续性锰暴露对工人健康损害效应。2.职业锰暴露可对工人造成不同程度的健康损害,其中以神经系统类神经征、尿常规异常、心电图异常和肝功能异常最为常见,尿锰可以考虑作为职业锰暴露人群的早期暴露性标志物。3.长期持续的职业锰暴露可以导致工人认知功能损伤和引起工人血浆多巴胺水平的异常变化,特别是认知功能损伤与锰暴露呈现显着的剂量-效应关系；锰暴露工人认知功能测试及血浆多巴胺水平检测,可以考虑作为职业性锰暴露早期健康损伤的效应指标。
曹瑞[7]（2013）在《α-synuclein和tau相互作用参与锰诱导的神经毒性机制及染料木素的保护作用》文中提出【背景】锰是机体必需的一种微量元素，但摄入过量的锰则会对机体产生毒性作用。锰的毒性作用主要累及中枢神经系统，尤其是基底核。慢性锰中毒主要表现为锥体外系功能障碍，与帕金森病（Parkinson’s disease, PD）的临床表现类似。α-共核蛋白（α-synuclein，α-syn）是由140个氨基酸组成的可溶性非折叠蛋白,它是帕金森病（Parkinson’s disease, PD）特征性病理结构——路易氏小体（Lewy’s body）的主要组成部分。体内和体外实验均表明高表达α-syn可促进神经元的损伤，诱导PD相关毒性症状的发生。因此越来越多的实验试图揭示α-syn的生理功能及其在神经退行性疾病中的作用机制。但是关于α-syn的生理功能目前还不十分清楚，有研究表明α-syn参与调节突触传递和神经元的可塑性。另有研究提示它可能在信号转导过程中发挥重要作用。近年来，许多研究证实α-syn在Lewy小体病和帕金森病的发生机制中起到了关键的作用,但是其在锰神经毒性作用中的机制尚不清楚。tau蛋白是一种微管相关蛋白，在神经系统的发育和维持微管功能等方面具有重要作用。生理和病理条件下，tau蛋白的许多苏氨酸和丝氨酸残基可以被多种激酶磷酸化。tau蛋白病理条件下的过度磷酸化将影响其正常功能，使其促微管聚合功能丧失，神经元微管解体，tau蛋白聚集成双螺旋丝（paired helical filaments，PHF）以及形成神经原纤维缠结（neurofibrillary tangle，NFT）结构，并转变成为毒性分子，最终引起神经元变性损伤。作为存在于细胞质内的可溶性蛋白质，α-syn与tau蛋白之间存在着相互作用。研究表明α-syn与tau蛋白在细胞内除了细胞核外大部分是共定位的，在靠近细胞膜的细胞质边缘，两者的相互作用最强烈。新近研究表明tau蛋白突变可抑制α-syn与tau蛋白的相互作用；α-syn突变也可抑制α-syn与tau蛋白的相互作用。此外，截去羧基端的tau蛋白与α-syn之间的相互作用也被抑制。染料木素（genistein，Gen）又称三羟异黄酮，主要是从大豆等豆科植物中提取出来的活性成分，为异黄酮类物质中活性功能最高的一种。Gen对神经系统具有显着的保护作用，其作用机制是多方面的。包括抗氧化、调节细胞内的钙离子浓度、与细胞内信号转导途径相互作用、增强胆碱能神经功能、抑制凋亡等途径，从而提高神经细胞的存活能力。【目的】在动物和细胞水平探讨锰对α-syn与tau蛋白相互作用的影响，以及这种影响在锰神经毒性中的作用。并进一步探讨染料木素对锰神经毒性可能的抑制效应，以及这种抑制效应与α-syn-tau的相关性。为进一步阐明锰神经毒性的分子机制以及寻找有效的防护措施提供新的思路和实验依据。【方法】1．利用灌胃的方法建立慢性锰暴露的动物模型，采用免疫荧光染色、Western blot和免疫共沉淀检测多巴胺能神经元的损伤以及α-syn与tau蛋白相互作用的变化。2．利用高分化型PC12细胞建立锰毒性的细胞模型，MTT、LDH和TUNEL检测细胞毒性；siRNA转染、Western blot、免疫荧光染色和免疫共沉淀检测α-syn与tau蛋白相互作用的变化。3．MTT、TUNEL和氧化应激试剂盒检测染料木素对锰毒性的保护作用。同时，利用Western blot、免疫荧光染色检测染料木素对锰诱导的α-syn蛋白表达、tau磷酸化以及两者共定位的影响。【结果】1．锰对大鼠黑质多巴胺能神经元损伤和α-syn与tau蛋白相互作用的影响通过灌胃方法建立慢性锰暴露的动物模型，免疫荧光染色和Western blot结果显示大鼠黑质TH染色阳性细胞数明显减少，同时黑质TH表达水平显着降低，提示锰诱导了多巴胺能神经元损伤；Western blot结果显示大鼠黑质α-syn和tau表达水平均升高；免疫荧光染色和免疫共沉淀结果显示大鼠黑质α-syn和tau蛋白共定位增强，同时这两种蛋白在黑质的相互作用增强。2．锰对PC12细胞的损伤以及对α-syn与tau蛋白相互作用的影响MTT结果显示，随着染锰浓度的增加和染锰时间的延长，PC12细胞活力显着下降；TUNEL结果显示，随着锰浓度的增加，PC12细胞凋亡水平逐渐增加；Western blot结果显示锰可使PC12细胞α-syn与tau磷酸化水平增加；免疫荧光染色和免疫共沉淀结果显示锰可使α-syn与tau蛋白在PC12细胞内共定位增强，同时α-syn和tau蛋白相互作用增强。