一、胚胎干细胞研究进展及其应用（论文文献综述）
卢琴[1]（2020）在《孤雌生殖人类胚胎干细胞技术的专利适格性研究》文中指出传统人类胚胎干细胞（HESC）技术不可避免需要破坏人胚胎才能获取HESC。随着干细胞技术的发展,开始出现回避伦理争议的新技术。其中,孤雌生殖HESC技术通过孤雌激活人卵母细胞,无需精子参与就能形成孤雌囊胚,从中获取HESC。大多数国家认为该技术回避了传统技术破坏胚胎的伦理争议,并且具有重大的医学价值。随着科学和伦理的发展变化,2019年11月我国新修正的《专利审查指南》放宽了HESC技术的专利审查标准,但仅仅规定了“利用未经体内发育的受精14天以内的人胚胎”获取HESC的相关发明不违背社会公德,可以授予专利。却未提及孤雌生殖HESC技术在我国能否具备专利适格性的问题。因此,本文将对该新技术的专利适格性问题进行研究。首先,介绍孤雌生殖HESC技术相比其他技术的优势。分析2016年我国知识产权局判定孤雌囊胚属于人胚胎,孤雌生殖HESC技术违背社会公德,因而不具备专利适格性而引发的争议案例。指出2019年《专利审查指南》修正后依然未能解决争议问题。其次,通过分析传统HESC技术与孤雌生殖HESC技术专利适格性审查中具有代表性的司法案例,梳理新旧技术发展的脉络,考察干细胞技术发达的美、欧、中、澳等国家对新旧两类技术的专利适格性认定,同时从传统技术的专利审查中获取对新技术有益的借鉴经验。再次,从我国利益平衡、伦理道德、干细胞产业政策导向和产业发展需要等方面出发,为论证我国应当授予孤雌生殖HESC技术专利权保护的正当性和必要性提供依据。最后,得出孤雌生殖HESC技术在我国具备专利适格性的结论。我国对该新技术的专利审查经验尚不成熟。笔者结合我国的实际情况,以前文作为基础和铺垫,为我国《专利审查指南》提供相应的完善建议。
吴珍珠[2]（2020）在《人类胚胎干细胞应用的伦理问题及道德约束研究》文中研究表明进入21世纪,生命科学技术发展迅速,而人类胚胎干细胞的研究与应用更是热门。人类胚胎干细胞是从囊胚的内细胞团中提取出来的、具有无限增殖的能力、可以分化成全身200多种组织和器官的全能细胞。胚胎干细胞的全能性使它具有巨大的医学和药用价值,为脊髓损伤、癌症、白血病、帕金森病等目前医学无法解决的难题提供了新的治疗方法,这也符合十九大提出的加快构建中国特色哲学社会科学的观点。但建立在人类胚胎干细胞应用基础上的克隆技术,亦可能颠覆人类社会,给我们的生活造成巨大的困扰和灾难,不利于社会主义和谐社会的构建。历史的经验告诉我们,技术的发展如无伦理和道德的约束,往往会走入歧途,人类胚胎干细胞的研究与应用亦是如此。本文在分析人类胚胎干细胞应用涉及的利益问题、伤害问题、知情同意等伦理问题的基础上,提出应加强研究人员的思想道德教育,以提升研究人员的道德素质,促使其在人类胚胎干细胞应用过程中遵循伦理和道德原则;同时,通过伦理委员会（以下简称伦委会）的监督和立法制约,以他律的措施确保研究人员在人类胚胎干细胞研究与应用的过程中,以促进人类的幸福安康为最高宗旨,避免技术的应用陷入追名逐利的泥潭,甚至给整个人类社会埋下毁灭的隐患,影响国家的长治久安。只有遵循有利、尊重、不伤害、公正、为人民服务等伦理和道德原则,人类胚胎干细胞的研究与应用才能稳定向前发展,为实现中华民族伟大复兴的中国梦添砖增瓦。
柯敏霞,纪猛,王皓,洪丹萍,吴月红,齐念民[3]（2018）在《干细胞模型研究进展及商业化应用的现状》文中进行了进一步梳理背景:干细胞是具有自我更新能力的潜在的"永生化"细胞,是挖掘人类发育与衰老奥秘的关键,也是实现再生医学的核心。目的:总结胚胎干细胞、成体干细胞和诱导多能干细胞的生物学特性,评述其在细胞治疗和药物筛选中的临床及商业化应用现状,并浅析干细胞产业所面临的问题和前景。方法:应用计算机检索1995至2017年PubMed数据库、CNKI数据库中有关干细胞模型的相关文献,检索词为"干细胞,胚胎干细胞,成体干细胞,诱导多能干细胞,干细胞研究进展,干细胞治疗,药物筛选,stem cells,embryonic stem cells,adult stem cells,induced pluripotent stem cells,stem cell therapy,drug screening"。结果与结论:①干细胞模型根据其来源分为胚胎干细胞、成体干细胞和诱导多能干细胞。不同来源的干细胞具有其独特的生物学优势;②胚胎干细胞具有发育全能性,但存在伦理道德争议;成体干细胞研究最为广泛和深入,应用最为普遍和成熟;诱导多能干细胞具有类似于胚胎干细胞的全能性,并且不受细胞来源、道德伦理等诸多限制,为干细胞应用带来了新的机遇;③干细胞在细胞治疗领域的应用技术最为成熟。目前已有多款成体干细胞商业化产品上市,用于细胞治疗;同时国际上也开展了多个利用胚胎干细胞和诱导多能干细胞进行细胞治疗的临床研究;此外,利用多能干细胞建立的细胞模型或疾病模型进行特异性药物筛选具有广泛的应用前景。
