一、应激时大鼠胃粘膜中MDA含量和CAT、Ca~(2+)-ATPase活性的变化（论文文献综述）
陈嘉希[1]（2020）在《丹酚酸B预处理对大鼠小肠缺血再灌注损伤的保护作用研究》文中进行了进一步梳理目的:观察丹酚酸B预处理对肠缺血再灌注大鼠的保护作用,并对其作用机制进行初步研究。方法:本次实验设置了阴性对照组和模型组,丹酚酸B给药组也设置相应的对照组和模型组,每组中随机配备雄性SD大鼠12只,通过夹闭肠系膜上动脉,制造肠道缺血,时间维持60min,随后再灌注24h从而得到实验所需的肠缺血再灌注模型。测定各组大鼠血清中的CAT、SOD、GSH、MDA含量,测定各组大鼠回肠组织中CAT、SOD、GSH、MDA以及TNF-α、IL-1β、IL-6等因子的含量;检测其髓过氧化物酶（MPO）活性、NF-κB p65水平;肠粘膜通透性的测定运用异硫氰酸荧光素（FITC）结合葡聚糖的方法。取1cm回肠组织的进行HE染色,观察对应切片的病理学变化,并进行Chiu’s评分;分析TNF-α、IL-1β、IL-6的含量与NF-κB p65的表达是否存在相关性;分析TNF-α、IL-1β、IL-6、NF-κB p65水平与Chiu’s评分是否存在相关性。此外,还将采用RT-PCR法和Western Blot法测定各组大鼠回肠组织PI3Kp85α和p-AKT（ser473）的m RNA表达以及蛋白水平。结果:1.模型组大鼠血清中MDA水平较阴性对照组明显升高,抗氧化剂SOD、CAT、GSH的含量则显着降低（P<0.01）。与模型组进行比较,丹酚酸B+模型组大鼠血清中的MDA含量显着降低,而抗氧化剂SOD、CAT、GSH的含量则有所升高,差异具有统计学意义（P<0.01）。2.相较于阴性对照组,模型组大鼠回肠组织中MDA的含量明显升高,而抗氧化剂SOD、CAT和GSH均表现出明显下降的趋势,差异具备统计学意义（P<0.01）。与模型组相比,丹酚酸B+模型组大鼠回肠组织中MDA水平大幅下降,而抗氧化剂SOD、CAT和GSH均呈现大幅升高,差异明显（P<0.01）。3.与阴性对照组比较,模型组大鼠回肠组织中的TNF-α、IL-1β、IL-6的含量均大幅增加（P<0.01）。而丹酚酸B+模型组相较于模型组,上述指标含量均明显降低,差异具备统计学意义（P<0.01）。4.与阴性对照组比较,模型组大鼠回肠组织匀浆的MPO和NF-κB p65水平明显升高,差异具有统计学意义（P<0.01）。相较于模型组,丹酚酸B+模型组大鼠的MPO水平和NF-κB p65降低,差异极显着（P<0.01）。5.与阴性对照组比较,模型组大鼠血清中的FITC-葡聚糖含量大幅增加,其粘膜通透性升高。相较于模型组,丹酚酸B+模型组大鼠血浆中的FITC-葡聚糖的含量减少,肠黏膜通透性降低,差异极显着（P<0.01）。6.与阴性对照组比较,模型组中大鼠肠道粘膜受损严重,毛细血管破裂,导致腺体功能受损,并可发现中性粒细胞浸润现象,Chiu’s的评分明显增加（P<0.01）;相较于模型组,丹酚酸B+模型组大鼠肠道黏膜轻微损伤,Chiu’s评分降低,差异极显着（P<0.01）。7.以回肠组织内IL-1β、IL-6、TNF-α含量与NF-κB p65水平的为指标,在大鼠肠缺血再灌注损伤过程中,分析二者的相关性发现呈显着的正相关,对应的相关系数依次为0.932、0.949、0.937（P<0.01）;肠缺血再灌注大鼠回肠组织中的IL-1β、IL-6、TNF-α及NF-κB p65含量与回肠组织的Chui’s评分均呈显着正相关,相关系数分别为0.901、0.884、0.873、0.898（P<0.01）。8.与阴性对照组比较,模型组大鼠回肠组织中PI3Kp85α和p-AKT（ser473）的m RNA表达降低,差异极显着（P<0.01）;对比模型组大鼠,丹酚酸B+模型组回肠组织中的PI3Kp85α和p-AKT（ser473）的m RNA表达明显升高（P<0.01）。9.将模型组大鼠与阴性对照组比较可以发现,模型组大鼠回肠组织中PI3Kp85α和p-AKT（ser473）的蛋白表达明显降低,差异具有统计学意义（P<0.01）;与模型组大鼠进行对比,丹酚酸B+模型组回肠组织中的PI3Kp85α和p-AKT（ser473）的蛋白水平显着升高,差异显着（P<0.01）。结论:1.丹酚酸B能够有效降低缺血再灌注对机体造成的损伤,作用机理涉及抑制氧化反应、改善肠粘膜的通透性和抑制炎症反应。2.丹酚酸B可能通过对NF-κB信号通路的调节,从而发挥其对IL-1β、IL-6、TNF-α表达的抑制作用。3.丹酚酸B可能通过调节PI3K/Akt信号通路,从而减轻、改善肠道缺血再灌注损伤。
曹舒婷[2]（2020）在《AMPK-PINK1/Parkin介导的线粒体自噬在氧化应激仔猪肠屏障修复中的作用及姜黄素的调控机制》文中指出仔猪在断奶过程中肠道发生了显着的氧化应激,这是导致肠屏障损伤的重要原因,如何缓解断奶仔猪氧化应激已成为学术界和产业界共同关注的焦点。能量对肠上皮细胞更新和正常功能的发挥至关重要,而能量产生过程中伴随着线粒体的氧化呼吸链活性氧（ROS）的产生。线粒体作为细胞能量工厂,不仅是活性氧产生的主要场所,而且也是活性氧攻击的重要靶点。为了使细胞免受氧化损伤,细胞形成了 一种精细的自我保护机制,即在功能损伤的线粒体诱发细胞死亡之前选择性降解受损线粒体,被称为线粒体自噬。但是,迄今为止,国内外均未见关于线粒体自噬在氧化应激诱导的仔猪肠屏障损伤修复中的作用及其调控机制方面的研究报道。姜黄素是一种从姜科或天南星科植物根茎中提取的一种天然酚类色素,是一种天然的抗氧化剂。本论文旨在探索仔猪氧化应激中线粒体自噬的作用及姜黄素的调控机制,为仔猪肠屏障损伤修复的营养调控研究提供崭新的思路和方向,具有重要的理论意义和应用价值。1.断奶应激对仔猪肠屏障、氧化平衡、线粒体功能和线粒体自噬的影响本试验研究了断奶后1周内仔猪肠道氧化平衡状态、肠屏障功能、线粒体功能和线粒体自噬水平的变化。选取杜×长×大三元杂交仔猪,分别于断奶后0天、1天、3天、7天屠宰取样,每次6头。氧化平衡状态通过抗氧化酶活性、抗氧化相关基因表达和空肠中丙二醛（MDA）含量进行测定;利用Ussing Chamber和空肠中紧密连接蛋白的表达和分布评估肠道屏障功能;利用线粒体DNA（mtDNA）含量、线粒体氧化磷酸化复合物的活性来表征肠道线粒体功能。通过测定线粒体自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3-Ⅰ（LC3-Ⅰ）、LC3-Ⅱ、PTEN诱导激酶1（PINK1）和Parkin的表达水平,来探究线粒体自噬是否参与调控断奶应激。结果表明:（1）与断奶前相比,断奶后3天和7天超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及GPX-1、GPX-4的表达水平显着降低（P<0.05）,而空肠MDA含量显着提高,且断奶后3天Cu/Zn-SOD和Mn-SOD的表达水平显着降低（P<0.05）。（2）断奶后3、7天,猪空肠上皮细胞跨膜电阻及紧密连接蛋白occludin、claudin-1和zonulaoccludens-1的表达显着降低,而异硫氰酸荧光素葡聚糖4kDa（FD4）通透性显着升高（P<0.05）。（3）断奶后3天和7天,肠道线粒体DNA含量和空肠线粒体复合体（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ）活性显着下降（P<0.05）。（4）断奶后3天和7天,肠道线粒体中线粒体自噬相关蛋白PINK1和Parkin的表达水平显着升高（P<0.05）;断奶后1天、3天和7天空肠中,LC3-II与LC3-I含量的比值也显着增加（P<0.05）。（5）断奶后1天、3天和7天仔猪空肠粘膜中磷酸化AMP依赖的蛋白激酶/AMP依赖的蛋白激酶（pAMPK/AMPK）的表达显着增加（P<0.05）。结果提示,断奶会破坏肠道氧化平衡,损害肠屏障和线粒体功能,引发了线粒体自噬,激活了 AMPK信号通路。2.氧化应激对仔猪肠屏障、线粒体功能及线粒体自噬的影响本试验研究了氧化应激对仔猪肠屏障,线粒体功能和线粒体自噬水平的影响。选用12头35日龄健康杜×长×大断奶仔猪（平均体重为9.6 kg）,随机分成两个组:对照组,氧化应激组。每组6个重复,每个重复1头仔猪。氧化应激组的猪注射10 mg/kgdiquat,对照组的仔猪注射等量的0.9%（w/v）NaCl溶液。结果表明:（1）氧化应激显着降低了仔猪平均日采食量和平均日增重（P<0.05）,显着抑制了空肠中SOD和GSH-Px的活性（P<0.05）,显着提高了空肠MDA含量（P<0.05）。（2）氧化应激显着降低了猪空肠上皮细胞跨膜电阻（TER）与紧密连接蛋白（Claudin-1、occludin、ZO-1）的表达（P<0.05）,显着提高空肠FD4的通透性（P<0.05）。（3）氧化应激导致仔猪空肠线粒体形态发生明显的肿胀、空泡化、基质皱缩明显,线粒体嵴数减少或断裂;Diquat显着提高了肠道线粒体活性氧产量（P<0.05）,显着降低了肠道线粒体膜电位（P<0.05）,这说明了氧化应激导致线粒体功能障碍（P<0.05）。（4）氧化应激显着降低了线粒体生物发生和功能相关的基因,过氧化物酶体增殖物激活的受体-g共激活子-1α（PGC-1α）、哺乳动物沉默信息调节蛋白-1（SIRT-1）、核呼吸因子-1（NRF-1）、线粒体转录因子A（TFAM）、线粒体单链DNA结合蛋白（mtSSB）、线粒体聚合酶r（mtpolr）、葡萄糖激酶（glucokinase）、柠檬酸合酶（CS）、三磷酸腺苷合酶（ATPS）和细胞色素c氧化酶Ⅰ（CcOX Ⅰ）和Ⅴ在空肠中的表达（P<0.05）。（5）氧化应激显着提高了线粒体自噬相关蛋白PINK1和Parkin在肠道线粒体中表达（P<0.05）,并且显着提高了空肠粘膜中LC3-II与LC3-I含量的比值（P<0.05）。（6）氧化应激显着增加pAMPK/AMPK的表达（P<0.05）。结果提示,氧化应激破坏肠道屏障,引起线粒体功能障碍,并触发了线粒体自噬,激活了 AMPK信号通路。3.AMPK-PINK1/Parkin介导的线粒体自噬在氧化应激肠上皮细胞修复中的作用本试验旨在研究H2O2诱导的体外氧化应激模型对肠上皮细胞氧化平衡、肠上皮屏障功能和线粒体能量代谢的影响,明确AMPK-PINK1/Parkin介导的线粒体自噬在氧化应激诱导的仔猪肠屏障损伤修复中的作用。利用H2O2诱导的肠上皮IPEC-J2细胞氧化应激模型,研究H2O2诱导的氧化应激对肠上皮细胞氧化平衡、肠上皮屏障功能、线粒体能量代谢、线粒体自噬和AMPK信号通路的影响及AMPK抑制剂Compound C和线粒体自噬抑制剂Mdivi-1的干预作用。结果表明:（1）与对照组相比,600 μM的H2O2处理显着提高了 p-AMPK的表达水平（P<0.05）。600 μM和800μM的H2O2处理显着提高了 PINK1、Parkin表达水平和LC3Ⅱ/1比例（P<0.05）,说明氧化应激激活了 AMPK信号通路和PINK1-Parkin介导的线粒体自噬。（2）与对照组相比,氧化应激显着降低了肠上皮细胞SOD、CAT活性（P<0.05）,显着提高了 MDA含量（P<0.05）,同时显着降低了抗氧化应激相关基因的表达（P<0.05）。与氧化应激组相比,添加Compound C和Mdivi-1加剧了氧化应激。（3）与对照组相比,氧化应激组显着提高了线粒体活性氧含量（P<0.05）。与氧化应激组相比,CompoundC和Mdivi-1处理提高了线粒体活性氧含量（P<0.05）。（4）与对照组相比,氧化应激显着降低了肠上皮细胞TER和紧密连接蛋白的表达（P<0.05）,显着提高了 FD4通透性（P<0.05）。与氧化应激组相比,Compound C+ H2O2和Mdivi-1+H2O2处理显着降低了肠上皮细胞TER（P<0.05）。