3．siRNA α-syn和LiCl对锰诱导的PC12细胞α-syn与tau蛋白相互作用的影响MTT结果显示，干涉α-syn的表达或者加入LiCl可以明显改善锰对PC12细胞的活力抑制；Western blot结果显示，干涉α-syn的表达可以使锰诱导的高p-tau396水平降低；免疫荧光染色结果显示，siRNAα-syn和LiCl均可抑制锰诱导的PC12细胞α-syn与tau蛋白的共定位；免疫共沉淀结果进一步显示LiCl可抑制锰诱导的PC12细胞α-syn与tau蛋白的相互作用。4．染料木素对锰诱导的PC12细胞毒性的保护作用MTT结果显示，染料木素可以明显抑制锰诱导的PC12细胞活力下降； TUNEL结果显示，染料木素可以抑制细胞凋亡；氧化应激试剂盒检测结果提示，染料木素可以抑制锰诱导的PC12细胞氧化应激水平的增高。此外，Western blot实验结果显示，染料木素可抑制锰诱导的α-syn蛋白表达水平的增高以及tau蛋白的磷酸化。免疫荧光染色结果表明染料木素可抑制锰诱导的PC12细胞内α-syn与tau蛋白共定位的增强。【结论】1．体内外实验均表明，锰可以引起多巴胺能神经元的损伤，诱导α-syn与p-Tau396蛋白表达水平增加；使α-syn与p-tau396蛋白相互作用增强，并且其共定位增强。2．体外实验表明，分别降低α-syn或p-Tau396蛋白的表达水平，可在抑制锰毒性的同时一定程度上抑制锰诱导的两种蛋白相互作用的增强。表明α-syn和p-Tau396蛋白的相互作用可能在锰诱导的PC12细胞损伤中发挥一定的作用。3．染料木素可抑制锰诱导的PC12细胞毒性，其机制可能与其抑制锰诱导的氧化应激，α-syn蛋白表达水平增高，tau蛋白的磷酸化以及α-syn与tau的相互作用有关。综上所述，我们的研究初步阐明锰诱导的多巴胺能神经元的损伤作用中存在α-syn和p-Tau396蛋白的相互作用，这种作用可能参与了锰诱导的损伤过程，并可作为锰损伤防护（如染料木素）的一个潜在作用靶点。我们的结果将为进一步阐明锰神经毒性的分子机制以及寻找有效的防护措施提供新的思路和实验依据。
欧超燕[8]（2012）在《PAS-Na对锰暴露大鼠基底核GABA能神经递质的影响》文中研究表明锰（Mn）是人体必需微量元素,是某些正常细胞动态平衡金属酶的必需辅酶。然而,长期吸入较高浓度的锰烟尘可引起中毒,出现帕金森病（PD）样临床表现。磁共振成像（MRI）和氢质子磁共振波谱（1H-MRS）研究发现,锰暴露工人苍白球锰蓄积明显,丘脑及其邻近基底核GABA-感兴趣区（VOI）γ-氨基丁酸（GABA）水平明显升高。锰暴露可改变动物纹状体及其所在基底核的GABA浓度改变,改变脑内GAD、GABA-T活性及GABA受体与转运载体的mRNA及蛋白表达。我室的较早系列研究显示,对氨基水杨酸钠（PAS-Na）有促排锰作用,可使染锰4周的大鼠轻度受损的神经细胞病理改变恢复正常,PAS-Na对锰致海马神经元损害有拮抗作用。广西医科大学纪淑琴等率先在临床上应用PAS-Na治疗锰中毒患者取得较好疗效（临床表现基本恢复正常或改善、尿锰排泄增加、不良反应较少等）,贵州、江西、包头、上海和重庆也有类似的临床报道。但是,PAS-Na防治锰中毒机制尚未清楚。因此,本研究旨在探讨PAS-Na对短期及亚慢性锰暴露大鼠GABA能神经元损伤是否有拮抗作用,以期为锰中毒防治提供科学依据。目的：探讨PAS-Na对短期及亚慢性锰暴露大鼠生长发育、学习记忆、基底核超微结构、GABA能神经递质及其有关代谢过程的影响。材料与方法：1.动物分组及处理：雄性SD大鼠适应性喂养1周后,①短期实验：随机分为染锰组、低、高剂量PAS-Na （L-、H-PAS）治疗组和正常对照组（对照组）,共4组。观察期为7周（染锰4周+PAS治疗3周）或10周（染锰4周+PAS治疗6周）,每期每组15只大鼠（后同）。染锰、PAS治疗组腹腔注射（ip） MnCl2·4H2015mg/kg,对照组ip等容量生理盐水,每日1次,每周5天,连续4周。然后,PAS治疗组大鼠背部皮下注射（sc）PAS-Na100或200mg/kg,其余组背部sc等容量生理盐水,每日1次,连续3周或6周。②亚慢性实验：随机分为对照、染锰、PAS-Na预防性干预（预防组）和低、中、高剂量PAS-Na （L-、M-、H-PAS）治疗组,观察期为4、8、12、18周。给染锰、预防、PAS治疗组ip MnCl2·4H2015mg/kg,对照组ip等容量生理盐水,每日1次,每周5天,连续4、8、12周,其中预防组在染锰的同时,每天背部sc PAS-Na200mg/kg（每周3天）,连续8、12周。然后,给L-、M-、H-PAS治疗组分别sc PAS-Na100、200、300mg/kg,其余组背部sc等容量生理盐水,每日1次,连续6周。2.