周勇华[4]（2016）在《鱼类细胞体外诱导多倍化及诱导多能性研究》文中提出多倍化现象在自然界,尤其是植物中广泛存在,其在新物种形成和物种进化的过程中具有重要的意义。相较于二倍体,多倍体具有明显的优势,如快速生长,不育,抵抗能力强等。近年来多倍化已经被广泛应用于农业,林业,渔业和畜牧业等,因此多倍化现象的研究不仅有利于研究多倍化在生物进化理论中的重要作用,对于动植物中的多倍体育种也具有重要的指导意义。尽管通过不同的诱导方式产生多倍体已经在植物中获得了成功,但是在动物中通过诱导细胞的多倍化来获得多倍体动物却相对较少。尤其在鱼类中,通过体外诱导和流式细胞仪分选纯化的方式获得稳定的纯的多倍体细胞系或者四倍体细胞系还未见报道。多能干细胞对于研究发育生物学中的关键问题具有重要的作用,可以作为研究转基因动物模型的重要工具细胞。本论文综合运用细胞培养技术、多倍体诱导技术、体细胞核移植技术和iPS诱导技术,分别进行了通过SP600125诱导鲫鱼细胞多倍化来获得稳定的具有发育功能的四倍体鲫鱼细胞系以及通过iPSC诱导技术将斑马鱼的成纤维细胞诱导成多能性的干细胞（iPSC）的相关研究。具体来说,本论文主要进行了以下几个方面的研究。1、SP600125诱导鲫鱼细胞多倍化及建系以二倍体鲫鱼尾鳍组织为材料,利用细胞培养技术,通过建立和优化SP600125体外诱导多倍化方法以及流式分选体系,我们成功获得了四倍体鲫鱼细胞系。获得的四倍体鲫鱼细胞系在培养过程中经过多次流式分析和核型鉴定都是四倍体细胞。2、诱导获得的四倍体鲫鱼细胞的发育潜能研究运用体细胞核移植技术,我们以建立的四倍体鲫鱼细胞系的四倍体细胞核为供体,去膜的二倍体鲫鱼未受精卵为受体进行核移植。共进行了 6批核移植,操作了 922枚鲫鱼的未受精卵,其中有420枚发育到囊胚,73枚发育到原肠晚期,获得了一尾尾部畸形鱼苗。而在对照组中（未进行核移植的去膜二倍体鲫鱼未受精卵）,922枚材料中没有一枚发育到囊胚期。通过流式细胞仪检测分析核移植获得的重构胚的DNA含量情况,结果表明其是四倍体胚胎。3、利用体细胞重编程技术将斑马鱼的成纤维细胞诱导成多能性干细胞（iPSC）首先通过体外建立稳定的斑马鱼胚胎成纤维细胞系和尾鳍成纤维细胞系。然后通过病毒感染的方式向斑马鱼的胚胎成纤维细胞系和尾鳍成纤维细胞系中导入外源基因oct4,sox2,klf4和c-myc,建立了诱导多能性干细胞系（iPSC）。对斑马鱼胚胎和尾鳍成纤维细胞诱导后获得的诱导多能性干细胞系（iPSC）进行碱性磷酸酶活性检测,结果呈阳性。免疫细胞荧光染色鉴定也表明,所获得的斑马鱼胚胎诱导多能性干细胞系（iPSC）表达OCT4、SSEA1、NANOG、SOX2;而斑马鱼尾鳍成纤维诱导所得的iPSC只表达OCT4。同时,斑马鱼胚胎成纤维感染病毒后获得的iPS细胞能分化成具有内、中、外三胚层的类似早期三胚层胚胎的结构的拟胚体（拟胚体的形成是研究干细胞体外分化能力的指标）,且RT-PCR鉴定分析表明其具有分化为三胚层来源的各种细胞的潜能。这些鉴定结果都直接证明,通过我们的诱导方法获得的斑马鱼iPSC是具有多能性的,并且不同体细胞来源所诱导得到的细胞的多能性具有差异。综上所述,在本文中,通过小分子化合物SP600125体外诱导二倍体鲫鱼细胞多倍化,进一步通过流式细胞仪分选纯化获得了四倍体鲫鱼细胞系;我们发现SP600125诱导多倍化过程不通过Jnk信号通路,而p53信号通路可能参与了这个诱导过程;用SP600125诱导的四倍体细胞的细胞核作为供体,二倍体鲫鱼未受精的卵为受体,通过核移植获得了四倍体胚胎。这些结果表明通过将体细胞诱导多倍化和体细胞核移植技术相结合是产生多倍体的一种有效方式。本研究通过体外建立稳定的斑马鱼胚胎成纤维细胞系和尾鳍成纤维细胞系,以病毒感染的方式向斑马鱼的胚胎成纤维细胞系和尾鳍成纤维细胞系中导入外源基因（oct4,sox2,klf4和c-myc）建立了鱼类诱导多能性干细胞系（iPSC）,为体细胞重编程辅助育种技术的研发奠定了基础,同时也为鱼类发育生物学的研究提供了一个非常有用的细胞系工具和研究平台。
王芳,陈绍威[5]（2015）在《胚胎体外培养及胚胎干细胞系的建立》文中研究指明背景:人类胚胎干细胞体外建系成功,对人类胚胎发育机制和发育生物学研究、细胞和组织移植治疗某些疾病等领域都有重大意义。目的:综述近年来关于胚胎体外培养及建立胚胎干细胞系的研究进展,重点探讨胚胎体外培养影响因素、人废弃胚胎培养分离内细胞团建立胚胎干细胞系的方法及建立胚胎干细胞系的条件。方法:以"胚胎（embryo）,胚胎干细胞（embryonic stem cell）,共培养（co culture）,序贯培养（sequential culture）"为检索词,由第一作者检索2000至2014年CNKI数据库和SCI数据库,获取有关胚胎体外培养、移植及胚胎干细胞建系的相关文献,并进行系统评价,最终保留58篇文献进行分析。结果与结论:胚胎体外培养条件是影响胚胎移植结局的重要因素,其中包括培养液的成分和培养体系。在过去的研究过程中,培养液的构成及应用已经发生了很大的变化,培养体系也从单一培养发展到共培养、序贯培养。伦理问题及胚胎来源的限制束缚着人胚胎干细胞系的建立,利用临床废弃的低质量的胚胎可作为建立人胚胎干细胞系的材料来源之一,有效的缓解了建立人胚胎干细胞系过程中胚胎缺乏的问题,并减少其中的伦理学纷争。