（5）与对照组相比,氧化应激显着降低了肠上皮细胞ATP产量、线粒体膜电位和线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的活性（P<0.05）。而与氧化应激组相比,Compound C和Mdivi-1处理加剧了氧化应激诱导的线粒体功能的紊乱。且氧化应激组、Compound C+H2O2 组、Mdivi-1+H2O2 组、Compound C+Mdivi-1+H2O2组均能观察到明显的线粒体肿胀、呼吸嵴断裂及线粒体空泡化的现象。（6）与对照组相比,氧化应激组、Compound C+H2O2组、Mdivi-1+H2O2组、Compound C+Mdivi-1+H2O2组均能观察到细胞整体耗氧量的降低。与氧化应激组相比,Compound C+Mdivi-1+H2O2处理显着降低了细胞的最大呼吸耗氧量和备用呼吸能力（P<0.05）。（7）与对照组相比,H2O2处理显着提高了PINK1、Parkin、Beclin-1的表达量和LC3Ⅱ/Ⅰ表达量的比例（P<0.05）。与氧化应激组相比,Compound C和Mdivi-1处理显着抑制了氧化应激诱导的保护性线粒体自噬反应（P<0.05）。（8）与对照组相比,氧化应激组可以观察到损伤线粒体被双层膜自噬泡包裹的现象。与氧化应激组相比,Compound C+H2O2组中存在较少的线粒体自噬小体。而在Mdivi-1+H2O2组和Compound C+Mdivi-1+H2O2组中几乎未见线粒体自噬小体。（9）为了直接可视化IPEC-J2细胞内线粒体自噬的激活情况,本试验利用了 Ad-GFP-LC3和Ad-HBAD-Mito-dsred来实时监测IPEC-J2细胞中线粒体自噬体的形成。H2O2处理显着增加了 IPEC-J2细胞中两者的共定位,而 Compound C+H2O2 组、Mdivi-1+H2O2 和 Compound C+Mdivi-1+H2O2 组中共定位显着降低。结果提示:H2O2诱导的氧化应激模型会导致肠上皮屏障损伤、线粒体活性氧含量升高、线粒体空泡化和线粒体能量代谢紊乱;H2O2诱导的肠上皮细胞氧化应激会激活AMPK信号通路和PINK1-Parkin介导的线粒体自噬;抑制AMPK信号通路和线粒体自噬加剧了 H2O2诱导的氧化应激、肠屏障损伤和线粒体能量代谢紊乱,明确了 AMPK信号通路和PINK1-Parkin介导的线粒体自噬在氧化应激诱导的肠道损伤中发挥重要的调控作用。4.基于AMPK-PINK1/Parkin通路研究姜黄素缓解氧化应激诱导的肠屏障损伤的机制肠上皮是抵御有害抗原和病原体最关键的屏障。氧化应激与肠屏障功能的障碍密切相关。姜黄素因其抗氧化应激功能而受到广泛关注,然而,姜黄素能否缓解由氧化应激引起的肠道损伤和线粒体损伤尚不清楚。本试验旨在探讨姜黄素是否可以通过保护线粒体功能,提高线粒体自噬水平来缓解氧化应激诱导的仔猪肠屏障损伤,并基于AMPK-PINK1/Parkin通路阐明姜黄素缓解氧化应激诱导的肠屏障损伤的机制。本试验通过腹腔注射diquat建立仔猪氧化应激模型,发现在其日粮中添加姜黄素可以保护肠道屏障功能,改善氧化还原状态,减轻线粒体损伤,触发线粒体自噬并影响AMPK-TFEB信号通路。进一步利用体外氧化应激模型发现姜黄素能够以PINK1-Parkin-线粒体自噬依赖的方式,有效缓解H2O2诱导的IPEC-J2细胞的氧化应激。进一步研究其分子机制,本试验发现干扰Parkin破坏了姜黄素对IPEC-J2的抗氧化应激作用,抑制了姜黄素对H2O2诱导的IPEC-J2细胞的肠屏障和线粒体功能的保护作用。在转染GFP-ParkinΔUBL（编码E3泛素连接酶活性的突变型Parkin蛋白）的细胞中,姜黄素的保护作用被抑制,这表明姜黄素的保护作用需要Parkin的E3泛素连接酶活性。另一方面,本试验还发现干扰PRKAA1后,姜黄素对H2O2处理的IPEC-J2细胞的保护功能减弱。免疫荧光和荧光素酶实验表明,姜黄素显着增强了 H2O2处理的IPEC-J2细胞中TFEB的核转运和转录活性,但是该作用被Compound C所抑制,这表明姜黄素通过AMPK信号通路促进TFEB转录。综上所述,这些结果揭示了姜黄素通过激活AMPK诱导Parkin依赖的线粒体自噬核TFEB核易位,从而改善氧化应激,增强肠屏障功能和线粒体功能。综上所述,断奶会破坏肠道氧化平衡,导致肠道发生氧化应激,断奶和氧化应激均会导致肠道屏障功能的损伤以及线粒体功能紊乱,而且会激活肠道线粒体自噬和AMPK,说明线粒体自噬和AMPK可能参与了断奶应激和氧化应激后肠屏障损伤修复过程。而且在体外氧化应激模型中同时抑制AMPK信号通路和线粒体自噬加剧了 H2O2诱导的氧化应激、肠屏障损伤和线粒体能量代谢紊乱,明确了 AMPK信号通路和线粒体自噬在氧化应激诱导的肠道损伤中发挥重要的调控作用。阐明了姜黄素是通过AMPK-TFEB信号通路调控Parkin的E3泛素连接酶介导的线粒体自噬进而缓解了氧化应激诱导的肠屏障损伤和线粒体功能损伤。
徐延敏[3]（2020）在《氧化应激介导的能量代谢、细胞凋亡和自噬在氨气诱导鸡肝脏损伤中的作用研究》文中研究表明氨气是畜禽舍内危害最大的气体,过量的氨气降低了动物福利,对动物的健康产生了不利效应,严重影响养殖业的发展。鸡对氨气比较敏感,长期在高浓度的氨气环境中生长会导致各种疾病的发生。肝脏是机体内最大的腺体,它在代谢、解毒和免疫中均起着非常重要的作用。然而,目前关于氨气对鸡肝脏组织毒性作用的研究却很少。因此,本研究以肉鸡为研究对象,成功建立氨气中毒模型,通过探究氨气暴露对氧化应激、能量代谢、细胞凋亡和自噬的影响及分子机制,评估氨气对肉鸡肝脏组织的毒性作用。将108只1日龄罗斯308肉鸡随机分成低氨组（对照组）、中氨组和高氨组,并饲养在不同的环境控制舱内。低氨组舱内氨气浓度保持在5 mg/m3以下。中氨组的氨气浓度:1-21日龄为10±0.5 mg/m3;22-42日龄为20±0.5 mg/m3。高氨组的氨气浓度:1-21日龄为15±0.5 mg/m3;22-42日龄为45±0.5mg/m3。三组环境控制控制舱内温度和湿度是一致的。在第14、28和42天时,鸡被安乐死,并快速采集肝脏样品。采用光学显微镜和电子显微镜观察肝脏组织形态学变化,TUNEL分析测定凋亡细胞,试剂盒检测氧化应激指标及ATPase活性变化,实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹试验检测mi RNA表达及能量代谢、细胞凋亡和自噬相关基因的m RNA和蛋白表达。研究结果表明:（1）组织形态学的结果显示过量氨气暴露可引起肉鸡肝脏细胞凋亡和自噬的发生,导致肝脏发生损伤。（2）TUNEL分析的结果显示过量氨气暴露导致凋亡细胞数目增多,细胞凋亡率以剂量依赖方式显着升高。（3）过量氨气暴露引起氧化应激指标（MDA、CAT、SOD、T-AOC和GSH-Px）的显着改变,并且氧化应激指标随着氨气浓度和暴露时间的增加呈剂量和时间依赖性变化,说明过量氨气诱导肝脏发生氧化应激。（4）能量代谢指标的检测结果表明过量氨气显着抑制了肝脏ATPase活性和能量代谢相关基因的表达,并激活了AMPK通路,说明过量的氨气吸入导致细胞能量代谢紊乱,代偿性激活了AMPK以满足细胞能量需求。（5）细胞凋亡指标检测结果进一步从分子水平证实,过量氨气暴露触发了线粒体凋亡信号通路,诱导鸡肝细胞凋亡的发生,并且首次揭示mi R-187-5p通过靶向apaf-1参与了氧化应激介导的线粒体通路细胞凋亡。（6）自噬指标的检测结果从m RNA和蛋白水平进一步证实了过量氨气暴露激活APMK/m TOR/ULK1信号通路,诱导了鸡肝脏组织自噬的发生。综上所述,过量氨气通过破坏鸡肝脏组织氧化与抗氧化之间的平衡导致氧化应激,引发能量代谢紊乱,通过mi R-187-5p靶向apaf-1调控线粒体通路细胞凋亡,激活AMPK/m TOR/ULK1信号通路诱导鸡肝脏细胞自噬,说明过量氨气通过氧化应激介导肝脏细胞凋亡和自噬,进而发挥其毒性作用。
李慧珍[4]（2020）在《猪内脂素重组蛋白的优化及其在断奶仔猪免疫炎症反应中的作用》文中研究表明内脂素（Visfatin）是一种新型脂肪细胞因子,与机体炎症和免疫应答反应密切相关。断奶仔猪免疫应激是影响仔猪生产性能的重要原因之一,其主要的病理变化是炎症反应,但最终导致仔猪生长的受阻,给畜牧业生产造成巨大经济损失。本实验室前期研究表明,在脂多糖（LPS）诱导的断奶仔猪免疫应激动物模型中,脾脏白髓和红髓中的内脂素阳性表达产物显着增多,推测内脂素作为炎性介质可能参与了断奶仔猪免疫应激炎症反应的发生和发展。为了获得大量内毒素含量低、并具有生物活性的猪内脂素重组蛋白,并明确其在断奶仔猪免疫应激反应中的作用。本研究首先利用原核表达,蛋白质纯化,生物活性验证,Western Blot,q RT-PCR和ELISA技术制备猪内脂素重组蛋白。然后在利用LPS诱导成功构建的断奶仔猪免疫应激模型基础上,通过q RT-PCR,ELISA,免疫组织和TUNNEL法研究内脂素在断奶仔猪免疫炎症反应中的作用。具体研究结果如下:1猪内脂素重组蛋白的原核表达及纯化条件优化以猪肝脏组织总RNA为模板,利用PCR技术,扩增猪内脂素基因,转入p EASY-T1载体后,再转化Trans5α。进行质粒提取,并与p ET-28a和p ET-30a同时进行Bam HⅠ和XhoⅠ双酶切;将胶回收得到的Visfatin目的基因片段分别连接到p ET-28a和p ET-30a载体上,转化DH5α,对含有目的基因的表达载体进行克隆;提取重组表达质粒分别转入大肠杆菌Trans BL21和Transetta,经IPTG诱导表达、蛋白经纯化系统AKTAprime10纯化后,采用SDS-PAGE和Western Blot技术进行检测。结果表明,Visfatin-p ET28a-Transetta在16℃诱导16h条件下,能稳定表达出大量高纯度的猪重组内脂素蛋白,为最优表达菌株。2猪内脂素重组蛋白中内毒素去除及检测各国对生物制品的内毒素含量都有严格的要求,为保证生物制品使用的安全性,必须加以去除。本试验选用内毒素去除试剂进行猪内脂素重组蛋白中内毒素的去除,并使用内毒素检测鲎试剂盒检测去除效果。结果表明,去除内毒素后的猪内脂素重组蛋白残余量低于1EU/m L,在安全范围内,防止了其可能对后续试验结果判断产生的影响。3猪内脂素重组蛋白生物活性验证将去除内毒素后的猪内脂素重组蛋白作用于Raw264.7细胞。CCK-8结果显示,随着内脂素浓度的增加,细胞存活率先升高后降低,均高于阴性对照组,当浓度为700 ng/m L时,细胞存活率最高,且差异极显着（p?0.0001）,提示内脂素具有促进Raw264.7细胞存活的作用。随后分别设置PBS组、Visfatin组和Visfatin+Poly.B组,并与细胞共孵育6h。q RT-PCR和ELISA结果显示,与PBS组相比,Visfatin组炎症因子IL-1β、TNF-α和MCP-1的m RNA和蛋白表达水平均差异极显着上调;而Visfatin+Poly.B组与Visfatin组相比,炎症因子的m RNA和蛋白表达水平却均没有明显差异。上述结果表明,猪内脂素重组蛋白促进Raw264.7细胞的炎症活动,而残留的内毒素不起作用,证明猪内脂素重组蛋白具有生物学活性。4猪内脂素重组蛋白对断奶仔猪炎症因子表达的影响利用LPS诱导构建断奶仔猪免疫应激模型,测定每头猪的体重及脾脏重量,并计算脾脏指数（脾脏重量（g）/体重（kg））,结果显示:与PBS组相比,LPS组脾脏重量和脾脏指数明显上升,且均差异极显着（p?0.001）,Visfatin组的则无显着变化;而LPS+Visfatin组脾脏重量和脾脏指数与LPS组的相比,明显降低,且均差异极显着（p?0.01）。采用q RT-PCR和ELISA技术检测各组脾脏组织中炎症因子IL-1β、IL-6和MCP-1表达变化,结果显示,与PBS组相比,Visfatin组IL-1β、IL-6和MCP-1的m RNA和蛋白表达水平均没有明显差异,而LPS组的却均显着升高。