实验指标测定：①生长发育指标检测：每周末称动物体重1次；实验结束时,处死动物,取心、肝、脾、肺、肾、睾丸等脏器,并称其重量,算其脏体比；②学习记忆能力检测：实验结束前1周,每组10只动物进行Morris水迷宫实验以测试其学习记忆能力改变；③基底核超微结构观察：实验结束时,每组取5只动物进行2%多聚甲醛、2.5%戊二醛混合固定液经心脏内灌注固定,后分离基底核,进行透射电镜观察基底核超微结构改变；④GABA能神经递质改变检测：实验结束时,每组取10只动物,处死动物,取基底核迅速于液氮速冻,并于-80℃冰箱保存,高效液相色谱荧光检测法检测GABA、Glu、Gln、Gly氨基酸类神经递质含量,高效液相色谱法及荧光分光光度计法检测其GAD与GABA-T活性；实时荧光定量PCR（RT-PCR）与蛋白免疫印迹（WB）检测GABA转运载体（GAT-1）及GABA受体（GABAAR） mRNA与蛋白表达。结果：1. PAS-Na对锰暴露大鼠生长发育的影响（1）锰暴露第一至第四周、第八周、第十周,大鼠体重比对照组轻,差异具统计学意义；预防组大鼠在第一致第三周较染锰组重,差异具统计学意义。（2）观察期4周,染锰组脾脏与睾丸脏体比比对照组大,差异具统计学意义；观察期8周,染锰组脾脏脏体比比对照组大,差异具统计学意义；观察期12周,染锰组脾脏与肝脏脏体比比对着组大,预防组脾脏与肝脏脏体比比染锰组小,差异均具统计学意义；观察期18周,L-与H-PAS组肝脏脏体比比染锰组小,脾脏脏体比比染锰组大,差异均具统计学意义。2. PAS-Na对锰暴露大鼠学习记忆能力的影响（1）学习能力的影响：在观察期4、10、12、18周,染锰组大鼠的逃避潜伏期和或游泳路程均比对照长。锰暴露4或12周后,给予PAS-Na为期6周的治疗,各治疗剂量组均可恢复锰暴露所延长了的逃避潜伏期及游泳路程。（2）记忆能力的影响：观察期7周,染锰大鼠平台所在象限时间或路程除总时间或路程均比对照组长；高-PAS组平台所在象限时间或路程除总时间或路程均比染锰组短。观察期8周,平台所在象限时间或路程除总时间或路程染锰组与对照比较减少,PAS-Na预防组与染锰组比较增多。3. PAS-Na对锰暴露大鼠基底核超微结构的影响：短期或亚慢性锰暴露可损伤大鼠脑基底核的神经元、神经毡及星形胶质细胞,使得其神经元出现变性、凋亡及坏死等现象,神经元树突、轴突终末肿胀,星形胶质细胞增生、凋亡退变,且随染锰期限的延长,其损伤越发严重；此外,即使终止染锰这些损伤仍在继续,且随时间的延长而越发严重。与锰中毒病人的临床表现相一致。PAS-Na对染锰大鼠所致的基底核改变都有一定的拮抗作用,会使得神经元变性、凋亡、坏死现象得到好转,突触间隙重变清晰,但对于染锰12周大鼠的基底核改变,改善作用不是特别明显。4. PAS-Na对锰暴露大鼠基底核GABA能神经递质的影响（1）短期及亚慢性锰暴露对大鼠基底核GABA能神经递质的影响：观察期4周,Glu、Gln与GABA含量,GAD活性及GABAAR mRNA表达均升高。观察期7周,Gly含量减少,GABAAR蛋白表达升高；观察期10周,Glu、Gln与Gly含量,GABAAR与GAT-1mRNA表达均降低。观察期8周,Glu/GABA比值及GABAAR mRNA表达均降低。观察期12周,GABA-T活性及GABAAR蛋白表达升高；观察期18周,基底核Glu、Gln、与GABA含量及GABAAR mRNA表达均降低,而GAD与GABA-T活性及GAT-1mRNA表达均升高。（2）PAS-Na对短期及亚慢性锰暴露大鼠基底核GABA能神经递质的预防或治疗效果：①治疗效果观察：观察期10周,L-PAS与H-PAS组的Glu、Gln含量及GAT-1mRNA表达与H-PAS组Gly含量比染锰组升高；观察期18周,M-PAS及H-PAS组的GAD活性与H-PAS组的GABA-T活性及GAT-1mRNA表达降低。②预防效果观察：观察期8周,预防组的Glu/GABA比值与GABAAR mRNA表达比染锰组升高；观察期12周,预防组的GABAAR蛋白表达比染锰组降低。结论：（1）短期及亚慢性锰暴露使大鼠生长发育迟缓,体重增加较少,脾脏、睾丸及肝脏脏器系数增加,提示锰具生长发育及器官整体毒性,PAS-Na对锰所致的生长发育及器官整体毒性具一定拮抗作用。（2）短期及亚慢性锰暴露均可影响大鼠的学习能力,其记忆功能的改变仅出现在亚慢性的锰暴露。PAS-Na治疗或预防均可拮抗锰暴露所致的学习及记忆功能改变。（3）短期及亚慢性锰暴露均可对大鼠基底核超微结构产生影响,PAS-Na预防和/或治疗对其病理改变具有一定的拮抗作用,使其改变得到一定的恢复,表现为早期治疗效果较佳,且预防效果优于治疗效果。（4）短期及亚慢性锰暴露对大鼠基底核Glu、Gln、Gly与GABA含量,GAD与GABA-T活性,GABAAR mRNA与蛋白表达及GAT-1mRNA表达均有影响。PAS-Na预防及治疗对不同期限锰暴露所致的以上改变均有一定的拮抗作用,PAS-Na对亚慢性锰暴露致GABAAR mRNA或蛋白表达改变有预防性干预作用,对锰致大鼠基底核Glu、Gln及Gly含量、GAD活性与GAT-1mRNA表达改变有治疗性干预作用。