董效信,任晓敏,董雅妮[6]（2011）在《胚胎干细胞研究的伦理和心理学问题》文中进行了进一步梳理背景:胚胎干细胞研究具有重要的医学价值,在基因治疗、组织工程学、药学等许多领域都具有广泛的应用,使人们看到了治疗疾病的新希望,而其相关研究成果也引发了许多伦理和心理学问题。目的:综述目前胚胎干细胞研究中的伦理和心理学问题。方法:应用计算机检索2001-01/2010-12PubMed数据库、维普数据库及万方数据库有关干细胞研究产生的伦理和心理学问题相关文献,英文检索词"embryonicstemcells,morality,psychological",中文检索词"胚胎干细胞,伦理学,心理学"。检索文献量总计122篇,最终纳入符合标准的文献33篇。结果与结论:胚胎干细胞究中伦理学问题的焦点主要包括:干细胞来源的伦理学问题,干细胞"克隆"的伦理学问题,干细胞与生命的伦理学问题,干细胞研究存在和需要解决的问题及干细胞研究中伦理学规范问题。干细胞研究中的心理学问题主要是人们对干细胞研究特别是"克隆"技术的认识。相关研究多涉及造血干细胞移植患者的心理变化。胚胎干细胞的研究目前已取得了突破性成果,给医疗、卫生健康等方面带来了革命性影响。
廖红群[7]（2011）在《干细胞诱导分化为甲状腺细胞用于临床的可能性》文中进行了进一步梳理背景:干细胞诱导分化为甲状腺细胞的研究较少,胚胎干细胞诱导分化为甲状腺细胞已经取得了一定的成果,但其他类型干细胞各有特点,能否诱导分化为甲状腺细胞仍待深入研究。目的:回顾分析各类干细胞的优缺点及诱导分化为甲状腺细胞的研究进展。方法:应用计算机检索1982-01/2011-04PubMed数据库相关文章,检索词"stemcell,thyroidcells,induction,differentiation",并限定文章语言种类为English。同时计算机检索1982-01/2011-04万方数据库、1989-01/2011-04维普资讯网数据库和1994-01/2011-04中国知网数据库相关文章,检索词"干细胞,甲状腺细胞,诱导,分化",并限定文章语言种类为中文。共检索到文献1052篇,最终纳入符合标准的文献50篇。结果与结论:不可逆性甲状腺功能减退患者需终身服用甲状腺激素,对患者的生活带来很大不便,近年来干细胞研究有望解决这些医学难题。胚胎干细胞在体外环境可诱导分化为甲状腺细胞,但受伦理学困扰和出现细胞移植排斥反应等原因其应用受到限制。其他类型干细胞各有特点,在不同的诱导条件下能够向不同的谱系分化,已广泛的用于治疗各种疾病,但未见向甲状腺细胞分化的报道。
郑泉[8]（2011）在《人类胚胎干细胞研究的基本状况与影响因素探析及其对策建议》文中提出生命科学是本世纪最令人瞩目的研究领域,其中的人类胚胎干细胞研究是生命科学领域里最前沿课题之一。近年来,人类胚胎干细胞研究越来越受到世界各国的重视,其巨大的医学应用潜力正给人类带来一场医学革命。然而,目前在其研究的道路上遇到了许多的困难和障碍,学术界和政策制定者乃至全社会就人类胚胎干细胞的来源、人类胚胎干细胞研究的相关法律、伦理等社会问题展开了激烈的争论。本文对人类胚胎干细胞研究现状等问题进行了深入的研究,主要工作包括:1、介绍了国内外人类胚胎干细胞研究发展的时代背景,通过对1975—2008年被Web of Science收录的人类胚胎干细胞研究文献进行计量学分析,从整体上客观地认识该主题的研究概况和进展速度,并对中国和发达国家的数据进行对比分析。2、基于当前人类胚胎干细胞研究的发展情况,运用“行动者-网络”理论模式的独特视角,建构了行动者网络并界定了网络中的各类行动者,分析了人类胚胎干细胞研究与发展的影响因素,进一步提出了相应的针对性策略,由此深化认识了行动者网络理论在人类胚胎干细胞研究中的理论和现实意义。3、结合我国人类胚胎干细胞研究状况、问题,为加强我国人类胚胎干细胞研究的发展机制,试提出相应的对策建议。
陈亮[9]（2010）在《绵羊类胚胎干细胞的分离与克隆》文中认为研究绵羊类ES的体外培养,不仅可以作为研究哺乳动物发育的体外模型,也可以用于治疗和生殖,应用前景广阔。目前,胚胎干细胞研究主要集中在分离纯化、扩增技术和定向诱导分化等几个方面（刘岚2008）,而且哺乳动物ES细胞建系存在建系效率低等诸多问题,甚至仍然没有绵羊ES成功建系的报道。本研究选用宁夏白滩绵羊体内胚胎为试验对象,参照小鼠和人ES细胞报道的建系方法,比较了不同培养条件对分离培养不同胚胎发育时期来源的绵羊类ES细胞的影响,为进一步建立绵羊ES细胞系提供参考。实验主要结果如下:1、试验使用绵羊胚胎93枚,其中有80枚完成孵化,ICM形成率为48.4%;共形成35个类ES细胞团,ES的细胞团形成率为37.6%。试验分别以13.5 d小鼠胎儿成纤维细胞MEF、流产绵羊胎儿成纤维细胞SEF为饲养层分离、培养绵羊类ES细胞。结果显示:胚胎在这两种饲养层都能促进绵羊类ES细胞增殖,它们的孵化率分别是71.4%（5/7）,66.7%（8/12）;ICM增殖率57.1%（4/7）,41.7%（5/12）,差异均不明显;而且发现ICM在SEF上增殖缓慢,传代次数有限,因此MEF更适合绵羊ES细胞的传代与培养。2、处于不同发育阶段绵羊胚胎其贴壁率和ICM增殖率也不完全相同。囊胚的贴壁率（75%）和致密桑葚胚的贴壁率（62.5%）相对较高;囊胚ICM的增殖率（47.9%）、致密桑葚胚ICM的增殖率（57.1%）高于桑葚胚ICM的增殖率（25%）和孵化囊胚ICM的增殖率（44.4%）。