与LPS组相比,LPS+Visfatin组IL-1β、IL-6和MCP-1的m RNA和蛋白表达水平均显着降低。以上结果表明:LPS激活脾脏免疫系统,诱使淋巴细胞合成大量的炎性细胞因子,致使脾脏功能亢进肿大,而内脂素能通过下调炎症因子的表达,降低LPS引起的脾脏组织炎性损伤。5猪内脂素重组蛋白对断奶仔猪抗氧化功能的影响采用ELISA检测各组猪外周血清中丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、溶菌酶（LZM）和超氧化物歧化酶（SOD）的表达量变化。结果显示:与PBS组相比,Visfatin组的MDA表达量无显着差异,GSH-Px和SOD均明显升高,而LPS组的MDA的表达量却明显升高,且差异极显着（p?0.01）,但GSH-Px无明显变化,而SOD和LZM均明显升高。LPS+Visfatin组与LPS组相比,MDA的表达量明显降低,且差异显着（p?0.05）,GSH-Px、SOD和LZM均显着升高。结果表明,内脂素通过提升机体的抗氧化功能,降低断奶应激对仔猪造成的氧化损伤;LPS刺激后,机体发生了严重的氧化损伤,外源性注射内脂素降低了血清中MDA的含量,提高SOD、GSH-Px和LZM的酶活性,证明内脂素通过提升断奶仔猪的抗氧化功能降低免疫应激对机体造成的损伤。6猪内脂素重组蛋白对断奶仔猪外周免疫器官细胞增殖和凋亡的影响采用免疫组化、TUNEL技术以及Leica Image Scope软件,研究并统计分析了不同组脾脏和肠系膜淋巴结组织内细胞的增殖和凋亡。免疫组化法检测增殖细胞核抗原（PCNA）结果显示:增殖细胞阳性信号PCNA主要分布于脾脏和肠系膜淋巴结组织内的生发中心;与PBS组相比,Visfatin组脾脏和肠系膜淋巴结组织内PCNA阳性率均显着升高,而LPS组的却均差异极显着降低;与LPS组相比,LPS+Visfatin组脾脏和肠系膜淋巴结组织内PCNA阳性率均明显升高,且差异均极显着（p<0.01）。TUNEL检测结果显示:与PBS组相比,Visfatin组脾脏和肠系膜淋巴结组织内凋亡细胞阳性率均有降低的趋势;与LPS组相比,LPS+Visfatin组脾脏和肠系膜淋巴结组织内凋亡细胞阳性率均差异均极显着降低。此外,利用q RT-PCR技术检测脾脏组织内细胞凋亡的相关基因,结果显示:与PBS组相比,LPS组的FAS和caspase-3表达均明显上调,且差异极显着（p<0.0001）,Visfatin组caspase-3呈下降趋势。而与LPS组相比,LPS+Visfatin组FAS和caspase-3表达则均差异极显着降低。上述结果表明,内脂素通过促进外周免疫器官脾脏和肠系膜淋巴结组织细胞增殖、抑制的细胞凋亡,改善断奶应激仔猪的免疫机能;LPS激活了线粒体凋亡途径,从而抑制了细胞增殖,促使脾脏和肠系膜淋巴结发生凋亡损伤。而外源性注射内脂素通过抑制LPS刺激诱导的外周免疫器官细胞凋亡、促进外周免疫器官细胞增殖、降低FAS和caspase-3的表达,改善机体发生免疫应激时的免疫状况。
滕文彬[5]（2020）在《低氧诱导因子1α在脓毒症肠道上皮损伤中的作用机制研究》文中指出目的:研究低氧诱导因子-1α在脓毒症肠道上皮损伤中的作用及机制。方法:动物部分:建立大鼠脓毒症模型。24只SD大鼠随机分成4组（6只/组）:假手术组、脓毒症组、DMOG（HIF-1α激活剂）组、BAY 87-2243（HIF-1α抑制剂）组。盲肠结扎穿孔模型后24小时后检测:酶联免疫吸附实检测血浆中白介素1β、白介素6、肿瘤坏死因子α、二胺氧化酶、肠型脂肪酸结合蛋白和D-乳酸;生化检测丙二醛、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶;荧光法检测荧光右旋糖苷渗透量;苏木素-伊红染色与丘式评分评估肠道组织损伤;蛋白免疫印迹实验检测肠道组织HIF-1α、ZO-1、Occludin、Claudin-1的表达水平。细胞部分:分8组:Control组、LPS组、DMOG+LPS组、BAY-87-2243+LPS组、Rapamycin（mTOR抑制剂）+LPS组、MHY1485（mTOR激活剂）+LPS组、DMOG+Rapamycin+LPS组、BAY87-2243+MHY1485+LPS组。建立Caco-2单层屏障模型,ERS-2电阻仪测量跨膜电阻,荧光法测量荧光右旋糖苷渗透量,WB检测HIF-1α、ZO-1、Occludin、Claudin-1、p-mTOR及p-P70S6K蛋白的表达。结果:动物部分:与脓毒症组相比,DMOG可明显降低脓毒症大鼠TNF-α、IL-1β、IL-6、DAO、FABP2、D-乳酸、FD-4渗透率及MDA的含量,增加CAT、SOD活性,缓解肠道组织损伤、降低组织病理评分,增加肠道组织HIF-1α及紧密连接蛋白（ZO-1、Occludin、Claudin-1）的表达（P<0.05）。BAY87-2243可明显增加脓毒症大鼠TNF-α、IL-1β、IL-6表达、DAO、FABP2、D-乳酸、FD-4渗透率及MDA的含量,降低CAT、SOD活性,加重肠道组织损伤、增加组织病理评分并降低肠道组织HIF-1α及TJs的表达水平（P<0.05）。细胞部分:与LPS组相比,DMOG明显增加Caco-2单层屏障TEER值并降低FD-4的渗透率,增加Caco-2中HIF-1α、TJs的表达水平（P<0.05）。而BAY87-2243可明显降低TEER值并增加FD-4的渗透率,降低Caco-2中HIF-1α、TJs的表达（P<0.05）。Rapamycin可降低TEER值并增加FD-4的渗透率,降低Caco-2中p-mTOR、p-P70S6K、HIF-1α、TJs的表达（P<0.05）。MHY1485可明显增加TEER值并降低FD-4的渗透率,增加Caco-2中p-mTOR、p-P70S6K的表达水平,未明显增加HIF-1α、TJs的表达水平（P<0.05）。加入DMOG可挽救由Rapamycin引起的效应（P<0.05）,加入BAY87-2243可挽救由MHY1485引起的效应（P<0.05）。结论:HIF-1α可降低脓毒症大鼠的炎症与氧化应激水平,缓解肠道上皮损伤,并受mTOR/P70S6K信号通路的调节。
姚鸿州[6]（2019）在《三种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂对斑马鱼的毒性效应研究》文中提出农药对社会发展的重要性显而易见。近年来杀菌剂,尤其是新型琥珀酸脱氢酶抑制剂（SDHI）类杀菌剂获得快速发展。杀菌剂在长期使用后可能有残留物迁移到水体环境,有必要就其对水生生物的潜在风险进行研究。SDHI类杀菌剂对鱼类具有潜在的毒性,然而关于苯并烯氟菌唑,吡唑萘菌胺和氟唑环菌胺对水生生物的毒性效应和机制的信息还很有限。鉴于此,本文通过应用斑马鱼胚胎和成鱼作为模式生物开展SDHI类杀菌剂苯并烯氟菌唑,吡唑萘菌胺和氟唑环菌胺的水生生物毒性实验,探讨它们对非靶标生物斑马鱼的潜在毒性和作用机制。（1）通过96小时急性暴露试验,揭示这三种杀菌剂导致斑马鱼胚胎产生形态变化,孵化失败和死亡。苯并烯氟菌唑,吡唑萘菌胺和氟唑环菌胺对胚胎孵化抑制的96小时半数效应浓度值分别是0.039,0.21和3.41 mg/L,对胚胎的96小时半数致死浓度值分别是0.041,0.24和3.69 mg/L。（2）通过急性发育毒性试验,揭示苯并烯氟菌唑,吡唑萘菌胺和氟唑环菌胺对斑马鱼胚胎发育的多个方面造成影响。（1）干扰胚胎发育相关基因bmp2b,gh1,ghra和igf1的表达,导致仔鱼体长较短。（2）干扰仔鱼ATP,NO,NOS,CaN,AChE和EPI,影响胚胎的自主运动和仔鱼的自由运动。（3）干扰心脏发育相关基因cyp26a1和myh7的表达,扰乱心跳速率。（4）干扰仔鱼细胞凋亡相关基因apaf1,baxa,bbc3,bcl2a,casp3a,caspb和tp53,诱导细胞凋亡。（5）影响仔鱼中抗氧化标志物CAT,GST,POD和SOD的活性以及GSH含量,引起ROS和MDA含量增加。（6）抑制仔鱼中SDH活性。（7）对仔鱼中T4和T3含量产生干扰。（8）干扰仔鱼先天免疫相关基因ccl34a.4,cxcl18b,ifnphi1,il6,il6r,loxa,nos2a和tnfa的表达。（3）通过对成年斑马鱼的4天急性毒性试验和7天暴露后检测氧化应激相关指示物,探讨这三种杀菌剂急性暴露对成鱼生存和氧化应激的影响。（1）急性暴露影响成鱼的形态和运动,苯并烯氟菌唑,吡唑萘菌胺和氟唑环菌胺对成鱼的96小时半数致死浓度值分别为0.065,0.33和2.60 mg/L。（2）7天毒性暴露影响成鱼中抗氧化标志物CAT,GST,POD和SOD的活性以及GSH的含量,引起MDA含量增加。（4）通过对成年雌性斑马鱼的30天慢性暴露试验,探讨这三种杀菌剂对雌鱼的慢性毒性效应。试验表明苯并烯氟菌唑,吡唑萘菌胺和氟唑环菌胺的30天暴露对成年雌鱼的氧化应激,内分泌,神经系统,能量代谢和肠道组织形态造成影响。（1）影响雌鱼中抗氧化标志物CAT,GST,POD和SOD的活性以及GSH含量,引起MDA含量增加。（2）引起T4含量升高,T3含量下降。（3）导致T,E2含量下降。（4）诱导NO,NOS,CaN和EPI增加,抑制ATP和AChE活性。（5）抑制SDH活性。（6）引起肠道绒毛损伤。综上,SDHI类杀菌剂苯并烯氟菌唑,吡唑萘菌胺和氟唑环菌胺对斑马鱼胚胎和成鱼均表现出毒性。在本文中其毒性主要表现为急性致死、发育抑制、诱导氧化应激、神经毒性、内分泌干扰和肠道损伤等。因此,这类杀菌剂对水生生物的潜在毒性可能通过多种途径表现出来,它们对水生生物的潜在影响值得进行更深入的研究。
刘路[7]（2019）在《电针足三里对脾气虚模型大鼠骨骼肌PGC-1α/SIRT3信号通路影响的实验研究》文中认为目的:本研究采用劳倦过度和饮食不节的复合因素复制脾气虚大鼠模型,通过观察电针足三里对脾气虚大鼠骨骼肌PGC-1α/SIRT3信号通路相关分子表达情况,拟从氧化应激的角度探讨足三里穴对脾气虚证的调控机制,部分阐释“脾主肌肉”的科学内涵。材料与方法:SPF级雄性SD大鼠32只随机分为4组,分别为空白组、脾气虚组、足三里组和非经非穴组,每组8只。所有的大鼠均在SPF级动物实验中心饲养。以劳倦过度和不规则饮食的复合方法建立脾气虚证大鼠的模型。造模成功以后,分别对足三里组及非经非穴组大鼠的双侧“足三里”穴、非经非穴点施以电针刺激,每日1次,每次20min,持续7天;空白组和脾气虚组在操作台上固定20min,不予以其它处理。采用荧光定量PCR法检测大鼠骨骼肌PGC-1α、SIRT3、ERRα及SOD2的mRNA表达水平;采用Western blot检测大鼠大鼠骨骼肌PGC-1α、ERRα、SIRT3及SOD2蛋白表达水平。结果:1.各组大鼠一般状态观察空白组大鼠体格健壮,皮毛光泽,兴奋度高,大便正常;脾气虚组大鼠形体消瘦,进食量减少,体重下降,懒动,皮毛枯槁脱落,大便稀溏;经电针足三里穴治疗后大鼠进食量增加,体重略增加,活动性增加,被毛掉落减少,便溏情况有所好转;非经非穴组大鼠的一般状态较未有明显改善。2.各组大鼠抓力比较造模前各组大鼠抓力比较无统计学差异（P>0.05）;造模后,脾气虚组、足三里组、非经非穴组大鼠同空白组相比,抓力明显下降（P<0.05）;经电针足三里穴干预处理后,同脾气虚组大鼠相比,足三里组大鼠抓力明显上升（P<0.05）,非经非穴组未见显着性差异（P>0.05）。3.各组大鼠骨骼肌组织PGC-1α、ERRα、SIRT3、SOD2的mRNA表达比较与空白组相比,脾气虚组和非经非穴组大鼠骨骼肌组织内PGC-1α、ERRα、SIRT3、SOD2的mRNA表达明显下调（P<0.05）;与脾气虚组相比,足三里组大鼠骨骼肌组织内PGC-1α、ERRα、SIRT3、SOD2表达显着上调（P<0.05）,非经非穴组未见显着性差异（P>0.05）。4.各组大鼠骨骼肌组织PGC-1α、ERRα、SIRT3、SOD2的蛋白表达比较与空白组相比,脾气虚组和非经非穴组大鼠骨骼肌组织内PGC-1α、ERRα、SIRT3、SOD2的蛋白表达明显下调（P<0.05）;与脾气虚组相比,足三里组大鼠骨骼肌组织内PGC-1α、ERRα、SIRT3、SOD2的蛋白表达显着上调（P<0.05）,非经非穴组未见显着性差异（P>0.05）。结论:1.电针“足三里”穴可以调节脾气虚大鼠骨骼肌抗氧化能力,改善脾气虚乏力等症状。2.电针“足三里”穴对脾气虚大鼠骨骼肌的抗氧化能力与PGC-1α/SIRT3信号通路密切相关。