孙慧珍[9]（2011）在《武汉市职业接锰工人作业环境卫生及健康状况的调查分析》文中认为目的了解武汉市部分企业接锰工人职业锰暴露水平和健康状况,分析探讨企业锰污染程度、劳动者健康现况及企业存在的主要职业卫生问题。为企业职业危害预防和管理提供研究依据,保障劳动者身心健康。方法（1）现场劳动卫生学调查,检测20052009年武汉市部分企业电焊作业场所空气电焊烟尘和锰浓度,分析其历年的变化趋势,评价作业环境职业卫生状况。（2）对1024名接锰工人进行职业健康体检（其中男性932人,女性92人,年龄为1859岁,平均34.30±9.82岁;工龄为0.2539年,平均13.73±10.18年）。职业病健康体检指标及方法依照《职业健康监护管理办法》、《职业健康监护技术规范》（GBZl88-2007）确定,探讨锰对作业工人健康效应影响。（3）接锰工人尿猛水平检测,工龄、性别、年龄、工种与尿锰水平的相关关系,锰对接触工人的主要毒作用靶器官。（4）采用EXCEL软件输入数据, SPSSl3.0软件进行统计学分析,两组率的比较使用卡方检验,以P<0.05作为差异有统计学意义判断值。结果（1） 2005-2009年接锰作业环境空气中锰及其无机化合物和电焊烟尘平均及最高浓度明显呈逐年下降趋势,至2007年以来一直维持在较低水平;（2） 2009年企业作业环境空气中锰及其无机化合物和电焊烟尘时间加权平均浓度在15个监测点中分别仅有1个和2个超标;（3） 1024个接锰工人职业健康体检发现尿锰超标的有39人,其中568电焊工人尿锰超标有24人,超标率为4.23%,其它接锰工人超标率为3.29%,电焊工尿锰水平高于其它接锰工人,但差异无显着性。（4）回归分析,作业工人尿锰水平与工龄呈明显的正相关关系;与年龄、性别无显着关系性。Logistic回归分析显示工人尿锰水平与其血小板数量和肺功能异常有高度相关性。结论（1）调查企业职业卫生工作情况较好,接锰作业环境空气中锰及其无机化合物和电焊烟尘浓度基本达到国家职业卫生安全标准。（2）接锰工人职业健康体检结果显示各项指标异常情况无明显增高,但尿锰超标比例达3.81%,表明仍存在职业损伤隐患。（3）接锰工人尿锰含量与工种、年龄、性别无明显关系,但与接锰工龄呈明显的相关性。（4）锰及电焊烟尘对人体血小板数量和肺功能作用敏感。
王禅[10]（2011）在《对氨基水杨酸钠对锰致大鼠学习记忆障碍及海马细胞损伤的干预研究》文中指出目的探讨对氨基水杨酸钠（PAS-Na）对染锰大鼠学习记忆及海马细胞损伤的干预机制。材料与方法①亚急性染毒大鼠被分为正常对照（对照）﹑染锰﹑低、高剂量PAS-Na（L、H-PAS）治疗组。染毒大鼠每天腹腔注射（ip）氯化锰溶液（15 mg /kg,每周5天）,共4周。接着,治疗大鼠背部皮下注射（sc） PAS-Na 100或200 mg/kg,连续3周或6周。②亚慢性染毒大鼠被分为对照、染锰、PAS-Na预防性干预（PAS-P）和治疗（PAS-T）组。染毒大鼠每天ip氯化锰（15 mg /kg,每周5天）,PAS-P大鼠在染锰的同时,每天背部sc PAS-Na 200 mg/kg（每周3天）,连续6周或12周。接着,PAS-T组大鼠每天背部sc PAS-Na 200mg/kg,连续6周。然后,采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,透射电镜观察大鼠海马星形胶质细胞超微结构,Real-time PCR方法检测GFAP、CoxⅡ、CoxⅣ、Bax、Bcl-2基因的mRNA原始表达量。结果（1）亚急性染毒时,H-PAS组在治疗第1、4、5周的体重高于染锰组,其中在治疗第4、5周时H-PAS组体重高于L-PAS组。亚慢性染毒时,第3,5-7,9-17周染锰组体重小于对照组,第3,5,10-12周PAS-P、PAS-T组体重高于染锰组。（2）亚急性染毒观察7周时,测试第5天染锰组逃避潜伏期和游泳路程大于对照组,L-PAS组逃避潜伏期和游泳路程小于染锰组;10周时,测试第4天染锰组大鼠逃避潜伏期和游泳路程均大于对照组,L-PAS和H-PAS组大鼠逃避潜伏期和游泳路程均小于染锰组。亚慢性染毒观察6周时,测试第4天染锰组逃避潜伏期比对照组长（P<0.05）;12周时,测试第5天染锰组逃避潜伏期比对照组长,PAS-P组逃避潜伏期比染锰组短（P<0.05）;18周时,测试第5天染锰组逃避潜伏期、游泳路程比对照组长,PAS-T组比染锰组游泳路程短（P<0.05）。（3）亚急性染毒观察7周时,染锰组海马星形胶质细胞出现局灶性增生肥大和细胞退变、凋亡,L-PAS组星形胶质细胞较染锰组出现轻度肥大,H-PAS组星形胶质细胞肥大程度较L-PAS组轻;10周时,L-PAS组星形胶质细胞轻度肥大,H-PAS组星形胶质细胞形态与对照组相似。