而且同阶段胚胎,显微镜下观察,A级胚胎的贴壁率和增殖率都高于B级胚胎的贴壁率和增殖率。结果表明:致密桑葚胚和囊胚更适合绵羊类ES细胞的体外分离和培养。3、试验分析了以MEF作饲养层,培养液中单独或联合应用FBS、KSR和昆白小鼠ES细胞条件培养基对绵羊类ES分离和传代的影响。结果:它们都可促进类ES细胞的生长,其中以KnockoutTMDMEM/F-12+5%FBS+15%KSR的有血清培养体系,结合添加细胞因子LIF（1000 IU/mL）和bFGF（20 ng/mL）,采用机械离散细胞团块的传代方法,最高将绵羊类ES传至8代。而同等条件下,5%FBS+15%KSR+20% ESCCM的培养体系也可以将类ES细胞传至7代。4、试验比较了以KnockoutTMDMEM/F-12+5%FBS+15%KSR +0.1 mmol/Lβ-Me+0.1 mmol/L非必需氨基酸+2 mmol/L谷氨酰胺+2 mmol/L丙酮酸钠+100 IU/mL青霉素+100μg/mL链霉素+1000 IU/mL LIF+20 ng/mL bFGF为基础培养液,分别添加（20、40或60ng/mL）三种不同浓度SCF,发现其对促进绵类ES细胞的分离克隆影响不明显。5、本试验还对冷冻胚胎进行ES细胞分离、培养的研究。试验结果:只要冷冻胚胎解冻、复活正常,同样可以孵化、ICM增殖和传代。6、体外分离培养得到的绵羊类ES细胞,经形态学观察鉴定、AKP染色、核型检查、Nanog检测、体外分化实验等,发现绵羊类ES细胞形态典型、AKP染色表现强阳性、稳定的二倍体核型、并能表达多潜能性细胞因子Nanog、体外培养得到类胚体,证明其具有胚胎干细胞的特性。
温叶飞,胡帼颖,张志雄,顾汉卿[10]（2009）在《组织工程技术系列专题（二）——种子细胞与组织工程的研究》文中研究说明
二、胚胎干细胞研究进展及其应用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、胚胎干细胞研究进展及其应用（论文提纲范文）
（1）孤雌生殖人类胚胎干细胞技术的专利适格性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 第一节 选题背景及意义 |
| 第二节 文献综述 |
| 一、国内研究现状 |
| 二、国外研究现状 |
| 第三节 研究内容及研究方法 |
| 一、研究内容 |
| 二、研究方法 |
| 第四节 创新点 |
| 第二章 我国孤雌生殖HESC技术的专利审查及现存问题 |
| 第一节 孤雌生殖HESC技术与传统技术的比较 |
| 一、孤雌生殖HESC技术的相关概念 |
| 二、HESC的获取来源 |
| 三、孤雌生殖HESC技术的优势 |
| 四、孤雌生殖HESC技术在我国的专利授权情况 |
| 第二节 《专利审查指南》修改前对孤雌生殖HESC技术的专利适格性认定 |
| 一、湖南光琇公司孤雌生殖HESC技术的专利复审案 |
| 二、专利适格性判断的法律依据 |
| 第三节 《专利审查指南》修改后依然存在的问题 |
| 一、新修正条款 |
| 二、最大的亮点 |
| 三、现存的问题 |
| 本章小结 |
| 第三章 传统与孤雌生殖HESC技术的专利适格性争议 |
| 第一节 干细胞领域专利适格性的判断模式 |
| 一、欧洲模式 |
| 二、美国模式 |
| 第二节 传统HESC技术的专利适格性争议 |
| 一、传统HESC技术的伦理争议 |
| 二、WARF案发明在美、欧、中的专利适格性认定 |
| 三、城户常雄案发明在美、欧、中的专利适格性认定 |
| 第三节 孤雌生殖HESC技术的专利适格性争议 |
| 一、孤雌生殖HESC技术的伦理争议 |
| 二、欧洲认定孤雌生殖HESC技术具有专利适格性 |
| 三、澳大利亚认定孤雌生殖HESC技术具有专利适格性 |
| 四、孤雌生殖HESC技术在其他国家的专利授权情况 |
| 本章小结 |
| 第四章 我国授予孤雌生殖HESC技术专利权保护的正当性与必要性 |
| 第一节 授予专利权保护的正当性 |
| 一、符合利益平衡要求 |
| 二、符合中国伦理指南的指导原则 |
| 三、符合不断变化的社会公德内涵 |
| 第二节 授予专利权保护的必要性 |
| 一、干细胞产业的政策导向 |
| 二、干细胞产业发展的需要 |
| 本章小结 |
| 第五章 对我国孤雌生殖HESC技术专利审查制度的完善建议 |
| 第一节 孤雌生殖HESC技术在我国具有专利适格性 |
| 一、不属于科学发现 |
| 二、不属于疾病的诊断和治疗方法 |
| 三、HESC及其制备方法不属于不可专利的主题 |
| 四、不属于人胚胎的工商业目的的运用 |
| 第二节 对《专利审查指南》的完善建议 |
| 一、在专利审查中将14天研究期限适用于孤雌囊胚 |
| 二、允许以现存孤雌干细胞系进行研究的成果可专利 |
| 三、对具体条款的修改建议 |
| 本章小结 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 附件 |
（2）人类胚胎干细胞应用的伦理问题及道德约束研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 研究背景及意义 |