钱峻[8]（2018）在《甘草多糖对萎缩性胃炎胃粘膜细胞的保护作用及其机制研究》文中提出正常情况下,胃粘膜具有强大的屏障功能和可再生的修复能力以应对胃粘膜受到的损伤。引起胃粘膜损伤的常见因素有胃酸过多、幽门螺杆菌感染、饮酒、吸烟以及不当饮食等。反复、持久的胃粘膜损伤会引起胃粘膜毛细血管的广泛损害以及血管通透性的增加,严重时会导致胃溃疡、胃出血、胃穿孔,甚至发展为癌前病变和胃癌,持续的胃粘膜损伤已被证实与胃癌前病变以及胃癌的发生有关。目前对于胃粘膜损伤的治疗方法仍然十分有限,包括使用H2受体阻断剂、质子泵抑制剂以及胃粘膜保护剂等,以上治疗方式对胃粘膜损伤具有一定的疗效,但也存在各自的局限性且停药后易复发。目前已有很多不同的胃粘膜损伤模型被应用于研究,如乙醇诱导的胃粘膜损伤模型、幽门螺杆菌感染模型等。慢性萎缩性胃炎（Chronic atrophic gastritis,CAG）是指胃粘膜上皮在反复持续的损伤刺激下出现固有腺体减少甚至消失、伴或不伴幽门腺化生和肠腺化生的一种慢性胃炎。在慢性幽门螺杆菌感染下CAG可以再进展为肠上皮化生和上皮内瘤变。CAG是胃癌前病变的一种形式,与胃癌的形成密切相关。虽然胃癌发生的具体机制还不明确,但通常认为是从CAG、肠上皮化生以及肠型腺癌多阶段进展而来。CAG每年的癌变率为0.5%～1%,由此带来了严重的公共卫生和社会问题。对于CAG的治疗,尽管已经有一些研究发现了部分具有疗效的药物如叶酸等,但临床上仍然缺乏有效的治疗手段和药物,开发更多更有效的治疗CAG的药物对于降低胃癌发病率以及减轻CAG所带来的社会负担都具有重要的意义。甘草多糖是一种从甘草中提取的活性多糖。甘草多糖含有大量的还原结构,具有很强的还原性,且其生物活性与空间结构相关。目前的研究发现甘草多糖具有免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗炎和抗氧化的作用,但其在CAG病变中是否具有胃粘膜细胞保护及治疗作用还不得而知,本研究将探讨甘草多糖对CAG病变胃粘膜细胞的保护作用及其机制。第一部分:甘草多糖对乙醇诱导的胃粘膜细胞损伤的保护作用的研究目的:探讨甘草多糖对乙醇诱导的胃粘膜细胞损伤的保护作用及相关的机制方法:①体外培养胃粘膜细胞GES-1,用不同浓度的乙醇（0.2M、0.4M、0.6M、0.8M 和 1.0M）和甘草多糖（Glycyrrhiza polysaccharides,GPS）（100μg/ml 和 400μg/ml）处理GES-1细胞并诱导其损伤,分别在诱导后2h、6h和12h采用RTCA技术进行细胞指数（Cell index,CI）检测;②细胞分组和处理:细胞随机分为4组,分别为对照组、乙醇诱导模型组、GPS1+乙醇诱导组以及GPS2+乙醇诱导组,其中乙醇浓度为0.8M,GPS1的浓度为100μg/ml,GPS2的浓度为400μg/ml,乙醇的作用时间为12h,GPS为在乙醇诱导前先处理细胞6h;③CCK-8法检测细胞活力;④流式细胞术检测细胞凋亡情况;⑤western blot和RT-PCR检测Bcl-2、Bax和AKT-Mdm2-p53通路蛋白水平以及mRNA水平的表达;⑥用PI3K抑制剂LY294002处理各组细胞后再检测细胞的活力、凋亡情况以及Bcl-2、Bax和AKT-Mdm2-p53通路蛋白水平以及mRNA水平的表达。结果:①RTCA检测显示:当乙醇浓度≥0.6M时,乙醇诱导组细胞的CI明显下降,即细胞增殖能力下降（P<0.05或P<0.01）;GPS（100μg/ml和400μg/ml）处理组细胞的CI无明显改变,即GPS对正常细胞增殖能力无影响。依据细胞活性结果,0.8M的乙醇被用于细胞损伤的浓度;②CCK-8检测显示:与正常对照组细胞相比,0.8M乙醇处理组细胞活力明显下降（P<0.01）,与乙醇诱导组相比,GPS1+乙醇诱导组和GPS2+乙醇诱导组细胞活力升高（P<0.05）;③凋亡检测显示:与对照组细胞相比,乙醇处理诱导了 GES-1细胞的凋亡（20.56±1.95%vs 2.54±0.24%,P<0.01）,与乙醇诱导组相比,GPS1+乙醇诱导组（12.12±0.24%,P<0.05）和GPS2+乙醇诱导组细胞（7.73±0.74%,P<0.01）凋亡细胞比例下降,即GPS抑制了乙醇诱导的GES-1细胞凋亡;④RT-qPCR和western blot显示:与对照组相比,乙醇促进了 AKT的磷酸化和p53的表达以及抑制了 Mdm2的表达,并降低了 Bcl-2/Bax的比值,GPS处理后逆转了乙醇的诱导作用,且高浓度的GPS的作用优于低浓度的GPS;⑤经PI3K抑制剂LY294002处理后,与乙醇诱导组相比,LY294002+GPS+乙醇诱导组细胞的细胞活力升高,但与无抑制剂组相比,GPS升高细胞活力的作用减弱;同时,LY294002+GPS+乙醇诱导组细胞凋亡数目降低,但与无抑制剂组相比,GPS抑制细胞凋亡的作用减弱;另外,Y294002+GPS+乙醇诱导组Bcl-2/Bax比值升高,但与无抑制剂组相比,GPS促Bcl-2/Bax比值升高的作用也减弱,即LY294002抑制了 GPS升高GES-1细胞活力的能力和GPS抑制GES-1细胞凋亡的能力,同时还抑制了 GPS升高Bcl-2/Bax比值的作用。结论:①乙醇能通过降低胃粘膜细胞活力和诱导胃粘膜细胞凋亡来促使细胞损伤;②GPS可以抑制乙醇诱导的胃粘膜细胞损伤;③GPS是通过调控AKT-Mdm2-p53通路以及提高Bcl-2/Bax的比值来保护胃粘膜细胞的。第二部分:甘草多糖对慢性萎缩性胃炎大鼠胃粘膜的保护作用的研究目的:探讨甘草多糖对慢性萎缩性胃炎大鼠胃粘膜的保护作用及其机制方法:①采用20mM去氧胆酸钠、60%酒精和0.1%氨水综合处理来建立大鼠CAG模型;②将30只重量在200g～220g的SD大鼠分为对照组、CAG模型组和GPS干预组,每组10只大鼠,雌雄各半。其中对照组常规饲养12周,GPS干预组为在CAG模型建立的同时给大鼠灌胃GPS（100mg/100g）,每天一次,持续12周;③12周后取材,开腹取胃,将胃展开置于蓝色背景桌纸上,肉眼观察胃粘膜情况并拍照;④将胃粘膜组织固定于10%中性甲醛液中并进行病理HE染色;⑤免疫组化染色（p-AKT、p53 和 Mdm2）;⑥RT-qPCR 和 western blot 检测胃粘膜组织中 p-AKT、p53、Mdm2、Bcl-2和Bax mRNA水平以及Bcl-2和Bax蛋白水平的表达;⑦采用试剂盒检测胃粘膜组织中SOD、MDA和GSH的含量。结果:①肉眼观察可见对照组大鼠胃粘膜无异常,无溃疡,无出血,而CAG模型组大鼠胃粘膜有出血、溃疡,GPS干预组大鼠胃粘膜有少量出血点,但严重性明显低于CAG模型组;②HE染色显示:与对照组相比,CAG模型组大鼠胃粘膜组织可见腺上皮细胞排列不规则,腺体厚度减少,同时粘膜肌层厚度增加,有炎性细胞浸润,腺体萎缩;GPS组可见腺体细胞排列较规则,腺体萎缩不明显,炎性细胞浸润明显低于CAG组。③免疫组化显示:与对照组相比,CAG模型组大鼠胃粘膜组织中p-AKT、p53表达升高,而Mdm2表达降低;与CAG模型组相比,GPS干预组大鼠胃粘膜组织中p-AKT、p53表达降低,而Mdm2表达升高。④Western blot显示:与对照组相比,CAG模型组胃粘膜组织中Bcl-2表达下降,Bax表达升高,即Bcl-2/Bax比值下降;与CAG模型组相比,GPS干预组中Bcl-2/Bax比值升高。⑤RT-qPCR显示:与对照组相比,CAG模型组中Mdm2和Bcl-2 mRNA表达降低,而p53和Bax mRNA表达升高（P<0.01）;与CAG模型组相比,GPS干预组中Mdm2和Bcl-2 mRNA表达升高,p53和BaxmRNA表达降低（P<0.05）。⑥与对照组相比,CAG模型组胃粘膜组织中 SOD（2.56±0.43μmol/l vs 0.89±0.12μmol/l,P<0.05）和 GSH（11.94±1.32μmol/l vs 5.99±0.68μmol/l,P<0.05）含量降低,而 MDA（1.84±0.26μmol/l vs 3.89±0.44μmol/l,P<0.05）含量升高;与CAG模型组相比,GPS干预组中SOD（1.60±0.18μmol/l）和GSH（8.91±0.78μmol/l）含量升高（P<0.05）,而 MDA（1.99±015μmol/l）含量降低（P<0.05）。结论:①CAG大鼠胃粘膜组织中会出现粘膜腺体厚度减少、粘膜肌层厚度增加、炎性细胞浸润和腺体萎缩的病理改变,而GPS可以抑制这些病理改变,即抑制了 CAG的形成和进展。②CAG大鼠胃粘膜组织中AKT-Mdm2-p53通路发生了改变,而GPS可以调控该途径的改变。③CAG大鼠胃粘膜组织中Bcl-2/Bax比值下降,而GPS可以促进Bcl-2/Bax比值的升高,即抑制了细胞凋亡。④GPS可能通过提高胃粘膜组织中SOD和GSH含量和降低MDA的含量来在CAG大鼠中发挥抗氧化的作用。
柏雪[9]（2018）在《蛋鸡饲粮钒对鸡蛋蛋清质量的影响及机理研究》文中进行了进一步梳理鸡蛋是人类重要的动物蛋白质来源,蛋清也是食品工业和生物医药行业的常用原料。钒（V）是动物的必需微量元素之一,但研究表明过量的钒会导致鸡蛋蛋清哈弗单位（HU）显着降低,这是否导致蛋清的加工特性改变,蛋清质量变差是否与其蛋白质组成改变有关尚不清楚;钒导致蛋清质量变差的机理尚不清楚,有待进一步研究。基于此,本文通过五个试验,开展蛋鸡饲料中钒污染的风险评估,研究蛋鸡饲粮钒对鸡蛋蛋清质量和加工特性的影响及与蛋清蛋白质组成的关系,分析钒对蛋鸡输卵管膨大部的氧化损伤和细胞凋亡等的影响,探索抗氧化剂（茶多酚）对钒不利效应的缓解作用,验证并揭示钒降低蛋清质量的机理,意在为人类食品安全特别是重金属钒的安全剂量和控制提供理论依据,探索缓解钒毒性的科学方法,对保证畜牧业的健康发展有重要意义。主要研究内容及结果如下:试验一:蛋鸡常用能量和蛋白质饲料中钒含量研究本试验目的为调查蛋鸡常用饲料的钒含量,分析钒的安全隐患。试验采集四川省内各大饲料企业和蛋鸡养殖场应用的主要蛋鸡饲料原料129份,包括玉米（20份）、小麦（10份）、麦麸（11份）、米糠（6份）;蛋白质饲料:豆粕（20份）、DDGS（12份）、玉米胚芽粕（8份）、喷浆玉米皮（9份）、菜粕（11份）、玉米蛋白粉（9份）和棉粕（13份）,利用ICP-MS/MS分析其钒含量。结果表明蛋鸡常用能量饲料中小麦的钒含量最高,为0.025.40 mg/kg,其次是麦麸01.10 mg/kg、米糠0.070.52 mg/kg和玉米00.68 mg/kg。蛋白质饲料中,玉米胚芽粕、DDGS和菜粕的钒含量较高,分别为0.175.80 mg/kg、05.00mg/kg和0.114.60 mg/kg;其次是喷浆玉米皮03.60 mg/kg,豆粕01.60 mg/kg和棉粕00.80 mg/kg。能量饲料和蛋白质饲料原料引入的钒约占蛋鸡配合饲料钒总含量一半左右。试验二:蛋鸡饲粮钒水平对鸡蛋蛋清质量的影响本试验目的为研究饲粮中不同水平的钒对鸡蛋蛋清高度和蛋清加工特性的影响。试验分为4个处理组,分别在基础饲粮中添加4个钒水平（V:0、5、10和15 mg/kg）,每个处理30个重复,每个重复1只鸡,共计120只67周龄罗曼粉壳蛋鸡。试验期为35d,分别在试验7 d、21 d和35 d采集各处理全部鸡蛋,测定蛋清中钒残留、HU和加工特性。