（4）亚急性染毒观察7周时,染锰组Bax、CoxⅡ、GFAP基因表达明显比对照组强,CoxⅣ基因表达明显比对照组弱;L-、H-PAS治疗组CoxⅡ基因表达比染锰组降低（P<0.05）。10周时,染锰组Bax、CoxⅡ、GFAP基因表达明显比对照组增强,CoxⅣ基因表达明显比对照组弱;L-、H-PAS治疗组Bax、CoxⅡ和H-PAS治疗组GFAP基因表达均明显比染锰组降低,L-、H-PAS治疗组CoxⅣ基因表达明显比染锰组强（P<0.05）。亚慢性染毒观察6周时,染锰组Bcl-2、CoxIV基因表达明显比对照组弱,GFAP基因表达明显比对照组强;PAS-P组Bcl-2、CoxIV基因表达明显比染锰组强,GFAP基因表达明显比染锰组弱（P<0.05）。12周时,染锰组Bcl-2、Cox IV基因表达明显比对照组降低（P<0.05）;PAS-P组Bcl-2、CoxIV基因表达明显高于染锰组（P<0.05）,GFAP基因表达明显低于染锰组（P<0.05）。18周时,染锰组Bcl-2、CoxIV基因表达明显低于对照组,GFAP基因表达明显高于对照组;PAS-T组GFAP基因表达低于染锰组（P<0.05）。结论（ 1）PAS-Na对锰的生长毒性可能有拮抗作用。（2）PAS-Na预防性干预或治疗对锰致学习记忆障碍可能有拮抗作用,以对亚急性染锰的治疗作用较明显。（3）PAS-Na对亚急性染锰致海马星形胶质细胞形态异常可能有拮抗作用。（4）PAS-Na预防性干预或治疗PAS-Na对亚急或亚慢性染锰大鼠海马细胞凋亡、线粒体和胶质元纤维蛋白相关基因表达异常可能有拮抗作用,以治疗6周的效果较为明显。
二、锰染毒大鼠的脑组织神经生化分析（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、锰染毒大鼠的脑组织神经生化分析（论文提纲范文）
（1）PAS-Na对ERS-Txnip/Nlrp3炎症通路介导锰神经毒性的干预研究（论文提纲范文）
| 个人简历 |
| 英文缩略词 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 PAS-Na对ERS-Txnip/Nlrp3炎症通路介导锰神经毒性的体外干预研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 主要仪器 |
| 1.2 主要试剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 细胞培养及传代 |
| 2.2 细胞药物处理染毒 |
| 2.3 荧光定量PCR |
| 2.4 Western Blot实验 |
| 2.5 Elisa实验 |
| 2.6 细胞ROS检测 |
| 2.7 数据处理 |
| 3 结果 |
| 3.1 不同浓度锰、PAS-Na暴露对HAPI细胞存活率的影响 |
| 3.2 PAS-Na对染锰HAPI细胞凋亡相关基因表达的影响 |
| 3.3 PAS-Na对染锰HAPI细胞炎症因子释放的影响 |
| 3.4 PAS-Na对染锰HAPI细胞炎症小体表达的影响 |
| 3.5 PAS-Na对染锰HAPI细胞氧化损伤的影响 |
| 3.6 PAS-Na对染锰HAPI细胞IRE1表达的影响 |
| 3.7 TUDCA对染锰HAPI细胞Txnip/Nlrp3信号通路的影响 |
| 3.8 Resveratrol对染锰HAPI细胞Txnip/Nlrp3信号通路的影响 |
| 4 讨论 |
| 第二部分 PAS-Na对ERS-Txnip/Nlrp3炎症通路介导锰神经毒性的体内干预研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 仪器与试剂 |
| 1.2 主要试剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 动物饲养 |
| 2.2 大鼠学习记忆能力测试 |
| 2.3 大鼠样本的采集与处理 |
| 2.4 大鼠海马超微结构观察 |
| 2.5 免疫组化 |
| 2.6 相关元素含量测定 |
| 2.7 荧光定量PCR |
| 2.8 Western Blot实验 |
| 2.9 Elisa实验 |
| 2.10 数据处理 |
| 3 结果 |
| 3.1 染锰对大鼠生长发育的影响及PAS-Na的干预作用 |
| 3.2 染锰对大鼠血、脑锰的影响及PAS-Na的干预作用 |
| 3.3 PAS-Na对染锰大鼠学习记忆的影响 |
| 3.4 PAS-Na对染锰大鼠海马损伤的影响 |
| 3.5 PAS-Na对染锰大鼠海马炎症因子表达的影响 |
| 3.6 PAS-Na对染锰大鼠海马炎症小体表达的影响 |
| 3.7 PAS-Na对染锰大鼠海马氧化损伤的影响 |
| 3.8 PAS-Na对染锰大鼠海马Txnip表达的影响 |
| 3.9 PAS-Na对染锰大鼠海马IRE1表达的影响 |