| 1.1.1 研究的背景 |
| 1.1.2 研究的意义 |
| 1.2 国内外研究现状 |
| 1.2.1 国外研究现状 |
| 1.2.2 国内研究现状 |
| 1.3 研究思路、方法和创新点 |
| 第二章 人类胚胎干细胞的应用及应遵循的伦理和道德原则 |
| 2.1 人类胚胎干细胞应用概述 |
| 2.1.1 人类胚胎干细胞的来源 |
| 2.1.2 人类胚胎干细胞的应用 |
| 2.2 人类胚胎干细胞应用应遵循的伦理和道德原则 |
| 2.2.1 有利原则 |
| 2.2.2 尊重原则 |
| 2.2.3 公正原则 |
| 2.2.4 不伤害原则 |
| 2.2.5 为人民服务的原则 |
| 第三章 人类胚胎干细胞的应用面临的伦理和道德问题 |
| 3.1 人类胚胎干细胞应用的伦理问题 |
| 3.1.1 人类胚胎的道德地位问题 |
| 3.1.2 知情同意问题 |
| 3.1.3 伤害问题 |
| 3.1.4 尊严问题 |
| 3.1.5 利益分配问题 |
| 3.2 人类胚胎干细胞应用的道德问题 |
| 3.2.1 道德自律的缺失影响人类胚胎干细胞应用的目的 |
| 3.2.2 他律手段的约束力欠缺影响人类胚胎干细胞应用的前景 |
| 第四章 应用人类胚胎干细胞时应加强道德自律并完善他律手段 |
| 4.1 加强相关研究人员的道德教育 |
| 4.1.1 编写人类胚胎干细胞应用的道德教育教材 |
| 4.1.2 加强高校医学生的道德教育 |
| 4.1.3 完善继续教育机制以加强科研人员的职业道德教育 |
| 4.2 确保人类胚胎干细胞应用的程序正义 |
| 4.2.1 研究机构合理设立伦理委员会 |
| 4.2.2 项目负责人提交合格的申请材料 |
| 4.2.3 各机构的伦委会进行伦理审核 |
| 4.3 完善立法以增强人类胚胎干细胞应用的他律约束力 |
| 4.3.1 完善人类胚胎干细胞应用的法律法规 |
| 4.3.2 加大对违法者的惩罚力度以确保人类胚胎干细胞的应用符合伦理道德要求 |
| 4.3.3 公开典型案例以加强他律约束力 |
| 结语 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 攻读硕士期间发表论文情况 |
（3）干细胞模型研究进展及商业化应用的现状（论文提纲范文）
| 文章快速阅读: |
| 文题释义: |
| 0引言Introduction |
| 1 资料和方法Data and methods |
| 1.1 资料来源 |
| 1.2 文献筛选标准 |
| 2 结果Results |
| 2.1 干细胞模型 |
| 2.1.1 胚胎干细胞 |
| 2.1.2 成体干细胞 |
| 2.1.3 诱导多潜能干细胞 |
| 2.2 商业化应用现状 |
| 2.2.1 细胞治疗 |
| 2.2.2 药物筛选 |
| 3 讨论Discussion |
（4）鱼类细胞体外诱导多倍化及诱导多能性研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 前言 |
| 1.1 鱼类多倍体研究及其意义 |
| 1.2 JNK信号通路在个体发育调控中的作用 |
| 1.3 体细胞重编程技术及其应用 |
| 1.3.1 核移植技术 |
| 1.3.2 诱导多能性干细胞 |
| 1.4 诱导性多能干细胞研究进展及应用 |
| 1.5 本研究的目的和意义 |
| 第二章 SP600125诱导鱼类细胞多倍化及四倍体细胞系建立 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 二倍体鲫鱼的饲养及繁殖 |
| 2.1.2 主要药品、试剂和仪器耗材 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 二倍体鲫鱼细胞系的建立 |
| 2.2.2 SP600125诱导二倍体鲫鱼细胞系多倍化 |
| 2.2.3 流式细胞仪分选纯化获得稳定的四倍体鲫鱼细胞系 |
| 2.2.4 核型分析 |
| 2.2.5 MTT法检测细胞增值能力 |
| 2.2.6 Western检测SP600125处理后Jnk,P-Jnk的蛋白水平 |
| 2.2.7 RNA干扰 |
| 2.2.8 实时荧光定量PCR分析 |
| 2.2.9 免疫荧光 |
| 2.2.10 高内涵进行细胞核分析 |
| 2.3 实验结果与分析 |
| 2.3.1 体外培养建立了一个稳定的二倍体细胞系 |
| 2.3.2 SP600125体外诱导二倍体鲫鱼细胞多倍化 |
| 2.3.3 通过优化的SP600125处理方式和流式分选体系成功获得了四倍体鲫鱼细胞系 |
| 2.3.4 获得的四倍体细胞系特征研究 |
| 2.3.5 Jnk基因可能不直接参与SP600125的细胞多倍化诱导 |
| 2.3.6 免疫荧光检测二倍体细胞核四倍体细胞中与细胞周期相关的蛋白p21,p53的表达情况 |
| 2.4 讨论 |
| 第三章 体外诱导获得的鲫鱼四倍体细胞系的发育潜能研究 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 二倍体鲫鱼的饲养及繁殖 |
| 3.1.2 主要药品、试剂和酶以及仪器耗材 |