结果表明:（1）饲粮中添加钒会导致蛋清中钒含量显着增加（0、5、10和15 mg/kg钒处理组残留量分别为14.44、36.84、31.65和26.48μg/kg,P<0.01）,但各处理之间差异不显着（P>0.05）;（2）饲粮中添加V 515 mg/kg造成蛋清HU显着下降（P<0.05）,10 mg/kg和15 mg/kg处理组显着低于5 mg/kg组,但V 10 mg/kg和15 mg/kg剂量之间无显着差异（P>0.05）;（3）饲粮钒显着降低蛋清凝胶的硬度、黏性和咀嚼性（线性,P=0.01,P<0.01,P=0.01）,降低蛋清凝胶凝聚性（二次回归,P<0.05）。对蛋清凝胶的保水性和弹性无显着影响（P>0.05）。（4）饲粮钒对蛋清的起泡性和泡沫稳定性无显着影响（P>0.05）。综上所述,饲粮中添加V 515 mg/kg造成鸡蛋蛋清质量显着下降,但10 mg/kg和15 mg/kg剂量之间无显着差异。试验三:蛋鸡饲粮钒对鸡蛋蛋清蛋白质组的影响本试验目的为研究饲粮钒对蛋清蛋白质组成的影响。试验分为3个处理组,分别在基础饲粮中添加3个钒水平（0、5和10 mg/kg）,每个处理30个重复,每个重复1只鸡,共计90只67周龄的罗曼粉壳蛋鸡,试验期为35 d。在试验35 d每个处理随机采集24枚鸡蛋,采用iTRAQ方法测定蛋清的蛋白质组学。结果表明:（1）蛋清中总共分离出379种蛋白质,153种蛋白质被成功鉴定;（2）钒导致蛋清中的固有蛋白蛋清溶菌酶（Q6LEL2）表达量显着下降（P<0.05）,卵固蛋白前体（F1NU63）和卵清蛋白（P01012）2种蛋白质的表达量显着上升（P<0.05）;（3）饲粮钒导致蛋清中来源于输卵管细胞的蛋白F1NWD0（p63家族蛋白）、信号传导抑制蛋白WD重复蛋白2（E1C7S9）等6种蛋白质表达量显着下降;胞浆肌动蛋白1（P60706）、Beta-2微球蛋白（P21611）、簇蛋白（Q9YGP0）、高尔基体蛋白1（Q02391）等11种蛋白表达量显着上升（P<0.05）;（4）饲粮中的钒导致蛋清中来源于血液带入的蛋白质中的卵黄蛋白原-2（P02845）和血清白蛋白（P19121）等6种蛋白质表达量显着下降（P<0.05）,核黄素结合蛋白（P02752）和血清溶菌酶（B8YJT7）等10种蛋白质显着上升（P<0.05）;（5）除簇蛋白、钙黏蛋白同型物X1、F1P0Z6和血清溶菌酶外,钒对蛋清中差异蛋白质表达量的影响程度随饲粮钒水平增加而提高。综上,饲粮钒改变了蛋清固有蛋白质组成,增加了来源于输卵管细胞脱落和血液渗透带入的蛋白数量。试验四:钒对蛋鸡输卵管膨大部氧化应激与细胞凋亡的影响本试验的目的为研究钒影响鸡蛋蛋清质量的机理。试验分为3个处理组,分别在基础饲粮中添加3个钒水平（0、5和10 mg/kg）,每个处理30个重复,每个重复1只鸡,共计90只67周龄的罗曼粉壳蛋鸡,试验期为35 d。在试验35 d时,每个处理屠宰随机屠宰6只鸡,立即取输卵管膨大部测定其钒含量、氧化指标、细胞凋亡、病理损伤及卵清蛋白基因OVAL和p53、Bax、Bcl-2、LATS1、LATS2基因的mRNA和蛋白质表达量。结果表明:（1）饲粮钒能够在蛋鸡输卵管膨大部残留,造成输卵管膨大部中GSH-PX活力和T-AOC显着降低（P=0.01,P=0.02）,MDA的含量显着升高（P=0.01）,对CAT和T-SOD的酶活力无显着影响（P>0.05）。（2）饲粮钒能够导致输卵管膨大部腺泡上皮细胞变性、炎性细胞浸润和腺泡腺扩张,细胞凋亡率显着上升（P<0.01）。（3）饲粮钒导致输卵管膨大部卵清蛋白基因OVAL的mRNA表达量显着上升（P<0.05）。（4）饲粮钒对蛋鸡输卵管膨大部p53的mRNA和蛋白质表达量无显着影响（P>0.05）;钒显着降低了输卵管膨大部中Bcl-2的mRNA表达量（P<0.05）,但对其蛋白质表达量无显着影响（P>0.05）;钒对Bax的mRNA和蛋白质表达量都无显着影响（P>0.05）,但可以显着提高Bax/Bcl-2的蛋白质表达量比值（P<0.05）。（5）饲粮钒导致输卵管膨大部中LATS1基因的mRNA表达量显着高于对照组（P<0.05）,蛋白质表达量差异不显着（P>0.05）;LATS2的mRNA表达量有提高趋势（P=0.08）,蛋白质表达量差异不显着（P>0.05）。综上,蛋鸡饲粮钒残留在输卵管膨大部,导致氧化损伤,增加细胞凋亡,进而影响输卵管膨大部蛋白质分泌功能,增加输卵管细胞脱落和血液渗透入蛋清中的蛋白质数量,从而引起蛋清蛋白质组成改变。试验五:蛋鸡饲粮添加茶多酚缓解钒对鸡蛋蛋清质量的影响研究本试验目的为研究茶多酚对钒造成的输卵管膨大部氧化应激、蛋清质量和蛋清蛋白质组学变化的缓解效应。试验按照2×2试验设计,设2个钒水平（0和5 mg/kg）和2个茶多酚水平（0和600 mg/kg）,共计4个处理组,每个处理30个重复,每个重复1只鸡。共计120只67周龄的罗曼蛋鸡,试验期为35 d。结果表明:（1）蛋鸡饲粮中同时添加钒和添加茶多酚能够减少钒在蛋清中的残留,使其与对照组无显着差异（P>0.05）;蛋鸡输卵管膨大部中残留量也随茶多酚的添加而降低,但仍然高于对照组（P<0.05）。（2）在含5 mg/kg钒的饲粮中额外添加600 mg/kg茶多酚能够缓解钒造成的蛋清HU下降,蛋清凝胶硬度、黏性和咀嚼性下降,使其与对照组差异不显着（P>0.05）。蛋清凝胶的弹性、回复性和凝聚性,蛋清蛋白质的起泡性和泡沫稳定性各处理间无显着差异（P=0.37,P=0.73,P=0.06）。（3）在蛋鸡饲粮中同时添加茶多酚和钒与单独添加钒相比,蛋清中24个蛋白质表达发生改变,14个上调,14个下调,其中蛋清固有蛋白卵转铁蛋白（P02789）和卵清蛋白相关蛋白X（片段）（P01013）含量显着下降（P<0.05）,卵清蛋白相关蛋白Y（I0J179）含量显着上升（P<0.05）。同时添加茶多酚和钒与单独添加钒相比得到的蛋清差异蛋白质,和单独添加钒与对照组比较得到的差异蛋白质中有9个蛋白质重叠。单独添加茶多酚使蛋清中21个蛋白质表达发生改变,8个上调,13个下调。GO和KEGG分析显示p53和MAPK可能是茶多酚作用的信号通路。（4）钒导致蛋鸡输卵管膨大部粘膜组织中CAT和GSH-PX酶活力显着下降（P<0.01）,MDA含量显着上升（P<0.01）;在加钒饲粮中添加茶多酚以后CAT、GSH-PX和T-AOC的酶活力,MDA的含量都恢复到对照组水平（P>0.05）。（5）600 mg/kg的茶多酚能够一定程度上缓解5 mg/kg钒对蛋鸡输卵管病理损伤和细胞凋亡,但不能使其恢复到对照水平（P>0.05）。结论:蛋鸡饲粮添加钒515 mg/kg降低鸡蛋蛋清高度和凝胶加工特性,这与钒导致蛋清蛋白质组学改变有关。钒导致蛋清中固有蛋白质、来源于输卵管细胞和血液的蛋白质含量改变,其机理可能是饲粮钒随血液循环到达蛋鸡输卵管膨大部,导致膨大部氧化损伤,细胞凋亡上升,从而导致输卵管膨大部上皮细胞分泌功能受损,输卵管膨大部脱落和血液渗透入蛋清中的蛋白质含量改变。添加茶多酚可发挥抗氧化作用,缓解钒对蛋清质量的不利影响。
张杰[10]（2017）在《叶黄素对LPS应激黄羽肉鸡生长性能、抗氧化及免疫功能的影响》文中进行了进一步梳理本试验旨在研究叶黄素对脂多糖应激肉鸡生长性能、抗氧化及免疫功能的影响。试验一:本试验旨在建立肉鸡免疫应激模型。选取140只1日龄健康黄羽肉公鸡,随机分为2个处理,每个处理7个重复,每个重复10只公鸡。在肉鸡21、23、25、27日龄时,试验组肉鸡腹腔注射1mg/kg BW LPS,对照组注射等量的生理盐水。在每次注射24h后,每个处理组称重,选取接近本处理平均体重的肉鸡采血、屠宰、取样。试验为期28天。结果表明:生长性能:第2次LPS注射以后,LPS显着降低了肉鸡的ADFI、ADG和BWG（P<0.05）,同时第3次LPS注射对肉鸡的F/G有显着的影响（P<0.05）。抗氧化功能:第1次LPS注射显着降低了血清SOD活性（P<0.05）;第2次LPS注射显着降低了血清CAT活性（P<0.05）;第3次LPS注射显着降低了血清、空肠粘膜和肝脏SOD,血清和空肠粘膜CAT,血清、空肠粘膜和肝脏GSH-Px活性,空肠粘膜和肝脏SOD、CAT、GSH-Px表达,以及血清和空肠粘膜GSH/GSSG比值（P<0.05）,而显着增加了血清和肝脏MDA含量（P<0.05）;第4次LPS注射显着降低了肝脏SOD、血清和空肠粘膜CAT、空肠粘膜和肝脏GSH-Px活性,空肠粘膜CAT、GSH-Px的表达,以及空肠粘膜GSH/GSSG 比值（P<0.05）,而显着增加了血清和肝脏MDA含量（P<0.05）。免疫功能:第1次LPS注射显着增加了空肠粘膜IL-6含量（P<0.05）;第2次LPS注射显着增加了空肠粘膜和肝脏IL-1β含量P<0.05);第3次LPS注射显着增加了空肠粘膜和肝脏IL-1β、空肠粘膜IL-6、空肠粘膜和肝脏IFN-γ含量及空肠粘膜和肝脏IL-1β、IL-6、IFN-γ的表达（P<0.05）,而使胸腺指数和法氏囊指数显着下降（P<0.05）;第4次LPS注射显着增加了肝脏IFN-γ含量（P<0.05）,而使脾脏指数显着下降（P<0.05）。TLR4/MyD88信号通路mRNA表达:第3次LPS注射显着提高了空肠粘膜和肝脏TLR4、MyD88的表达（P<0.05）。试验二:在第一部分研究结果的基础上,本试验旨在研究叶黄素和LPS应激对肉鸡生长性能、抗氧化及免疫功能的影响,并探讨日粮叶黄素的作用机制。试验采用2 × 2双因素试验设计。选取240只1日龄健康黄羽肉公鸡,分为4个处理,每个处理6个重复,每个重复10只公鸡,分别饲喂基础日粮和添加40 mg/kg的叶黄素日粮。在肉鸡21、23、25日龄时,试验组肉鸡腹腔注射1 mg/kg BWLPS,对照组注射等量的生理盐水。在最后一次注射24h后,每个处理组称重,选取接近本处理平均体重的肉鸡采血、屠宰、取样。试验为期26天。结果表明:生长性能:LPS应激显着降低了肉鸡的ADFI、ADG和BWG（P<0.05）。日粮添加叶黄素部分缓解了由于LPS应激造成的肉鸡ADG和 BWG 的下降（0.05<P<0.1）。抗氧化功能:LPS应激显着降低了血清、空肠粘膜和肝脏SOD,血清和空肠粘膜CAT,空肠粘膜和肝脏GSH-Px活性,肝脏SOD、空肠粘膜和肝脏CAT、GSH-Px表达,以及血清和肝脏GSH/GSSG 比值（P<0.05）,而显着增加了血清、空肠粘膜和肝脏MDA含量（P<0.05）。另外LPS应激对血清GSH-Px活性、空肠粘膜SOD表达和GSH/GSSG 比值有降低的趋势（0.05<P<0.1）。日粮添加叶黄素显着提高了血清和空肠粘膜SOD、血清CAT、血清和肝脏GSH-Px活性,空肠粘膜CAT、GSH-Px的表达,以及血清GSH/GSSG 比值（P<0.05）,而显着降低了空肠粘膜MDA含量（P<0.05）。另外日粮添加叶黄素部分缓解了由于LPS应激引起的空肠粘膜SOD表达和GSH-Px活性的降低（0.05<P<0.1）,部分抑制了血清MDA含量的升高（0.05<P<0.1）。免疫功能:LPS应激显着增加了空肠粘膜和肝脏IL-1β、肝脏IFN-γ含量及空肠粘膜和肝脏IL-1β、空肠粘膜IL-6的表达（P<0.05）,对空肠粘膜IL-6含量和肝脏IL-6表达有增加的趋势（0.05<P<0.1）。另外LPS应激显着降低了肉鸡的胸腺指数（P<0.05）,对脾脏指数和法氏囊指数有降低的趋势（0.05<P<0.1）。日粮添加叶黄素显着降低了空肠粘膜和肝脏IL-1β、空肠粘膜IL-6含量及空肠粘膜和肝脏IL-1β、IL-6表达（P<0.05）,并且部分缓解了由于LPS应激引起的胸腺指数的下降（0.05<P<0.1）。TLR4/MyD88信号通路mRNA表达:LPS应激显着提高了空肠粘膜和肝脏TLR4、MyD88的表达（P<0.05）。日粮添加叶黄素显着降低了空肠粘膜TLR4、MyD88的表达（P<0.05）。综上所述,三次注射1 mg/kg BW LPS建立了肉鸡的免疫应激模型。日粮添加叶黄素有效缓解了由于LPS应激诱导的免疫应激,提高了肉鸡的抗氧化功能,维持了肉鸡的生长性能,其机制可能与叶黄素抑制TLR4/MyD88信号通路的激活有关。