| 4 讨论 |
| 总结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 博士期间发表论文 |
（3）职业性接触锰作业工人健康危害及相关影响因素分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 结果 |
| 1.职业卫生现场调查 |
| 2.工作场所浓度检测和分析 |
| 3.卫生防护知识调查和分析 |
| 4.职业健康体检指标分析 |
| 5.检测结果和体检结果分析 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 发表的学术论文目录 |
（4）锰毒性不同病程动物模型的建立与评价（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 动物 |
| 1.2 试剂与仪器 |
| 1.3 Mn Cl2溶液的配制 |
| 1.4 动物分组与染毒 |
| 1.5 样本取材 |
| 1.6 血液学及血清生化指标检测 |
| 1.7 血清中锰、铁、铜、锌、钙、镁等微量元素的测定 |
| 1.8 病理组织学观察 |
| 1.9 TH-阳性细胞的免疫组织化学检测 |
| 1.1 0 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 锰对大鼠体重与食物利用率的影响 |
| 2.2 锰对各脏器系数的影响 |
| 2.3 锰对血液学及血清生化指标的影响 |
| 2.4 锰对血清中锰、铁、铜、锌、钙、镁等微量元素的影响 |
| 2.5 锰对肝脏、肾脏及睾丸等的病理组织学影响 |
| 2.5.1 大体观察: |
| 2.5.2 光学显微镜观察: |
| 2.6 锰对黑质多巴胺能神经元活性的影响 |
| 4 讨论 |
（5）番茄红素对慢性锰染毒大鼠学习记忆的改善作用（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试剂和仪器 |
| 1.2 动物和分组 |
| 1.3 水迷宫实验测定大鼠逃避潜伏期和目标象限游泳时间 |
| 1.4 海马、肝及血液中锰含量测定 |
| 1.5 肝和海马组织中氧化应激指标的测定 |
| 1.6 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 番茄红素对慢性锰染毒大鼠一般状况的影响 |
| 2.2 番茄红素对慢性锰染毒大鼠逃避潜伏期和目标象限游泳时间的影响 |
| 2.3 番茄红素对慢性锰染毒大鼠血、肝和海马组织锰含量的影响 |
| 2.4 番茄红素对慢性锰染毒大鼠肝和海马组织氧化应激指标的影响 |
| 3 讨论 |
（6）职业锰暴露对工人认知功能及血浆多巴胺水平的影响（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 职业锰暴露工人健康队列的建立及锰暴露工人的健康状况 |
| 1 对象与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.1.1 纳入和排除标准 |
| 1.1.2 研究对象招募方法 |
| 1.2 调查方法 |
| 1.2.1 基线调查方法 |
| 1.2.2 空气锰浓度的监测方法 |
| 1.2.3 锰暴露工人的健康体检 |
| 1.3 调查质量控制 |
| 1.3.1 调查前的质量控制 |
| 1.3.2 调查过程质量控制 |
| 1.3.3 资料整理分析阶段质量控制 |
| 1.4 统计方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 职业锰暴露工人健康队列的基本情况 |
| 2.2 空气锰浓度监测结果 |
| 2.3 锰暴露工人职业健康体检结果 |
| 2.3.1 锰暴露工人的自觉症状 |
| 2.3.2 锰暴露工人体征、实验室及其他检查结果 |
| 2.3.3 尿锰结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 锰暴露工人作业场所的空气锰浓度 |
| 3.2 锰暴露对工人自觉症状的影响 |
| 3.3 锰暴露对工人体征、实验室及其他检查结果的影响 |
| 3.4 锰暴露对工人尿锰水平的影响 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 职业锰暴露对工人认知功能及血浆多巴胺水平的影响 |
| 1 对象与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.1.1 对照组的纳入和排除标准 |
| 1.1.2 对照组研究对象招募方法 |
| 1.2 调查方法 |
| 1.2.1 问卷调查 |
| 1.2.2 认知功能测试 |
| 1.2.3 Mn-CEI的计算 |