| 3.1.3 实验所用到仪器 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 二倍体鲫鱼细胞系的建立 |
| 3.2.2 SP600125诱导二倍体鲫鱼细胞系多倍化并纯化建系 |
| 3.2.3 核移植受体二倍体鲫鱼未受精卵的准备 |
| 3.2.4 核移植供体细胞的准备 |
| 3.2.5 核移植操作方法 |
| 3.2.6 核移植胚胎观察记录方法 |
| 3.2.7 流式分析 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 核移植后的胚胎发育情况统计 |
| 3.3.2 未进行核移植的鲫鱼卵子的发育情况 |
| 3.3.3 进行核移植后的鲫鱼卵子的发育情况 |
| 3.3.4 核移植后的胚胎倍性鉴定结果 |
| 3.4 讨论 |
| 第四章 人工诱导斑马鱼成纤维细胞为诱导多能性干细胞 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 斑马鱼的饲养及繁殖 |
| 4.1.2 斑马鱼胚胎成纤维细胞系的建立 |
| 4.1.3 斑马鱼尾鳍成纤维细胞系的建立 |
| 4.2 实验试剂与方法 |
| 4.3 斑马鱼多能性干细胞的鉴定 |
| 4.3.1 基因组PCR检测外源基因组整合 |
| 4.3.2 RT-PCR检测外源基因沉默和内源基因开启 |
| 4.4 斑马鱼诱导多能性干细胞多能性检测 |
| 4.4.1 核型分析 |
| 4.4.2 RT-PCR和实时定量PCR分析多能性基因表达 |
| 4.4.3 AP染色 |
| 4.4.4 细胞免疫染色 |
| 4.5 诱导多能性干细胞的发育潜能鉴定 |
| 4.5.1 体外分化潜能鉴定 |
| 4.5.1.1 拟胚体形成 |
| 4.5.1.2 三胚层标志基因检测 |
| 4.5.1.3 免疫荧光检测NSTIN的表达 |
| 4.6 实验结果与分析 |
| 4.6.1 斑马鱼不同时期来源的成纤维细胞的AP染色及多能性因子表达情况 |
| 4.6.2 斑马鱼成纤维细胞病毒感染的效率检测 |
| 4.6.3 斑马鱼iPS细胞的诱导及建系 |
| 4.6.4 斑马鱼iPS的多能性鉴定 |
| 4.6.5 斑马鱼iPS多能性荧光检测 |
| 4.6.6 斑马鱼iPS的体外分化潜能 |
| 4.7 讨论 |
| 第五章 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 博士学习期间的科研成果及获奖情况 |
| 致谢 |
（5）胚胎体外培养及胚胎干细胞系的建立（论文提纲范文）
| 0引言Introduction |
| 1资料和方法Dataandmethods |
| 2结果Results |
| 2.1胚胎体外培养 |
| 2.2人胚胎干细胞系建立的影响因素 |
| 2.3人胚胎干细胞的实验研究现状及临床应用前景 |
| 3展望Prospects |
（6）胚胎干细胞研究的伦理和心理学问题（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 资料和方法 |
| 1.1 资料来源 |
| 1.2 入选标准 |
| 1.3 资料提取计算机初检得到122篇文献, |
| 1.4 质量评估 |
| 2 结果 |
| 2.1干细胞研究中的伦理学问题 |
| 2.1.1干细胞来源的伦理学问题[2, 5] |
| 2.1.2干细胞“克隆”的伦理学问题 |
| 2.1.3干细胞与生命的伦理学问题[14] |
| 2.1.4干细胞研究存在和需要解决的问题 |
| 2.1.5干细胞研究中伦理学规范问题 |
| 2.2 干细胞研究中的心理学问题 |
| 3 结论 |
（7）干细胞诱导分化为甲状腺细胞用于临床的可能性（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 资料和方法 |
| 1.1 资料来源 |
| 1.2 入选标准 |
| 1.3 资料提取 |
| 2 结果 |
| 2.1 胚胎干细胞 |
| 2.2 诱导性多潜能干细胞 |
| 2.3 骨髓间充质干细胞 |
| 2.4 脂肪间充质干细胞 |
| 2.5 脐血间充质干细胞与脐带间充质干细胞 |
（8）人类胚胎干细胞研究的基本状况与影响因素探析及其对策建议（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 导论 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 研究目的和意义 |
| 1.2.1 研究目的 |
| 1.2.2 研究意义 |
| 1.3 国内外研究现状 |
| 1.3.1 国外研究现状 |
| 1.3.2 国内研究现状 |
| 1.4 研究内容和方法 |
| 1.4.1 研究的主要内容 |
| 1.4.2 研究方法 |
| 1.5 本研究的创新与不足 |
| 第二章 人类胚胎干细胞研究的基本状况——基于 SCI 数据库的文献计量分析 |
| 2.1 人类胚胎干细胞研究的国内外发展概况 |
| 2.1.1 人类胚胎干细胞研究的国外发展概况 |