二、应激时大鼠胃粘膜中MDA含量和CAT、Ca~(2+)-ATPase活性的变化（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、应激时大鼠胃粘膜中MDA含量和CAT、Ca~(2+)-ATPase活性的变化（论文提纲范文）
（1）丹酚酸B预处理对大鼠小肠缺血再灌注损伤的保护作用研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 第一章 引言 |
| 1.1 缺血再灌注损伤研究概况 |
| 1.1.1 肠缺血再灌注损伤的概念 |
| 1.1.2 肠缺血再灌注损伤的发病机制 |
| 1.1.3 中医药治疗肠缺血再灌注损伤 |
| 1.1.4 西药治疗肠缺血再灌注损伤 |
| 1.2 丹参抗缺血再灌注损伤的研究概况 |
| 1.2.1 化学成分研究 |
| 1.2.2 药理作用研究 |
| 1.3 丹酚酸B的研究概况 |
| 1.3.1 丹酚酸B对心脏的药理作用 |
| 1.3.2 丹酚酸B对大脑的药理作用 |
| 1.3.3 对肝、肾的作用 |
| 1.3.4 抗癌 |
| 1.3.5 其他 |
| 1.4 立题依据 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 仪器与试剂 |
| 2.2.1 主要仪器 |
| 2.2.2 主要试剂 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 动物分组及给药 |
| 2.3.2 大鼠肠缺血再灌注损伤模型的建立 |
| 2.3.3 标本收集与处理 |
| 2.3.4 血清MDA、SOD、CAT、GSH的测定 |
| 2.3.5 回肠组织MDA、SOD、CAT、GSH的测定 |
| 2.3.6 回肠组织MPO活力和促炎细胞因子的测定 |
| 2.3.7 肠通透性测定 |
| 2.3.8 小肠HE染色 |
| 2.3.9 RT-PCR测定回肠组织PI3Kp85α和 p-AKT(ser473)m RNA的表达 |
| 2.3.10 Western Blot法检测回肠组织PI3Kp85α和 p-AKT(ser473)的蛋白水平 |
| 2.4 统计学分析 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 丹酚酸B预处理对肠缺血再灌注大鼠血清抗氧化剂和脂质过氧化产物活性的影响 |
| 3.2 丹酚酸B预处理对肠缺血再灌注大鼠回肠抗氧化剂和脂质过氧化产物活性的影响 |
| 3.3 丹酚酸B预处理对回肠组织髓过氧化物酶(MPO)活力的影响 |
| 3.4 丹酚酸B预处理对回肠组织促炎细胞因子的影响 |
| 3.5 丹酚酸B预处理对肠通透性的影响 |
| 3.6 丹酚酸B预处理对回肠病理组织学变化的影响 |
| 3.7 IL-1β、IL-6、TNF-α与 NF-p65 的相关性研究 |
| 3.8 丹酚酸B预处理对回肠组织中PI3Kp85α、p-Akt(ser473)m RNA表达的影响 |
| 3.9 丹酚酸B预处理对回肠组织中PI3Kp85α、p-Akt(ser473)蛋白水平的影响 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 肠道缺血再灌注模型的建立 |
| 4.2 肠缺血再灌注损伤与氧化应激 |
| 4.3 肠缺血再灌注损伤与炎症反应 |
| 4.4 肠缺血再灌注与肠道黏膜损伤 |
| 4.5 肠缺血再灌注损伤与NF-κB通路 |
| 4.6 肠缺血再灌注损伤与PI3K/Akt通路 |
| 4.7 创新与不足 |
| 第五章 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 综述 丹酚酸 B 药理作用研究进展 |
| 参考文献 |
（2）AMPK-PINK1/Parkin介导的线粒体自噬在氧化应激仔猪肠屏障修复中的作用及姜黄素的调控机制（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 缩略词表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1. 仔猪断奶应激 |
| 1.1 断奶仔猪肠屏障功能 |
| 1.2 断奶仔猪肠道氧化状态 |
| 2. 氧化应激 |
| 2.1 氧化应激的定义 |
| 2.2 活性氧 |
| 2.3 抗氧化防御系统 |
| 2.4 氧化应激对肠屏障功能的影响 |
| 3. 线粒体与氧化应激 |
| 3.1 线粒体与活性氧 |
| 3.2 线粒体ROS清除系统 |
| 3.3 线粒体能量代谢 |
| 3.4 线粒体生物发生 |
| 4. 线粒体自噬 |
| 4.1 PINK/Parkin介导的线粒体自噬 |
| 4.2 BNIP3/Nix介导的线粒体自噬 |
| 4.3 FUNDC介导的线粒体自噬 |
| 5. 姜黄素 |
| 5.1 姜黄素的概述 |
| 5.2 姜黄素的理化性质 |
| 5.3 姜黄素的抗氧化功能 |
| 5.4 姜黄素的抗氧化机制研究 |
| 5.5 姜黄素对肠道屏障功能的影响 |
| 6. 研究目的、意义和主要内容 |
| 6.1 研究目的与意义 |
| 6.2 主要研究内容 |
| 第二章 断奶应激对仔猪肠屏障、氧化平衡、线粒体功能和线粒体自噬的影响 |
| 1. 引言 |
| 2. 材料与方法 |
| 3. 试验结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 小结 |
| 第三章 氧化应激对仔猪肠屏障、线粒体功能及线粒体自噬的影响 |
| 1. 引言 |
| 2. 材料和方法 |
| 3. 试验结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 小结 |
| 第四章 AMPK-PINK1/PARKIN介导的线粒体自噬在氧化应激肠上皮细胞修复中的作用 |
| 1. 引言 |
| 2. 材料和方法 |
| 3. 试验结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 小结 |
| 第五章 基于AMPK-PINK1/PARKIN通路研究姜黄素缓解氧化应激诱导的肠屏障损伤的机制 |
| 1. 引言 |
| 2. 材料和方法 |
| 3. 试验结果 |
| 4. 讨论 |
| 5. 小结 |
| 第六章 结论、创新点及研究展望 |
| 1. 结论 |
| 2. 创新点 |
| 3. 研究展望 |
| 参考文献 |
| 个人简历 |
（3）氧化应激介导的能量代谢、细胞凋亡和自噬在氨气诱导鸡肝脏损伤中的作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 前言 |
| 1.1 氨气毒性的研究进展 |
| 1.1.1 氨气的来源 |
| 1.1.2 氨气的危害 |
| 1.2 氧化应激与细胞凋亡 |
| 1.2.1 氧化应激 |
| 1.2.2 细胞凋亡 |
| 1.2.3 氧化应激与细胞凋亡的关系 |
| 1.3 能量代谢与自噬 |
| 1.3.1 能量代谢 |
| 1.3.2 自噬 |
| 1.3.3 能量代谢与自噬的关系 |
| 1.4 细胞凋亡与自噬的相互关系 |
| 1.5 研究目的与意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验仪器和试剂 |
| 2.1.1 主要试验仪器 |
| 2.1.2 主要试验试剂 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 试验动物分组与样品采集 |
| 2.2.2 显微结构观察 |
| 2.2.3 超微结构观察 |
| 2.2.4 TUNEL法检测细胞凋亡 |
| 2.2.5 氧化应激指标检测 |
| 2.2.6 ATPase活性检测 |
| 2.2.7 q RT-PCR |
| 2.2.8 Western blot |
| 2.3 数据统计与分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 鸡肝脏组织形态学变化 |
| 3.1.1 鸡肝脏组织显微结构变化 |
| 3.1.2 鸡肝脏组织超微结构变化 |
| 3.1.3 鸡肝脏细胞凋亡检测结果 |
| 3.2 氧化应激指标检测结果 |
| 3.3 ATPase活性检测结果 |
| 3.4 能量代谢相关基因的表达结果 |
| 3.4.1 能量代谢相关基因的mRNA表达 |
| 3.4.2 能量代谢相关基因的蛋白表达 |
| 3.5 mi R-187-5p和 apaf-1 的表达及相关性分析 |
| 3.5.1 mi R-187-5p和 apaf-1 的表达 |
| 3.5.2 mi R-187-5p和 apaf-1 的相关性分析 |
| 3.6 细胞凋亡相关基因的表达结果 |
| 3.6.1 细胞凋亡相关基因的mRNA表达 |
| 3.6.2 细胞凋亡相关基因的蛋白表达 |
| 3.7 自噬相关基因的表达结果 |
| 3.7.1 自噬相关基因的mRNA表达 |
| 3.7.2 自噬相关基因的蛋白表达 |
| 4 讨论 |
| 4.1 氨气鸡肝脏组织形态学的影响 |
| 4.2 氨气诱导鸡肝脏组织氧化应激 |
| 4.3 氨气通过线粒体通路诱导细胞凋亡 |
| 4.4 氨气诱导鸡肝脏组织能量代谢紊乱 |
| 4.5 氨气通过AMPK/m TOR/ULK1 通路诱导鸡肝脏组织自噬 |
| 5 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
（4）猪内脂素重组蛋白的优化及其在断奶仔猪免疫炎症反应中的作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语表 |
| 1 前言 |
| 1.1 立题背景 |
| 1.2 文献综述 |
| 1.2.1 内脂素的研究进展 |
| 1.2.1.1 内脂素的起源和分子结构特征 |
| 1.2.1.2 内脂素的分布情况 |
| 1.2.1.3 内脂素对炎症反应的影响 |
| 1.2.1.4 内脂素对细胞增殖和凋亡的影响 |
| 1.2.2 免疫应激的研究进展 |
| 1.2.2.1 免疫应激的作用机制 |
| 1.2.2.2 免疫应激模型的构建 |
| 1.2.2.3 免疫应激对机体的影响 |
| 1.2.3 LPS诱发免疫应激的作用机制 |
| 1.2.4 内脂素与免疫应激之间的关系 |
| 1.3 研究目的和意义 |
| 第一部分 猪内脂素重组蛋白表达的优化及生物活性验证 |
| 1 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.1.2 主要仪器与试剂 |
| 1.1.3 主要溶液配制 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 Visfatin基因的扩增 |
| 1.2.2 Visfatin基因克隆菌株的构建 |
| 1.2.3 重组表达质粒的构建 |
| 1.2.4 猪内脂素重组蛋白的表达、纯化与鉴定 |
| 1.2.5 猪内脂素重组蛋白中内毒素的去除 |
| 1.2.6 猪内脂素重组蛋白生物活性验证 |
| 1.2.7 猪内脂素重组蛋白多克隆抗体的制备和验证 |
| 2 结果 |
| 2.1 猪Visfatin基因的扩增 |
| 2.1.1 |
| 2.1.2 核酸序列分析 |
| 2.1.3 氨基酸序列分析 |
| 2.1.4 重组表达质粒的构建 |
| 2.2 猪内脂素重组蛋白表达条件的优化 |