| 1.2.4 采血和实验室检测 |
| 1.3 调查质量控制 |
| 1.4 统计方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 按工种分组的社会人口学特征 |
| 2.2 对照组工人MoCA测试结果的分层分析 |
| 2.3 不同工种对锰暴露工人认知功能的影响 |
| 2.4 冶炼组工人MoCA测试结果的分层分析 |
| 2.5 锰CEI对锰暴露工人认知功能的影响 |
| 2.5.1 按锰CEI分组的社会人口学特征 |
| 2.5.2 不同CEI组MoCA测试结果的协方差分析 |
| 2.6 锰CEI与MoCA的多元回归分析及偏相关分析 |
| 2.7 锰暴露对工人血浆多巴胺水平的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 认知功能的影响因素 |
| 3.2 锰暴露对认知功能的影响 |
| 3.3 锰暴露对作业工人血浆多巴胺水平的影响 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 附件一：职业猛暴露工人健康队列的职业流行病学调查问卷 |
| 附件二：采样记录表 |
| 附件三：职业健康体检表 |
| 附件四：对照组研究对象的职业流行病学调查问卷 |
| 附件五：MoGA量表 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文与着作 |
（7）α-synuclein和tau相互作用参与锰诱导的神经毒性机制及染料木素的保护作用（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 实验一 慢性锰暴露对大鼠黑质α-syn 与 tau 蛋白相互作用的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验二 锰对 PC12 细胞α-syn 与 tau 蛋白相互作用的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验三 α-syn 与 tau 蛋白相互作用在锰诱导的 PC12 细胞毒性中的作用研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验四 染料木素对锰细胞毒性的保护作用 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（8）PAS-Na对锰暴露大鼠基底核GABA能神经递质的影响（论文提纲范文）
| 英文缩写 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 PAS-Na对锰暴露大鼠生长发育的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第二部分 PAS-Na对锰暴露大鼠学习记忆能力的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第三部分 PAS-Na对锰暴露大鼠基底核超微结构改变的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第四部分 PAS-Na对锰暴露大鼠基底核GABA能神经递质的影响 |
| Ⅰ PAS-Na对锰暴露大鼠基底核GABA等神经递质含量的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| Ⅱ PAS-Na对锰暴露大鼠基底核GAD与GABA-T活性影响 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| Ⅲ PAS-Na对锰暴露大鼠基底核GABAa受体与GAT-1表达影响 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 总结 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 博士研究生发表论文 |
| 致谢 |
（9）武汉市职业接锰工人作业环境卫生及健康状况的调查分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 2 研究对象及方法 |
| 2.1 研究对象 |
| 2.2 研究内容与方法 |
| 3 调查结果和分析 |
| 3.1 现场职业卫生学调查和分析 |
| 3.1.1 卫生学调查 |
| 3.1.2 2005～2009 年生产环境二氧化锰和电焊烟尘浓度变化趋势 |
| 3.1.3 2009 年企业检测点空气锰及电焊烟尘超标情况 |
| 3.2 接锰工人职业病健康检查 |
| 3.2.1 接锰工人健康体检结果 |
| 3.2.2 接锰工人性别、工种、工龄、年龄与尿锰水平关系 |