| 2.1.2 人类胚胎干细胞研究的国内发展现状 |
| 2.2 人类胚胎干细胞研究现状初探——计量分析方法 |
| 2.3 人类胚胎干细胞研究文献的分布特征 |
| 2.3.1 人类胚胎干细胞研究文献的时间分布 |
| 2.3.2 人类胚胎干细胞研究文献的地区分布 |
| 2.3.3 人类胚胎干细胞研究文献的机构分布 |
| 2.3.4 人类胚胎干细胞研究文献的高被引文献分布 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 行动者网络理论述论 |
| 3.1 行动者网络理论基础 |
| 3.1.1 行动者网络理论概述 |
| 3.1.2 行动者网络理论核心要义 |
| 3.1.3 转译过程分析 |
| 3.2 人类胚胎干细胞研究的行动者网络构成 |
| 第四章 人类胚胎干细胞研究网络中的行动者及其影响因素：基于行动者网络理论视角 |
| 4.1 引言 |
| 4.1.1 行动者Ⅰ：人类胚胎干细胞 |
| 4.1.2 行动者Ⅱ：科学家 |
| 4.1.3 行动者Ⅲ：人类胚胎干细胞的供给者 |
| 4.1.4 行动者Ⅳ：各国伦理和管理监管机制 |
| 4.1.5 行动者Ⅴ：法律机制 |
| 4.2 小结与启示 |
| 第五章 我国人类胚胎干细胞研究存在的问题及其对策建议 |
| 5.1 我国人类胚胎干细胞研究存在的问题 |
| 5.2 加强我国人类胚胎干细胞研究的对策建议 |
| 5.2.1 以科研人员为中心，加大基础创新力度 |
| 5.2.2 加强临床应用研究，促进基础研究向临床应用的转化 |
| 5.2.3 完善我国人类胚胎干细胞研究的伦理准则 |
| 5.2.4 将伦理准则法律化，正确应用治疗性克隆 |
| 第六章 研究结论和展望 |
| 6.1 研究结论 |
| 6.2 进一步研究展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 |
（9）绵羊类胚胎干细胞的分离与克隆（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一章 胚胎干细胞的研究进展 |
| 1.1 干细胞的概念、分类、来源和研究的意义 |
| 1.2 胚胎干细胞主要研究进展 |
| 1.2.1 ES 细胞的主要研究进展 |
| 1.2.2 EG 细胞主要研究进展 |
| 1.2.3 小鼠胚胎干细胞的研究进展 |
| 1.2.4 人胚胎干细胞的研究进展 |
| 1.2.5 绵羊胚胎干细胞的研究进展 |
| 1.2.6 山羊ESCs 的研究历程 |
| 1.3 胚胎干细胞的生物学特性 |
| 1.3.1 哺乳动物胚胎干细胞的生物学特性 |
| 1.3.2 维持ES 细胞生物学特性的因子和分子机制 |
| 1.4 影响胚胎干细胞分离、培养的因素分析 |
| 1.4.1 遗传因素和个体差异 |
| 1.4.2 饲养层、血清成分、培养基和细胞因子 |
| 1.4.3 分离培养方式 |
| 1.4.4 胎龄、胚胎质量及胚胎冷冻 |
| 1.5 胚胎干细胞的鉴定方法 |
| 1.5.1 形态学鉴定 |
| 1.5.2 碱性磷酸酶活性检测 |
| 1.5.3 阶段特异性胚胎细胞表面抗原检测和全能性基因表达的检测 |
| 1.5.4 端粒酶活性和核型分析 |
| 1.5.5 体内和体外分化实验 |
| 1.5.6 嵌合体动物的制备和核移植实验 |
| 1.6 ES 细胞的问题与展望 |
| 1.6.1 问题 |
| 1.6.2 展望 |
| 第二章 绵羊冷冻精液的制作和超数排卵的研究 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 试验仪器和试剂 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 绵羊冷冻精液的制作 |
| 2.2.2 人工授精 |
| 2.2.3 绵羊胚胎的收集 |
| 2.2.4 胚胎冷冻与解冻 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 绵羊冷冻精液解冻 |
| 2.3.2 绵羊胚胎的获取 |
| 2.3.3 超排效果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 绵羊类胚胎干细胞的分离与克隆 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 实验仪器 |
| 3.1.3 主要试剂和培养液 |
| 3.2 试验方法 |
| 3.2.1 饲养层MEF 的制备 |
| 3.2.2 饲养层SEF 的制备 |
| 3.2.3 小鼠条件培养基的制备 |
| 3.2.4 绵羊类ES 细胞的分离与培养 |
| 3.2.5 绵羊类ESCS 的鉴定 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 绵羊内细胞团的分离与培养 |
| 3.3.2 不同饲养层对绵羊类ES 细胞分离传代的影响 |
| 3.3.3 不同分离方法对绵羊类ES 细胞的分离培养的影响 |
| 3.3.4 不同培养基对绵羊类ES 细胞的分离培养的影响 |