| 2.2.1 猪内脂素重组蛋白小量表达条件优化 |
| 2.2.2 猪内脂素重组蛋白的大量表达 |
| 2.3 猪内脂素重组蛋白的内毒素去除效果检测 |
| 2.4 猪内脂素重组蛋白生物活性验证 |
| 2.4.1 猪内脂素重组蛋白对Raw264.7细胞活力的影响 |
| 2.4.2 qRT-PCR和 ELISA法检测炎症因子 |
| 2.5 猪内脂素重组蛋白多克隆抗体的验证 |
| 3 讨论 |
| 3.1 猪内脂素重组蛋白的原核表达 |
| 3.2 猪内脂素重组蛋白纯化条件的优化 |
| 3.3 猪内脂素重组蛋白内毒素的去除及活性验证 |
| 4 结论 |
| 第二部分 猪内脂素重组蛋白在断奶仔猪免疫炎症反应中的作用 |
| 1 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.1.1 试验动物及处理 |
| 1.1.2 主要仪器与设备 |
| 1.1.3 主要试剂 |
| 1.1.4 主要试剂的配制 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 样品采集和处理 |
| 1.2.2 脾脏指数测定 |
| 1.2.3 不同处理组脾内炎性细胞因子检测 |
| 1.2.4 抗氧化指标检测 |
| 1.2.5 石蜡切片的制作 |
| 1.2.6 免疫组化 |
| 1.2.7 细胞凋亡检测(TUNNEL法) |
| 1.2.8 细胞凋亡因子检测 |
| 2 结果 |
| 2.1 LPS组猪临床表征和病理变化 |
| 2.2 不同处理组猪脾脏指标的变化 |
| 2.3 脾脏内炎症因子表达的变化 |
| 2.4 内脂素对断奶仔猪抗氧化功能的影响 |
| 2.5 内脂素对断奶仔猪外周免疫器官细胞增殖的影响 |
| 2.5.1 内脂素对脾脏内细胞增殖的影响 |
| 2.5.2 内脂素对肠系膜淋巴结内细胞增殖的影响 |
| 2.6 内脂素对断奶仔猪外周免疫器官细胞凋亡的影响 |
| 2.6.1 内脂素对脾脏内细胞凋亡的影响 |
| 2.6.2 内脂素对肠系膜淋巴结内细胞凋亡的影响 |
| 2.6.3 内脂素对脾内凋亡因子的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 内脂素对断奶仔猪免疫应激脾脏损伤的影响 |
| 3.2 内脂素对断奶仔猪免疫应激抗氧化功能的影响 |
| 3.3 内脂素对断奶仔脾脏和肠系膜淋巴结内细胞增殖和凋亡的影响 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 附录1 个人简介 |
| 附录2 论文发表情况 |
| 致谢 |
（5）低氧诱导因子1α在脓毒症肠道上皮损伤中的作用机制研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 中英文缩略词表 |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 研究对象 |
| 2.2 实验材料和仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.4 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 HIF-1α在脓毒症大鼠肠道表达增加 |
| 3.2 HIF-1α缓解脓毒症大鼠肠道上皮损伤 |
| 3.3 激活剂和抑制剂的有效剂量确认实验 |
| 3.4 HIF-1α缓解LPS诱导的Caco-2 肠道上皮损伤 |
| 3.5 mTOR/P70S6K通路在LPS诱导Caco-2 细胞中对HIF-1α的调节作用 |
| 3.6 HIF-1α在 LPS诱导Caco-2 细胞中受mTOR/P70S6K通路的调节 |
| 4 讨论 |
| 5 本研究的局限性和研究前景 |
| 6 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 低氧诱导因子的调控途径以及在肠道疾病中的作用 |
| 参考文献 |
| 作者简历及在学期间所取得的科研成果 |
（6）三种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂对斑马鱼的毒性效应研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 农药对水体环境的污染 |
| 1.3 农药对水生生物的毒性 |
| 1.4 琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂 |
| 1.4.1 概述 |
| 1.4.2 苯并烯氟菌唑 |
| 1.4.3 吡唑萘菌胺 |
| 1.4.4 氟唑环菌胺 |
| 1.4.5 琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂的毒理学研究情况 |
| 1.5 斑马鱼及其胚胎在毒理学中的应用 |
| 1.5.1 水生模式生物斑马鱼 |
| 1.5.2 斑马鱼在水生毒理学研究中的应用 |
| 1.6 课题目标和主要研究内容 |
| 第二章 三种杀菌剂对斑马鱼胚胎的急性毒性 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料与仪器设备 |
| 2.2.1 实验试剂 |
| 2.2.2 实验仪器与设备 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 斑马鱼的培养 |
| 2.3.2 斑马鱼胚胎的获取 |
| 2.3.3 胚胎急性暴露试验 |
| 2.3.4 统计方法 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 胚胎形态 |
| 2.4.2 胚胎孵化 |
| 2.4.3 胚胎存活率 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 三种杀菌剂对斑马鱼胚胎的发育毒性及机制 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料与仪器设备 |
| 3.2.1 实验试剂 |
| 3.2.2 实验仪器与设备 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 斑马鱼的培养与胚胎的获取 |
| 3.3.2 仔鱼体长 |
| 3.3.3 胚胎运动 |
| 3.3.4 胚胎心脏 |
| 3.3.5 胚胎细胞凋亡 |
| 3.3.6 胚胎氧化应激 |
| 3.3.7 胚胎琥珀酸脱氢酶 |
| 3.3.8 胚胎甲状腺激素 |
| 3.3.9 胚胎免疫相关基因 |
| 3.3.10 统计方法 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 仔鱼体长 |
| 3.4.2 胚胎运动 |
| 3.4.3 胚胎心脏 |
| 3.4.4 胚胎细胞凋亡 |
| 3.4.5 胚胎氧化应激 |
| 3.4.6 胚胎琥珀酸脱氢酶 |
| 3.4.7 胚胎甲状腺激素 |
| 3.4.8 胚胎免疫相关基因 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 三种杀菌剂对斑马鱼成鱼的急性毒性 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料与仪器设备 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 斑马鱼的培养 |
| 4.3.2 成鱼急性致死试验 |
| 4.3.3 成鱼氧化应激 |
| 4.3.4 统计方法 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 成鱼存活率 |
| 4.4.2 成鱼氧化应激 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 三种杀菌剂对斑马鱼成年雌鱼的慢性毒性及机制 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验材料与仪器设备 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 斑马鱼的培养 |
| 5.3.2 雌鱼慢性暴露试验 |
| 5.3.3 雌鱼氧化应激 |
| 5.3.4 雌鱼甲状腺激素 |
| 5.3.5 雌鱼性激素 |
| 5.3.6 雌鱼神经系统 |
| 5.3.7 雌鱼琥珀酸脱氢酶 |
| 5.3.8 组织病理学观察 |
| 5.3.9 统计方法 |
| 5.4 结果与讨论 |
| 5.4.1 雌鱼氧化应激 |
| 5.4.2 雌鱼甲状腺激素 |
| 5.4.3 雌鱼性激素 |
| 5.4.4 雌鱼神经系统 |
| 5.4.5 雌鱼琥珀酸脱氢酶 |
| 5.4.6 雌鱼肠道组织形态 |
| 5.5 小结 |
| 第六章 结论与展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 1 作者简历 |
| 2 攻读博士学位期间发表的学术论文 |
| 学位论文数据集 |
（7）电针足三里对脾气虚模型大鼠骨骼肌PGC-1α/SIRT3信号通路影响的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（8）甘草多糖对萎缩性胃炎胃粘膜细胞的保护作用及其机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 参考文献 |
| 第一部分: 甘草多糖对乙醇诱导的胃粘膜细胞损伤的保护作用的研究 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分: 甘草多糖对慢性萎缩性胃炎大鼠胃粘膜的保护作用的研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述1 慢性胃炎的诊疗研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述2 甘草多糖的药理作用研究进展 |
| 参考文献 |
| 英文缩略词表 |
| 攻读学位期间发表的论着、论文 |
| 致谢 |
（9）蛋鸡饲粮钒对鸡蛋蛋清质量的影响及机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 鸡蛋蛋清 |
| 1.1 蛋清的形成 |
| 1.2 蛋清组成 |
| 1.3 蛋清质量 |
| 1.3.1 蛋清营养含量 |
| 1.3.2 蛋清物理特性 |
| 1.3.3 蛋清加工品质 |
| 1.4 蛋清蛋白组学 |
| 2 钒的性质及对蛋鸡的影响 |
| 2.1 钒简介 |
| 2.1.1 钒的氧化还原性 |
| 2.1.2 V与磷(P)的相似性 |
| 2.1.3 氧钒离子的配位化学 |
| 2.2 钒对蛋鸡的影响 |
| 2.2.1 钒对蛋鸡健康的影响 |
| 2.2.2 钒对鸡蛋品质的影响 |
| 2.2.3 钒影响蛋鸡健康及鸡蛋品质的机制 |
| 3 抗氧化剂缓解钒负面效应 |
| 第二章 研究存在的问题、目的、意义和技术路线 |
| 1 存在的问题 |
| 2 研究目的与意义 |
| 3 技术路线 |
| 第三章 研究内容 |
| 试验一 蛋鸡常用能量和蛋白质饲料中钒含量研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 样品采集 |
| 1.1.1 采样时间与地点 |
| 1.1.2 采样要求 |
| 1.1.3 样品种类与数量 |
| 1.1.4 仪器与试剂 |