| 3.2.3 电焊工人工龄、年龄与尿锰水平相关关系分析 |
| 3.2.4 电焊烟尘作用机体的靶器官 |
| 4 讨论 |
| 4.1 武汉市部分企业接锰作业环境职业卫生现状 |
| 4.2 接锰作业工人健康状况及分析 |
| 4.3 接锰作业工人尿锰水平影响因素分析 |
| 4.4 电焊烟尘毒作用靶器官 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（10）对氨基水杨酸钠对锰致大鼠学习记忆障碍及海马细胞损伤的干预研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试剂与仪器 |
| 1.2 动物处理 |
| 1.2.1 亚急性染毒 |
| 1.2.2 亚慢性染毒 |
| 1.3 检测指标 |
| 1.3.1 一般情况 |
| 1.3.2 学习记忆能力测试 |
| 1.3.2.1 定位航行实验 |
| 1.3.3 海马星形胶质细胞超微结构 |
| 1.3.3.1 切片制作 |
| 1.3.3.2 电镜观察 |
| 1.3.4 海马基因表达 |
| 1.3.4.1 海马提取 |
| 1.3.4.2 RNA 提取 |
| 1.3.4.3 RNA 纯度及完整性检验 |
| 1.3.4.4 RNA 浓度定量 |
| 1.3.4.5 RNA 逆转录 |
| 1.3.4.6 引物设计及合成 |
| 1.3.4.7 标准品制备 |
| 1.3.4.8 Real-time PCR |
| 1.3.5 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 PAS-Na 对染锰大鼠体重的影响 |
| 2.1.1 PAS-Na 对亚急性染锰大鼠体重的影响 |
| 2.1.2 PAS-Na 对亚慢性染锰大鼠体重的影响 |
| 2.2 PAS-Na 对染锰大鼠学习记忆的影响 |
| 2.2.1 PAS-Na 对亚急性染锰大鼠学习记忆功能的影响 |
| 2.2.2 PAS-Na 对亚慢性染锰大鼠学习记忆的影响 |
| 2.3 PAS-Na 对亚急性染锰大鼠海马星形胶质细胞超微结构的影响.. |
| 2.4 PAS-Na 对染锰大鼠海马基因表达的影响 |
| 2.4.1 PAS-Na 对亚急性染锰大鼠海马基因表达的影响 |
| 2.4.2 PAS-Na 对亚慢性染锰大鼠海马基因表达的影响 |
| 3. 讨论 |
| 3.1 PAS-Na 对染锰大鼠生长发育的影响 |
| 3.2 PAS-Na 对染锰大鼠学习记忆的影响 |
| 3.3 PAS-Na 对星形胶质细胞超微结构的影响 |
| 3.4 PAS-Na 对染锰大鼠海马基因表达的影响 |
| 3.4.1 PAS-Na 对染锰大鼠海马GFAP 基因表达的影响 |
| 3.4.2 PAS-Na 对染锰大鼠海马线粒体基因 CoxⅡ、CoxⅣ表达的影响 |
| 3.4.3 PAS-Na 对染锰大鼠海马凋亡基因Bax、Bcl-2 表达的影响 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 锰边缘系统毒性及有关药物干预研究 |
| 细胞色素氧化酶（COX）与锰的毒性关系 |
| 参考文献 |
| 研究生期间发表的论文 |
| 致谢 |
四、锰染毒大鼠的脑组织神经生化分析（论文参考文献）
- [1]PAS-Na对ERS-Txnip/Nlrp3炎症通路介导锰神经毒性的干预研究[D]. 温平镜. 广西医科大学, 2019(08)
- [2]牛磺酸对锰染毒大鼠纹状体神经组织细胞钙平衡调节的影响[J]. 吴松林,秦绚,郭松超. 中华劳动卫生职业病杂志, 2017(02)
- [3]职业性接触锰作业工人健康危害及相关影响因素分析[D]. 孙伟. 宁夏医科大学, 2014(03)
- [4]锰毒性不同病程动物模型的建立与评价[J]. 张鹏,敬海明,刘建中,刘君丽,董一文,赵超英,蔡丽,郑珊,杜宏举,聂燕敏,李红,张思玉,陈春霞,马玲,李国君. 毒理学杂志, 2013(06)
- [5]番茄红素对慢性锰染毒大鼠学习记忆的改善作用[J]. 刘重斌,陆建峰,郭贺杰,陈露,王瑞. 中国药理学与毒理学杂志, 2013(06)
- [6]职业锰暴露对工人认知功能及血浆多巴胺水平的影响[D]. 刘静. 广西医科大学, 2013(S1)
- [7]α-synuclein和tau相互作用参与锰诱导的神经毒性机制及染料木素的保护作用[D]. 曹瑞. 第四军医大学, 2013(01)
- [8]PAS-Na对锰暴露大鼠基底核GABA能神经递质的影响[D]. 欧超燕. 广西医科大学, 2012(12)
- [9]武汉市职业接锰工人作业环境卫生及健康状况的调查分析[D]. 孙慧珍. 武汉科技大学, 2011(12)
- [10]对氨基水杨酸钠对锰致大鼠学习记忆障碍及海马细胞损伤的干预研究[D]. 王禅. 广西医科大学, 2011(08)