| 3.3.5 不同胎龄对ES 细胞的分离传代的影响 |
| 3.3.6 冷冻胚胎对ES 细胞继续发育的影响 |
| 3.3.7 胚胎质量对分离培养绵羊类ES 细胞的影响 |
| 3.3.8 AKP 染色 |
| 3.3.9 核型检查 |
| 3.3.10 体外分化能力测定 |
| 3.3.11 绵羊类 ESCS 特定基因的 RT-PCR 鉴定结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 血清成分、培养基和细胞因子对绵羊ES 的分离克隆的影响 |
| 3.4.2 冷冻胚胎对绵羊ES 细胞分离克隆的影响 |
| 3.4.3 饲养层对绵羊类ES 细胞分离、克隆的影响 |
| 3.4.4 传代对ES 细胞的影响 |
| 3.4.5 不同胚龄对ES 细胞的影响 |
| 3.5 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 缩略词 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（10）组织工程技术系列专题（二）——种子细胞与组织工程的研究（论文提纲范文）
| 1 种子细胞来源 |
| 2 种子细胞-胚胎干细胞的研究 |
| 2.1 胚胎干细胞研究现状 |
| 2.1.1 胚胎干细胞的分离和建系 |
| 2.1.2 胚胎干细胞在体外的增殖分化及其调控和诱导条件的研究 |
| (1) 内源性调控 |
| (2) 外源性调控 |
| 2.2 胚胎干细胞的最新研究进展 |
| 3 成体干细胞 |
| 3.1 骨髓间充质干细胞 |
| 3.2 种子细胞-皮肤干细胞的研究 |
| 3.2.1 皮肤干细胞的生物学特性研究 |
| 3.2.2 皮肤干细胞的研究现状 |
| (1) 皮肤干细胞的分离培养 |
| (2) 皮肤干细胞的分化调控研究 |
| (3) 皮肤干细胞的应用 |
| 3.3 神经干细胞 |
| 3.3.1 神经干细胞的特点和来源 |
| 3.3.2 神经干细胞的表型特征及其分化 NSCs |
| 3.3.3 神经干细胞增殖、分化的调控机制研究 |
| (1) Notch 信号传导途径对NSCs分化的调控机制 |
| (2) bHLH 信号传导途径对NSCs分化的调控机制 |
| (3) Wnt 信号传导途径对NSCs 分化的调控机制 |
| (4) DNA 甲基化对NSCs 分化的调控机制 |
| (5) 其他基因对NSCs 分化的调控机制 |
| (6) 外界环境因素对NSCs 分化的调控机制 |
| 3.4 神经干细胞的应用研究 |
| 3.5 种子细胞-脂肪干细胞的研究 |
| 3.5.1 脂肪组织来源的基质细胞特性 ADSC |
| 3.5.2 脂肪干细胞的分化潜能研究 |
| (1) ADSC的成骨分化潜能 |
| (2) ADSC的成软骨分化潜能 |
| (3) ADSC的成脂分化潜能 |
| (4) ADSC的成神经分化潜能 |
| (5) ADSC的其他分化潜能 |
| 3.6 脐带间质干细胞 |
| 3.6.1 脐带间质干细胞的来源及其分化潜能 |
| 3.6.2 脐带间质干细胞的标志 |
| 3.6.3 脐带间充质干细胞的免疫调节功能 Weiss |
| 3.6.4 脐带间充质干细胞的应用前景 |
| 4 种子细胞未来的发展趋势、面临的问题和解决措施 |
| 4.1 种子细胞所面临的问题 |
| (1) 来源困难。 |
| (2) 分离方法尚不完备, 鉴定标志仍不确定。 |
| (3) 免疫排斥反应。 |
| (4) 安全性难以保证。 |
| (5) 干细胞在体外形成完整的器官难以做到。 |
| (6) 分化的机制尚不清楚。 |
| (7) 伦理问题。 |
| 4.2 种子细胞未来的发展目标和解决措施 |
四、胚胎干细胞研究进展及其应用（论文参考文献）
- [1]孤雌生殖人类胚胎干细胞技术的专利适格性研究[D]. 卢琴. 华南理工大学, 2020(07)
- [2]人类胚胎干细胞应用的伦理问题及道德约束研究[D]. 吴珍珠. 昆明理工大学, 2020(05)
- [3]干细胞模型研究进展及商业化应用的现状[J]. 柯敏霞,纪猛,王皓,洪丹萍,吴月红,齐念民. 中国组织工程研究, 2018(05)
- [4]鱼类细胞体外诱导多倍化及诱导多能性研究[D]. 周勇华. 湖南师范大学, 2016(01)
- [5]胚胎体外培养及胚胎干细胞系的建立[J]. 王芳,陈绍威. 中国组织工程研究, 2015(14)
- [6]胚胎干细胞研究的伦理和心理学问题[J]. 董效信,任晓敏,董雅妮. 中国组织工程研究与临床康复, 2011(49)
- [7]干细胞诱导分化为甲状腺细胞用于临床的可能性[J]. 廖红群. 中国组织工程研究与临床康复, 2011(49)
- [8]人类胚胎干细胞研究的基本状况与影响因素探析及其对策建议[D]. 郑泉. 中国科学技术大学, 2011(11)
- [9]绵羊类胚胎干细胞的分离与克隆[D]. 陈亮. 西北农林科技大学, 2010(11)
- [10]组织工程技术系列专题（二）——种子细胞与组织工程的研究[J]. 温叶飞,胡帼颖,张志雄,顾汉卿. 透析与人工器官, 2009(02)