| 1.2 测定指标与方法 |
| 1.3 数据分析 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 试验二 蛋鸡饲粮钒水平对鸡蛋蛋清质量的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验设计 |
| 1.2 基础饲粮配制 |
| 1.3 仪器与试剂 |
| 1.4 饲养管理 |
| 1.5 样品的采集与制备 |
| 1.6 测定指标与方法 |
| 1.6.1 蛋清中钒残留 |
| 1.6.2 蛋清高度、pH值与粗蛋白含量 |
| 1.6.3 蛋清凝胶特性 |
| 1.6.4 蛋清凝胶微观结构 |
| 1.6.5 蛋清起泡性 |
| 1.7 数据统计与分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 钒对蛋鸡生产性能的影响 |
| 2.2 钒在蛋清中的残留 |
| 2.3 钒对蛋清中的水分和粗蛋白含量的影响 |
| 2.4 钒对蛋清HU的影响 |
| 2.5 钒对蛋清PH值的影响 |
| 2.6 钒对蛋清凝胶特性的影响 |
| 2.7 钒对蛋清起泡特性的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 钒在蛋清中的残留 |
| 3.2 钒对蛋清水分和粗蛋白含量的影响 |
| 3.3 钒对蛋清高度和PH值的影响 |
| 3.4 钒对蛋清加工特性的影响 |
| 4 小结 |
| 试验三 蛋鸡饲粮钒对鸡蛋蛋清蛋白质组的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验设计 |
| 1.2 基础日粮及动物饲养管理 |
| 1.3 样品采集 |
| 1.4 设备与试剂 |
| 1.4.1 实验仪器 |
| 1.4.2 试剂 |
| 1.5 指标测定与方法 |
| 1.5.1 蛋白提取 |
| 1.5.2 SDS-PAGE电泳 |
| 1.5.3 蛋白质酶解和肽段定量 |
| 1.5.4 肽段标记 |
| 1.5.5 SCX分级 |
| 1.5.6 质谱分析 |
| 1.6 数据统计与分析 |
| 1.6.1 聚类分析 |
| 1.6.2 差异蛋白GO注释 |
| 1.6.3 KEGG信号通路注释 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 蛋清蛋白质SDS-PAGE分离 |
| 2.2 SCX-液相色谱分离 |
| 2.3 蛋清蛋白质分离鉴定 |
| 2.3.1 蛋清蛋白质相对分子量分布 |
| 2.3.2 蛋白质等电点分布 |
| 2.4 钒对蛋清蛋白质组学的影响 |
| 2.5 差异蛋白CLUSTER聚类分析图 |
| 2.6 GO功能注释 |
| 2.7 差异表达蛋白KEGG信号通路富集 |
| 3 讨论 |
| 3.1 钒对蛋清中固有蛋白的影响 |
| 3.2 钒对蛋清中来自输卵管细胞的蛋白的影响 |
| 3.3 钒对蛋清中来自血液的蛋白的影响 |
| 4 小结 |
| 试验四 钒对蛋鸡输卵管膨大部氧化应激与细胞凋亡的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验设计 |
| 1.2 基础饲料及饲养管理 |
| 1.3 试验仪器 |
| 1.4 试剂与耗材 |
| 1.5 样品的采集与制备 |
| 1.6 测定指标与方法 |
| 1.6.1 蛋鸡输卵管膨大部氧化指标 |
| 1.6.2 输卵管膨大部病理观察 |
| 1.6.3 输卵管膨大部细胞凋亡 |
| 1.6.4 输卵管膨大部相关基因mRNA表达量 |
| 1.6.5 输卵管膨大部相关基因蛋白表达量 |
| 1.7 数据统计与分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 钒在蛋鸡输卵管膨大部的残留 |
| 2.2 输卵管膨大部粘膜抗氧化指标 |
| 2.3 钒对输卵管膨大部病理指标的影响 |
| 2.4 钒对输卵管膨大部细胞凋亡率的影响 |
| 2.5 输卵管膨大部蛋清蛋白质分泌相关基因的MRNA表达 |
| 2.6 钒对输卵管膨大部细胞凋亡相关基因MRNA表达量的影响 |
| 2.7 钒对输卵管膨大部细胞凋亡相关基因蛋白表达量的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 钒在蛋鸡输卵管膨大部的残留 |
| 3.2 钒造成蛋鸡输卵管膨大部氧化应激、组织损伤和细胞凋亡 |
| 3.3 钒造成的输卵管膨大部氧化损伤影响蛋清蛋白质组成 |
| 3.3.1 蛋清固有蛋白质 |
| 3.3.2 输卵管膨大部细胞脱落入蛋清的蛋白 |
| 3.3.3 血液渗透入蛋清的蛋白质 |
| 4 小结 |
| 试验五 蛋鸡饲粮添加茶多酚缓解钒对鸡蛋蛋清质量的影响研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验设计 |
| 1.2 基础饲粮及饲养管理 |
| 1.3 设备与试剂 |
| 1.3.1 试验仪器 |
| 1.3.2 试验试剂 |
| 1.4 样品采集 |
| 1.5 指标测定与方法 |
| 1.5.1 蛋清和输卵管膨大部中钒残留 |
| 1.5.2 蛋清HU与pH |
| 1.5.3 蛋清加工特性 |
| 1.5.4 蛋清蛋白组学分析 |
| 1.5.5 蛋鸡输卵管膨大部氧化指标 |
| 1.5.6 输卵管膨大部细胞凋亡 |
| 1.5.7 输卵管膨大部病理观察 |
| 1.6 数据分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 钒和茶多酚对蛋清和输卵管膨大部中钒残留的影响 |
| 2.2 钒和茶多酚对蛋清HU和PH值的影响 |
| 2.3 钒和茶多酚对蛋清凝胶特性的影响 |
| 2.4 饲粮钒和茶多酚对蛋清起泡特性的影响 |
| 2.5 钒和茶多酚对蛋清蛋白组学的影响 |
| 2.6 CLUSTER分析 |
| 2.7 钒和茶多酚造成的差异蛋白质生物信息学分析 |
| 2.8 单独添加茶多酚造成的差异蛋白质生物信息学分析 |
| 2.9 输卵管膨大部氧化指标 |
| 2.10 输卵管膨大部组织病理学损伤 |
| 2.11 输卵管膨大部细胞凋亡率 |
| 3 讨论 |
| 3.1 茶多酚缓解钒在蛋清及输卵管膨大部中的残留 |
| 3.2 茶多酚缓解钒对蛋清HU的影响 |
| 3.3 茶多酚缓解钒对蛋清加工特性的影响 |
| 3.4 茶多酚对钒造成的蛋清蛋白组学变化的影响 |
| 3.4.1 茶多酚对钒造成的蛋清固有蛋白质变化的影响 |
| 3.4.2 茶多酚对钒造成的输卵管脱落和血液带入的蛋清蛋白质变化的影响 |
| 3.5 茶多酚缓解钒对蛋鸡输卵管膨大部的氧化应激与损伤 |
| 4 小结 |
| 第四章 全文讨论、结论与创新性 |
| 1 全文讨论 |
| 2 全文结论 |
| 3 创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（10）叶黄素对LPS应激黄羽肉鸡生长性能、抗氧化及免疫功能的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词(Abbreviations) |
| 第一章 文献综述 |
| 1 研究目的和意义 |
| 2 国内外研究现状 |
| 2.1 鸡的免疫功能发育特点 |
| 2.2 免疫应激对动物的影响 |
| 2.3 缓解免疫应激的措施 |
| 2.4 免疫应激模型的建立 |
| 2.5 TLR4、MyD88信号通路的作用机制 |
| 2.6 叶黄素的概念及生物学功能 |
| 3 研究内容 |
| 3.1 试验内容 |
| 3.2 研究目标 |
| 3.3 技术路线 |
| 第二章 LPS对肉鸡生长性能、抗氧化及免疫功能的影响 |
| 1 试验材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验设计及饲养管理 |
| 1.3 试验日粮 |
| 1.4 样品采集及制备 |
| 1.5 测定指标及方法 |
| 1.6 数据处理 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 LPS对肉鸡生长性能的影响 |
| 2.2 LPS对肉鸡抗氧化功能的影响 |
| 2.3 LPS对肉鸡免疫功能的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 LPS对肉鸡生长性能的影响 |
| 3.2 LPS对肉鸡抗氧化功能的影响 |
| 3.3 LPS对肉鸡免疫功能的影响 |
| 3.4 肉鸡免疫应激模型的建立 |
| 4 小结 |
| 第三章 叶黄素对LPS应激肉鸡生长性能、抗氧化及免疫功能的影响 |
| 1 试验材料与方法 |
| 1.1试验材料 |
| 1.2 试验设计及饲养管理 |
| 1.3 试验日粮 |
| 1.4 样品采集及制备 |
| 1.5 测定指标及方法 |
| 1.6 数据处理 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 叶黄素对LPS应激肉鸡生长性能的影响 |
| 2.2 叶黄素对LPS应激肉鸡抗氧化功能的影响 |
| 2.3 叶黄素对LPS应激肉鸡免疫功能的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 叶黄素对LPS应激肉鸡生长性能的影响 |
| 3.2 叶黄素对LPS应激肉鸡抗氧化功能的影响 |
| 3.3 叶黄素对LPS应激肉鸡免疫功能的影响 |
| 4 小结 |
| 第四章 结论与建议 |
| 1 主要结论 |
| 1.1 LPS对肉鸡生长性能、抗氧化及免疫功能的影响 |
| 1.2 叶黄素对LPS应激肉鸡生长性能、抗氧化及免疫功能的影响 |
| 2 创新点 |
| 3 有待于进一步研究和解决的问题 |
| 参考文献 |
| 附录A 抗氧化指标的测定方法 |
| 附录B 酶联免疫检测(ELISA)方法 |
| 附录C 实时荧光定量PCR |
| 攻读学位期间的学术论文与研究成果 |
| 致谢 |
四、应激时大鼠胃粘膜中MDA含量和CAT、Ca~(2+)-ATPase活性的变化（论文参考文献）
- [1]丹酚酸B预处理对大鼠小肠缺血再灌注损伤的保护作用研究[D]. 陈嘉希. 南昌大学, 2020(01)
- [2]AMPK-PINK1/Parkin介导的线粒体自噬在氧化应激仔猪肠屏障修复中的作用及姜黄素的调控机制[D]. 曹舒婷. 浙江大学, 2020(02)
- [3]氧化应激介导的能量代谢、细胞凋亡和自噬在氨气诱导鸡肝脏损伤中的作用研究[D]. 徐延敏. 东北农业大学, 2020
- [4]猪内脂素重组蛋白的优化及其在断奶仔猪免疫炎症反应中的作用[D]. 李慧珍. 华中农业大学, 2020
- [5]低氧诱导因子1α在脓毒症肠道上皮损伤中的作用机制研究[D]. 滕文彬. 浙江大学, 2020(02)
- [6]三种琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂对斑马鱼的毒性效应研究[D]. 姚鸿州. 浙江工业大学, 2019(02)
- [7]电针足三里对脾气虚模型大鼠骨骼肌PGC-1α/SIRT3信号通路影响的实验研究[D]. 刘路. 辽宁中医药大学, 2019(02)
- [8]甘草多糖对萎缩性胃炎胃粘膜细胞的保护作用及其机制研究[D]. 钱峻. 苏州大学, 2018(04)
- [9]蛋鸡饲粮钒对鸡蛋蛋清质量的影响及机理研究[D]. 柏雪. 四川农业大学, 2018(02)
- [10]叶黄素对LPS应激黄羽肉鸡生长性能、抗氧化及免疫功能的影响[D]. 张杰. 福建农林大学, 2017(01)